實(shí)驗(yàn)二徒手切片法和臨時(shí)裝片的制作方法以及植物細(xì)胞和組織觀察_

2023年12月29日發(fā)(作者：校園文化主題)

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實(shí)驗(yàn)二 臨時(shí)裝片的制作方法和徒手切片法以及植物細(xì)胞、組織觀察

一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

1、 掌握臨時(shí)裝片的制片方法、掌握徒手切片的方法

2、 了解植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

二、 實(shí)驗(yàn)材料

顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、吸水紙、解剖針、培養(yǎng)皿、毛筆、滴管、紗布、0.9%的NaCl溶液；洋蔥、馬鈴薯、芹菜、番茄

三、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)方法

（一） 臨時(shí)裝片的制作

1、 擦凈載玻片和蓋玻片

（1） 擦載玻片 用左手的拇指和食指捏信載玻片的邊緣，右手用紗布將載玻片上下兩面包住，然后反復(fù)擦拭，擦好后放在干凈處備用。

（2） 擦蓋玻片 先用左手拇指和食指輕輕捏住蓋玻片的一角，再將右手拇指和食指用紗布把蓋玻片包住，然后從上下兩面隔著紗布慢慢地進(jìn)行擦試。

2、 取樣

用滴管滴一點(diǎn)水或其他溶液（根據(jù)需要）于載玻片的中央，把觀察物放于載玻片上的液滴中，展開或搖勻。

3、 蓋蓋玻片

右手持鑷子，輕輕夾住蓋玻片的一角，使蓋玻片的邊緣與液滴的邊緣接觸，然后慢慢傾斜下落，最后平放于載玻片上，避免氣泡的產(chǎn)生。如蓋玻片下的液體過多，可用吸水紙將多余的液體吸掉。

（二） 徒手切片法

徒手切片法不需要任何的機(jī)械設(shè)備，只需要一把鋒利的刀片就可以完成切片的制作，方法簡(jiǎn)單，也容易保持物的生活狀態(tài)，有很大的實(shí)用價(jià)值。

1、 選材

選擇軟適度的材料，先截成適當(dāng)?shù)亩螇K。一般直徑大小以3~5mm、長(zhǎng)度以20~30mm為宜。若材料太軟，如幼葉等，不能直接拿在手中進(jìn)行切片，可用適當(dāng)大小的馬鈴薯塊莖或蘿卜塊根等作支持物，將材料夾入其中，一起切片。

2、 切片

用左手拇指、食品指和中指夾住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口損傷手指。材料和刀刃上蘸水，使其濕潤(rùn)。右手拇指和食指橫向平握刀片，刀片要與材料斷面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料斷面的位置，以均勻的力量和平穩(wěn)的動(dòng)作從左前方向向右后方拉切。切片時(shí)要用臂力而不用腕力，手腕不要?jiǎng)樱恐狻⒓珀P(guān)節(jié)的屈伸來(lái)切片，拉切要快，中途不要停頓，更不能用拉鋸方式進(jìn)行切片。

每切2~3片就要把刀片上的薄片用濕毛筆移入盛有清水的培養(yǎng)皿中暫存?zhèn)溆谩Ｈ绨l(fā)現(xiàn)材料切面出現(xiàn)傾斜，應(yīng)修平切面后再繼續(xù)切片。

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3、 鏡檢觀察

連續(xù)切下很多切片后，挑選最薄的切片放于加了1滴清水的載玻片，蓋上蓋玻片，制成臨時(shí)裝片，進(jìn)行鏡檢、觀察。

（三） 植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)觀察

1、 洋蔥表皮細(xì)胞的觀察

取一潔凈載玻片，于載玻片中央加上一滴水。取洋蔥一個(gè)，剝下一片新鮮的帶紫色的南鱗葉，和刀片從外表面（或內(nèi)表面）切一個(gè)面積為4mm2左右的方形小格，然后用鑷子將表皮撕下，迅速入入載玻片上的小水滴中（表面向上）。并使其平展，蓋上蓋玻片，即制成臨時(shí)裝片。將裝片放在顯微鏡下，用低倍鏡觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

