微衛(wèi)星標(biāo)記在畜禽品種品系鑒定上的應(yīng)用

2024年3月8日發(fā)(作者：張航宇)

《上海畜牧獸醫(yī)通訊》２０１０年第５期　?　５７　?　微衛(wèi)星標(biāo)記在畜禽品種品系鑒定上的應(yīng)用　李何君　劉　煒　吳昊昊　孫東東　俞湘麟　（上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心　上海　２０１１０３）　畜禽品種品系鑒定方法是根據(jù)動(dòng)物群體的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞　學(xué)、生化及分子等標(biāo)記特征來(lái)判斷其來(lái)源、歸屬及它們之間　親緣關(guān)系等內(nèi)容的一種方法。用于鑒定的不同標(biāo)記特征各　異，鑒定效果也有所差別。形態(tài)學(xué)標(biāo)記指畜禽品種品系所具　有的標(biāo)準(zhǔn)外貌特征，細(xì)胞學(xué)標(biāo)記主要是染色體的核型（染色　再利用不同的群體聚類統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行聚類分析。目前群體　聚類統(tǒng)計(jì)方法主要有系統(tǒng)樹(shù)分析法、最大似然法及Ｂａｙｅｓ方　法…。系統(tǒng)樹(shù)分析法是根據(jù)畜禽個(gè)體或群體間的遺傳距離，　采用某種方法構(gòu)建系統(tǒng)樹(shù)，再根據(jù)系統(tǒng)樹(shù)的聚類情況進(jìn)行判　斷和評(píng)價(jià)。最大似然法是根據(jù)畜禽個(gè)體特定標(biāo)記的基因型，　體數(shù)目、結(jié)構(gòu)、隨體有無(wú)、著絲粒位置等）和帶型（Ｃ帶、Ｎ帶、　Ｇ帶等），生化標(biāo)記主要包括同工酶和等位酶，以上三種標(biāo)記　是基因表達(dá)的結(jié)果，是對(duì)基因差異的間接反映，數(shù)目有限，多　態(tài)性較差，易受環(huán)境條件的影響，影響了鑒定的效果。而分　子標(biāo)記以蛋白質(zhì)、核酸分子的突變?yōu)榛A(chǔ)，檢測(cè)生物遺傳結(jié)　構(gòu)與其變異，是在ＤＮＡ水平上遺傳變異的直接反映，該標(biāo)記　數(shù)量極多，遍及整個(gè)基因組，多態(tài)性高，遺傳穩(wěn)定，不受環(huán)境　及基因表達(dá)與否的限制，而且檢測(cè)該標(biāo)記時(shí)可取用不同發(fā)育　時(shí)期的組織器官甚至細(xì)胞，因此，與形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)和生化標(biāo)　記相比，分子標(biāo)記是現(xiàn)在用于畜禽品種品系鑒定較為常用的　一種標(biāo)記形式。分子標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)發(fā)展歷經(jīng)三代，即以限制　性片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記為主的第一代、以微衛(wèi)星標(biāo)記為主的　第二代以及單核苷酸多態(tài)性為主的第三代，由于第一代標(biāo)記　檢測(cè)步驟繁雜、工作量大，而第三代標(biāo)記檢測(cè)常用的ＤＮＡ芯　片技術(shù)費(fèi)用高，相對(duì)而言，檢測(cè)快速、成本較低的第二代標(biāo)記　是目前用于畜禽品種品系鑒定的理想選擇。　１　概述　１．１　基本原理　微衛(wèi)星（Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ）又稱簡(jiǎn)單重復(fù)序列（Ｓｉｍｐｌｅ　Ｓｅ．　ｑｕｅｎｃｅ　Ｒｅｐｅａｔ，ＳＳＲ）或串聯(lián)重復(fù)序列（Ｓｈｏｒｔ　Ｔａｎｄｅｍ　Ｒｅｐｅａｔ，　ＳＴＲ），是一類廣泛存在于真核生物基因組中的ＤＮＡ串聯(lián)重　復(fù)序列。微衛(wèi)星由核心序列和兩側(cè)的側(cè)翼序列所構(gòu)成，側(cè)翼　序列使微衛(wèi)星特異地定位于染色體某一部位，核心序列一般　為２～６　ｂｐ的重復(fù)，重復(fù)次數(shù)通常在ｌ５～３Ｏ次，核心序列重　復(fù)數(shù)的差異就形成了微衛(wèi)星高度的多態(tài)性。自上世紀(jì)８０年　代末被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，微衛(wèi)星標(biāo)記以其分布廣泛、多態(tài)性高、共顯　性遺傳、容易檢測(cè)的特點(diǎn)，已被大量應(yīng)用于畜禽品種品系的　鑒定。　１．２檢測(cè)方法　檢測(cè)微衛(wèi)星時(shí)，首先針對(duì)微衛(wèi)星兩端的側(cè)翼序列設(shè)計(jì)引　物，然后利用引物對(duì)模板ＤＮＡ進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增，最后根據(jù)　ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小判斷個(gè)體的基因型。