（1） 細(xì)胞的形狀

洋蔥表皮由一層細(xì)胞構(gòu)成，所有的細(xì)胞都有相似的—扁磚狀。細(xì)胞之間排列緊密，沒有間隙。

（2） 細(xì)胞壁

為植物細(xì)胞所特有的結(jié)構(gòu)，較透明，因此只能看到其側(cè)壁。初看時(shí)，好像兩個(gè)相鄰細(xì)胞只有一層壁，但是，通過增加反差和仔細(xì)調(diào)焦就能發(fā)現(xiàn)這實(shí)際上是三層，即兩側(cè)相鄰兩細(xì)胞的細(xì)胞壁及中間的胞間層。

（3） 細(xì)胞質(zhì)

為無(wú)色透明的膠狀物，充滿整個(gè)細(xì)胞。由于中央有大的液泡，被擠成一薄層，分布于細(xì)胞周圍，僅細(xì)胞兩端較明顯。

（4） 細(xì)胞核

為球形小體。由于中央有大液泡，也被擠向近細(xì)胞壁處。

（5） 細(xì)胞膜

非常薄，而且與細(xì)胞壁緊貼在一起，因此不易觀察到。

（6） 液泡

一個(gè)或幾個(gè)，位于細(xì)胞中央，里面充滿細(xì)胞液，所以比細(xì)胞質(zhì)透明。

2、 果肉離散細(xì)胞觀察

用解剖針挑取少許已經(jīng)紅熟的的番茄果肉（以臨近果皮的為好），把它們放在載玻片上的水滴中，用解剖針將果肉細(xì)胞撥勻，分散得越開越好，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察。可以看到圓形或卵圓形的離散細(xì)胞，同樣也可以觀察到細(xì)胞壁、細(xì)胞核和很大的液泡。此外，還可以看到帶色的圓形小顆粒，即有色體。

3、 厚角組織

用徒手切片法做芹菜葉柄的橫切片，選取薄而透明的切片制成臨時(shí)裝片，置于低倍鏡下觀察。在芹菜葉柄棱角處的表皮內(nèi)方有厚角存在，這些細(xì)胞的細(xì)胞壁在角隅處有增厚。

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實(shí)驗(yàn)三 植物根、莖、葉、花結(jié)構(gòu)的觀察

一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

1、掌握雙子葉植物和單子葉植物根的初生結(jié)構(gòu)以及根的次生結(jié)構(gòu)

觀察并掌握葉片的內(nèi)部結(jié)構(gòu)；

2、掌握莖的初生結(jié)構(gòu)和次生結(jié)構(gòu)；

3、觀察并掌握葉的內(nèi)部結(jié)構(gòu)；

二、 實(shí)驗(yàn)材料

雙子葉植物幼根（棉花）橫切片，小麥或玉米根橫切片、棉花老根橫切片；雙子葉植物幼莖橫切片、玉米莖橫切片、椴樹莖橫切片；棉花（或蠶豆、迎春葉）葉片橫切片，玉米（或小麥、水稻等單子葉植物）葉片橫切片

三、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

（一） 根的結(jié)構(gòu)

1、 雙子葉根的初生結(jié)構(gòu)

取雙子葉植物幼根橫切片顯微鏡觀察。雙子葉植物根的初生結(jié)構(gòu)從外向內(nèi)由表皮、皮層和維管柱一部分組成。

（1） 表皮 是根的最外一層細(xì)胞，排列緊密整齊，無(wú)細(xì)胞間隙。有的表皮細(xì)胞可觀察到向外突起形成的根毛（或根毛殘?bào)w）。

（2） 皮層 在表皮之內(nèi)維管柱之外的部分，占幼根的大部分，由多層薄壁細(xì)胞組成，可進(jìn)一步分為外皮層、皮層薄壁細(xì)胞和內(nèi)皮層三部分。

A、 外皮層：靠近表皮之下的幾層細(xì)胞（一般為1~3層），細(xì)胞較小，細(xì)胞壁常木栓化，代替表皮起暫時(shí)的保護(hù)作用。

B、 皮層薄壁細(xì)胞：細(xì)胞體積較大，排列疏松，有較大的細(xì)胞間隙，細(xì)胞具有儲(chǔ)藏作用。

C、 內(nèi)皮層：是皮層最內(nèi)層的細(xì)胞，圍繞著內(nèi)部的維管柱，細(xì)胞小，排列緊密，細(xì)胞橫壁和徑向壁上具有木栓化的加厚帶狀物——?jiǎng)P氏帶，在根的橫切面上可見兩相鄰的內(nèi)皮層細(xì)胞間明顯的加深的點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)——?jiǎng)P氏點(diǎn)。

（3） 維管柱 內(nèi)皮層以內(nèi)的中央部分，細(xì)胞較小，排列緊密，可分為中柱鞘、初生韌皮部、初生木質(zhì)部、薄壁細(xì)胞。

A、 中柱鞘：內(nèi)皮層里面的1~2層薄壁細(xì)胞，排列緊密整齊。這些細(xì)胞具有潛在的分生能力，側(cè)根、木栓形成層（首次）、維管1文檔來(lái)源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.

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形成層的一部分由這部分發(fā)生。

B、 初生木質(zhì)部和初生韌皮部：蠶豆的初生維管組織由4個(gè)木質(zhì)部束和4個(gè)韌皮部束組成，它們彼此單獨(dú)成束，相間排列。初生木質(zhì)部在維管柱中心呈十字形輻射排列。靠近4個(gè)輻射角的是原生木質(zhì)部，近中央的是后生木質(zhì)部。初生木質(zhì)部的導(dǎo)管細(xì)胞壁厚，腔大。原生導(dǎo)管口徑比后生導(dǎo)管口徑小。初生韌皮部位于兩木質(zhì)部束之間，同樣原生韌皮部在外，后生韌皮部在內(nèi)。

C、 薄壁細(xì)胞：位于初生木質(zhì)部和初生韌皮部之間，這部分細(xì)胞可以恢復(fù)分生能力，形成維管形成層的一部分。蠶豆根中央的薄壁細(xì)胞形成髓。

2、 單子葉植物根的初生結(jié)構(gòu)

取小麥或玉米根橫切片觀察。單子葉植物的根只有初生結(jié)構(gòu)，其也是由表皮、皮層和維管柱三部分組成。

（1） 表皮 是根的最外一層細(xì)胞，排列緊密整齊，可觀察到根毛殘?bào)w。

（2） 皮層 在表皮內(nèi)。靠近表皮下的幾層細(xì)胞（1~2層），細(xì)胞較小，稱為外皮層。在較老的材料中可見2~3層細(xì)胞壁常木栓化，代替表皮起保護(hù)作用，被染成紅色。內(nèi)皮層細(xì)胞的5個(gè)面都加厚，并木栓化，僅外切向壁是薄的顯微鏡下呈馬蹄形。僅在正對(duì)木質(zhì)部的地方保留1~2個(gè)細(xì)胞壁不加厚的細(xì)胞，稱通道細(xì)胞。

（3） 維管柱 由中柱鞘、初生韌皮部、初生木質(zhì)部、木質(zhì)部和韌皮部之間的薄壁細(xì)胞及髓幾部分組成。

中柱鞘是維管柱最外邊排列緊密的小細(xì)胞，它的內(nèi)側(cè)是相間排列成一輪的初生木質(zhì)部和初生韌皮部，兩者之間是薄壁細(xì)胞。維管柱中央是由大型薄壁細(xì)胞組成的髓。

3、 根的次生結(jié)構(gòu)

取棉花老根橫切片觀察。表皮與皮層已經(jīng)脫落。在顯微鏡下觀察，棉花老根由外向內(nèi)分為周皮、韌皮部、維管形成層、木質(zhì)部等幾部分。

（1） 周皮 位于老根的最外方，從外向內(nèi)可區(qū)分為木栓層、木栓形成層和栓內(nèi)層。木栓層是老根外排列整齊的幾層死細(xì)胞，在橫切面上呈扁方形，徑向壁排列整齊，常被染成紅色。1文檔來(lái)源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.