ＰＣＲ擴(kuò)增可采　用單重和多重。單重ＰＣＲ時(shí)，一個(gè)反應(yīng)體系中只加人一對(duì)　引物，反應(yīng)條件容易控制，但大量檢測(cè)時(shí)效率不高。多重　ＰＣＲ時(shí)，可在同一反應(yīng)體系中加人多對(duì)引物，進(jìn)行多個(gè)目標(biāo)　序列的擴(kuò)增，可節(jié)省ＤＮＡ模板和試驗(yàn)耗材，簡(jiǎn)化操作步驟，　加速試驗(yàn)進(jìn)程。所以，目前大多使用多重ＰＣＲ擴(kuò)增來(lái)檢測(cè)　微衛(wèi)星標(biāo)記。在多重ＰＣＲ時(shí)，為了保證多個(gè)目的片段在１　個(gè)ＰＣＲ反應(yīng)中同時(shí)特異性擴(kuò)增，引物組合的選擇和反應(yīng)條　件的優(yōu)化至關(guān)重要。　１．３數(shù)據(jù)分析　在畜禽品種品系鑒定的數(shù)據(jù)分析中，首先通過(guò)計(jì)算微衛(wèi)　星標(biāo)記的等位基因頻率、多態(tài)信息含量（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎｆｏｒ—　ｍａｒｉｏｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ＰＩＣ）、Ｓｈａｎｎｏｎ指數(shù)、雜合度（ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ。　Ｈ）、平均有效等位基因數(shù)、Ｆ一統(tǒng)計(jì)量和遺傳距離等數(shù)據(jù)后，　采用最大似然法計(jì)算每個(gè)個(gè)體屬于各自采樣群體的最大似　然概率值，從而判斷個(gè)體的歸屬。而Ｂａｙｅｓ方法是根據(jù)畜禽　個(gè)體或群體的基因型組成，運(yùn)用Ｂａｙｅｓ概率理論，從而判斷個(gè)　體或群體屬于各自采樣群體的概率。在親子鑒定中，則需要　計(jì)算個(gè)體鑒別力（ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ，ＤＰ）和非父排除概　率（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ，ＰＥ）等參數(shù)。　２　應(yīng)用　國(guó)際動(dòng)物遺傳學(xué)會(huì)（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ａｎｉｍａｌ　Ｇｅ．　ｎｅｔｉｃｓ，ＩＳＡＧ）向全球提供畜禽物種的微衛(wèi)星引物、對(duì)照ＤＮＡ　樣品和參照基因型，使全球畜禽品種的遺傳多樣性的研究結(jié)　果具有通用性和可比性。隨著ＤＮＡ分子標(biāo)記測(cè)定條件的進(jìn)　一步優(yōu)化，微衛(wèi)星標(biāo)記將更廣泛地應(yīng)用于畜禽品種品系遺傳　特性的鑒定。從應(yīng)用上，大致可分為以下幾大類：（１）引種鑒　定；（２）遺傳多樣性分析；（３）畜禽地方品種遺傳資源的保護(hù)　與利用；（４）親子鑒定。　２．１　引種鑒定　改革開(kāi)放前，中國(guó)以飼養(yǎng)和開(kāi)發(fā)地方品種為主，從國(guó)外　引進(jìn)的畜禽品種不多。改革開(kāi)放后特別是近些年來(lái)，隨著畜　牧業(yè)的迅速發(fā)展，中國(guó)從國(guó)外引進(jìn)了大量的畜禽品種，為了　深入了解引進(jìn)品種的遺傳特征，更有效地利用引進(jìn)品種開(kāi)展　雜交選育工作，有必要對(duì)引進(jìn)品種進(jìn)行遺傳學(xué)分析，而微衛(wèi)　星標(biāo)記已成為當(dāng)前品種鑒定中較理想的選擇。中國(guó)的育種　公司每年都從國(guó)外引進(jìn)大量的高代次種雞，在曾祖代蛋雞　中，無(wú)論是白殼蛋雞還是褐殼蛋雞都是以四系配套的形式引　進(jìn)的，但是從多年的育種和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)反映出，引進(jìn)的四系配　套有些可能為三系配套。李顯耀等（２００３）［　選用２０個(gè)微衛(wèi)　星標(biāo)記對(duì)上海Ｘ場(chǎng)、北京Ｙ場(chǎng)２００１年和２００２年引進(jìn)的Ｈ　蛋雞配套系祖代的各品系進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該四系配套的　蛋雞生產(chǎn)體系實(shí)為三系配套，Ａ、Ｂ應(yīng)為一個(gè)品系，Ｃ、Ｄ應(yīng)是　兩個(gè)不同的品系，選擇雜合度高于平均雜合度的６個(gè)微衛(wèi)星　標(biāo)記ＡＤＬ１７２、ＡＤＬ２６７、ＬＥＩ１９４、ＭＣＷ２９５、ＭＣＷ３４和　ＬＥＩ２２８即可達(dá)到品系鑒定的目的。