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在木栓層內(nèi)方，有一層被固綠染成黃色的扁方形的薄壁細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)較濃，有的細(xì)胞能見到細(xì)胞核，即為木栓形成層。在木栓形成層的內(nèi)側(cè)，有1~2層較大的薄壁細(xì)胞，被固綠染成藍(lán)綠色即為栓內(nèi)層。

（2） 韌皮部 由初生韌皮部和次生韌皮部（主要為次生韌皮部）組成。初生韌皮部在栓內(nèi)層以內(nèi)，大部分因擠壓而毀壞，常不能分辨。次生韌皮部位于初生韌皮部?jī)?nèi)側(cè)，被固綠染成藍(lán)綠色，由篩管、伴胞、韌皮薄壁細(xì)胞和韌皮纖維組成。其中細(xì)胞較大的為篩管，緊靠篩管的較小細(xì)胞為伴胞。韌皮薄壁細(xì)胞較大，在橫切面上與篩管形態(tài)相似，常不易區(qū)分。韌皮纖維細(xì)胞細(xì)胞壁厚，被染成淡紅色。此外在韌皮部還有徑向排列的韌皮射線。

（3） 維管形成層 位于次生韌皮部和次生木質(zhì)部之間，由一層扁形的被染成淺綠色的薄壁細(xì)胞組成。顯微鏡下可發(fā)現(xiàn)被染成淡綠色的扁形細(xì)胞不只一層，這是因?yàn)樾纬蓪蛹?xì)胞分裂非常迅速，剛產(chǎn)生的細(xì)胞尚未分化成熟，與形成層細(xì)胞很難區(qū)別，故被稱為“形成層帶”。

（4） 木質(zhì)部 由次生木質(zhì)部和初生木質(zhì)部組成。次生木質(zhì)部位于形成層之內(nèi)，在次生根橫切面上占較大的比例。被番紅染成紅色，它由導(dǎo)管、管胞、木薄壁細(xì)胞和木纖維組成。其中口徑較大、呈圓形或近圓形，增厚的木質(zhì)化次生壁被染成紅色的死細(xì)胞為導(dǎo)管；管胞和木纖維在橫切面上口徑較小，可與導(dǎo)管區(qū)分，也染成紅色，而木纖維壁較管胞更厚。木薄壁細(xì)胞被染成綠色。木射線是呈徑向排列的薄壁細(xì)胞，綠色。木玫韌皮射線是連通的，合稱射線。初生木部在次生木部之內(nèi)，位于根的中央，呈星芒狀。

（二） 莖的結(jié)構(gòu)

1、 雙子葉植物莖的初生結(jié)構(gòu)

取雙子葉植物幼莖橫切片觀察。雙子葉植物幼莖的橫切面可分為表皮、皮層和維管柱三部分。

（1） 表皮 僅一層細(xì)胞，排列緊密，排列規(guī)則，外壁上有角質(zhì)層，表皮上有氣孔和表皮毛。

（2） 皮層 表皮與維管柱之間的部分，所占比例較根小得多。靠近表皮的幾層細(xì)胞比較小，為厚角組織，可增強(qiáng)幼莖的支持能力，其內(nèi)是數(shù)層薄壁細(xì)胞，其細(xì)胞體積較大，排列疏松，有細(xì)胞間隙。

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（3） 維管柱 皮層以內(nèi)的軸狀部分，較發(fā)達(dá)，占幼莖橫切面中央較大的面積，由維管束、髓和髓射線組成。

A、 維管束：呈束狀，染色較深，在橫切面上許多維管束排成一環(huán)。維管束之間為薄壁組織所隔離。每個(gè)維管束都由位于外部的初生韌皮部、位于內(nèi)部的初生木質(zhì)部和介于韌皮部和木質(zhì)部之間的束中形成層組成。

B、 髓和髓射線：髓位于莖的中央，多為具有細(xì)胞間隙的薄壁細(xì)胞組成，髓射線為相鄰的維管束之間的薄壁細(xì)胞組成。

2、 單子葉植物莖的初生結(jié)構(gòu)

絕大多數(shù)單子葉植物莖中沒有形成層，莖不能增粗，只初生結(jié)構(gòu)，構(gòu)造比較簡(jiǎn)單，維管成散生狀態(tài)，分布于基本組織中。取玉米莖橫切片觀察，其由表皮、基本組織和維管束組成。

維管束分散在基本組織中，外方多而小，分布比較密集；靠近中央則大而少，分布比較疏松。玉米莖的維管束是外韌維管束，每個(gè)維管束的外層是數(shù)層厚壁細(xì)胞構(gòu)成的維管束鞘，內(nèi)面只有木質(zhì)部和韌皮部，無(wú)形成層。韌皮部位于外方，通常只有篩管和伴胞。木質(zhì)部通常含有3~4個(gè)顯著的被染成紅色的導(dǎo)管，在橫切面上排列成“V”形，近外部是由兩個(gè)孔紋導(dǎo)管和一些管胞組成的后生木質(zhì)部，近內(nèi)部是由1~2個(gè)較小的導(dǎo)管和少量的薄壁細(xì)胞級(jí)成原生木質(zhì)部。小導(dǎo)管的內(nèi)側(cè)有一個(gè)大的空腔，是由最早形成的導(dǎo)管被拉扯環(huán)形成的，叫氣腔或胞間道。

小麥和水稻莖的結(jié)構(gòu)與玉米莖的基本相同，也可用于觀察。最明顯的不同是：小麥和水稻莖的維管束一般只有兩圈分布在基本組織中，同時(shí)，莖中空，中央為髓腔。

3、 雙了葉植物木本莖的次生結(jié)構(gòu)

取2~3年生的椴樹莖橫切片觀察。

（1） 周皮 位于莖的最外層，由數(shù)層扁平細(xì)胞構(gòu)成，由木栓層、木栓形成層和栓內(nèi)層三部分組成。

（2） 皮層 在周皮之商，僅數(shù)層薄壁細(xì)胞，其中靠外圍的細(xì)胞排列緊密，靠?jī)?nèi)的細(xì)胞排列比較疏松。

（3） 韌皮部 位于最外方的初生韌皮部已擠毀。次生韌皮部的細(xì)胞排列成外窄里寬的梯形。韌皮纖維被染成紅色，韌皮薄壁細(xì)胞、篩管和伴胞被染成深淺不同的綠色。在次生韌皮1文檔來(lái)源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.

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部之間有薄壁細(xì)胞構(gòu)成的髓射線貫穿，多列髓射線細(xì)胞排列呈倒三角形。

（4） 維管形成層 位于韌皮部和木質(zhì)部之間，只有一層細(xì)胞，但因?yàn)槠浞至殉鰜?lái)的細(xì)胞還沒有成熟，所以看上去有多層，形成層的細(xì)胞呈扁平狀，排列整齊成環(huán)，被染成綠色。

（5） 木質(zhì)部 在維管形成層以內(nèi)，其中初生木質(zhì)部位于莖的中心，與髓相連，所占面積很小。次生木質(zhì)部占據(jù)橫切面的絕大部分，由于構(gòu)成它的細(xì)胞的大小和壁的厚薄不同，可以明顯看出年輪的界線。次生木質(zhì)部的細(xì)胞有導(dǎo)管、管胞、木纖維和木薄壁細(xì)胞。在次生木質(zhì)部中還有許多由單列或幾列薄壁細(xì)胞構(gòu)成的木射線。木射線和韌皮射線合管維管射線。

（6） 髓 位于莖的中心，由薄壁細(xì)胞組成。在髓的外部緊靠初生木質(zhì)部處，有數(shù)層排列緊密、體積較小的薄壁細(xì)胞，稱為環(huán)髓帶。

（三） 葉的結(jié)構(gòu)

1、 雙子葉植物葉片的結(jié)構(gòu)

取棉花（或其它雙子葉植物）葉橫切片觀察，首先在低倍鏡下區(qū)分表皮、葉肉和葉脈等基本構(gòu)造，然后再轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察。

（1） 表皮 由一層細(xì)胞構(gòu)成，橫切面上呈長(zhǎng)方形，排列緊密，細(xì)胞外壁角質(zhì)化，有角質(zhì)層。在表皮細(xì)胞中，還可以觀察到成對(duì)的、染色較深的小細(xì)胞——保衛(wèi)細(xì)胞，保衛(wèi)細(xì)胞之間的縫隙即氣孔。

（2） 葉肉 上下表皮之間的綠色部分，屬同化組織。靠上表皮的是柵欄組織，細(xì)胞圓柱形，細(xì)胞的長(zhǎng)軸和葉表面垂直排列，并與表皮細(xì)胞緊密相鄰。柵欄組織細(xì)胞排列緊密而整齊，細(xì)胞內(nèi)含葉綠體多。靠近下表皮的是海綿組織，細(xì)胞形狀不甚規(guī)則，常呈圓形、橢圓形等。細(xì)胞排列沒有定序，細(xì)胞間隙比較發(fā)達(dá)，海綿細(xì)胞內(nèi)含葉綠體較少。氣孔下文較大的細(xì)胞間隙稱孔下室。

（3） 葉脈 是葉肉中的維管組織，常伴生一定的機(jī)械組織，分布在維管束的上、下方。葉片的主脈具有較大的維管束，其近軸面（靠近上表皮的一面），是維管束的木質(zhì)部，在遠(yuǎn)軸面，是維管束的韌皮部，兩者之間也見到幾層扁平細(xì)胞，為束中形成層。韌皮部的下方是較發(fā)達(dá)的薄壁組織和機(jī)械組織。（中小型葉脈中一般沒有形成層，只有木質(zhì)部和韌皮部，1文檔來(lái)源為:從網(wǎng)絡(luò)收集整理.word版本可編輯.

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其外包圍著薄壁組織構(gòu)成的維管束鞘。）

2、 單子葉植物葉片的結(jié)構(gòu)

取玉米（或其他單子葉植物）的葉片橫切片觀察。其結(jié)構(gòu)也可分為表皮、葉肉和葉脈三部分。

（1） 表皮 表皮細(xì)胞排列緊密，外壁具有角質(zhì)膜。注意觀察泡狀細(xì)胞（運(yùn)動(dòng)細(xì)胞）。泡狀細(xì)胞位于兩個(gè)葉脈之間，為大型的薄壁細(xì)胞，泡狀細(xì)胞在葉的橫切面上常呈扇形排列，中間的較大，兩側(cè)的較小。表皮細(xì)胞間還有氣孔器，氣孔內(nèi)側(cè)有氣室，氣孔器由兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞和兩個(gè)副衛(wèi)細(xì)胞組成。

（2） 葉肉 葉肉無(wú)柵欄組織和海綿組織之分，由薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞間隙小，細(xì)胞內(nèi)含有葉綠體，屬同化組織。

（3） 葉脈 葉內(nèi)維管呸，木質(zhì)部靠近上表皮，韌皮部靠近下表皮。玉米的維管束外有一層維管束鞘，是由較大的薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)含有的葉綠體比葉肉細(xì)胞的多，為C4植物。中脈處，在維管束外，上下表皮內(nèi)通常可見到成束的厚壁細(xì)胞。

小麥、水稻等植物的維管束外有兩層維管束鞘，外層細(xì)胞大而薄，含葉綠體比葉肉細(xì)胞少，內(nèi)層細(xì)胞厚，細(xì)胞小，稱C3植物。

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