張麗娟等（２００４）【３］利用　１Ｏ個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記，對(duì)引進(jìn)國(guó)外的ｗ一９８白殼蛋雞配套系的　四個(gè)系進(jìn)行了品系鑒定，聚類分析結(jié)果表明提供父母代母雞　的Ｃ、Ｄ系為一類，Ｃ、Ｄ系遺傳距離較近，可能發(fā)生近交衰　退，影響整個(gè)雞群的質(zhì)量。　２．２遺傳多樣性分析　遺傳多樣性是生物多樣性的重要組成部分。廣義地講，　遺傳多樣性就是生物所攜帶遺傳信息的總和，但一般所指的　遺傳多樣性是指種內(nèi)的遺傳多樣性或稱遺傳變異【引。在畜　禽品種的遺傳多態(tài)性評(píng)估中，微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)得到了廣泛應(yīng)　用。為了系統(tǒng)研究中國(guó)水牛的品種資源特性，張毅等　（２００６）【５　利用３０個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)１９個(gè)中國(guó)沼澤型水牛群　體、２個(gè)河流型水牛群體和１個(gè)黃牛品種共１　０４０份樣品進(jìn)　行了遺傳多態(tài)性檢測(cè)，結(jié)果表明，中國(guó)水牛具有豐富的遺傳　

?　５８　?　《上海畜牧獸醫(yī)通訊》２０１０年第５期　率為９９．７２８７％、個(gè)體識(shí)別力為９９．９９９％，建立了警犬ＳＴＲ　變異性，３Ｏ個(gè)微衛(wèi)星座位的平均等位基因數(shù)為８．１３，群體內(nèi)　基因多樣性（期望雜合度）為０．５１７～０．６０９，其中西南地區(qū)水　牛群體的遺傳變異性略高于華南和長(zhǎng)江流域的水牛群體。　ＤＮＡ親子鑒定方法。Ｌｕｉｋａｒｔ等（１９９９）【ｌ　）用２２個(gè)微衛(wèi)星　對(duì)克什米爾羊、蒙古羊、安哥拉羊群進(jìn)行了親子鑒定，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)　但中國(guó)水牛的總體遺傳分化程度較低，群體間的遺傳變異占　總遺傳變異的２．８３％。孫飛舟　（２００２）采用２７對(duì)微衛(wèi)星引　物檢測(cè)了５６個(gè)中國(guó)地方豬種和３個(gè)外源豬種共計(jì)３　４００個(gè)　個(gè)體的基因型，結(jié)果顯示，中國(guó)地方豬種的遺傳變異范圍較　大，在２６個(gè)微衛(wèi)星座位上擁有的等位基因數(shù)量非常豐富（１１　～確率都高于０．９９９９。　５４），高于外源豬種的數(shù)量（９～２５），５４個(gè)地方品種擁有６１　３展望　品種遺傳資源是國(guó)家可持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)，《中華人民共　和國(guó)畜牧法》對(duì)畜禽遺傳資源保護(hù)、種畜禽品種選育與生產(chǎn)　經(jīng)營(yíng)等相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行了明確的規(guī)定，特別是在上海都市畜牧　業(yè)轉(zhuǎn)型過(guò)程中，種源畜牧業(yè)的發(fā)展是方向，在２００８年市政府　一個(gè)特有等位基因以及數(shù)量相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢(shì)等位基因，地方豬種的　群體內(nèi)遺傳變異程度極顯著地高于外來(lái)豬種。陳寬維等　號(hào)文中，明確提出要大力發(fā)展種源畜牧業(yè)。　本市種質(zhì)資源豐富。現(xiàn)有種豬場(chǎng)２Ｏ家，核心群種豬約２　（２００９）＂Ｊ通過(guò)２５個(gè)多態(tài)性較好的微衛(wèi)星標(biāo)記，檢測(cè)了我國(guó)　２６個(gè)地方鵝品種１　５６０個(gè)個(gè)體，共檢測(cè)到１９８?jìng)€(gè)等位基因，　群體間存在明顯的遺傳分化，約有２８％的遺傳分化來(lái)自于群　體間的變異。陳國(guó)宏等（２００６）　利用２９對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)我　國(guó)的ｌ２個(gè)地方雞種進(jìn)行群體遺傳結(jié)構(gòu)及遺傳多樣性評(píng)估，　結(jié)果表明，每個(gè)座位的等位基因數(shù)從２～２３不等，所有的１２　個(gè)群體均顯示較高水平的雜合度，固始雞最低為０．４５３２，大　骨雞最高為０．６２７１，雞種間存在較大的遺傳分化，１６．７％的　遺傳變異源于品種間的差異。　２．３地方品種的保護(hù)與利用　世界各國(guó)把遺傳資源作為畜牧生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的重要　物質(zhì)基礎(chǔ)，中國(guó)具有豐富的畜禽地方品種遺傳資源，是畜牧　業(yè)可持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)，畜禽地方品種的特點(diǎn)不盡相同，它們　各自所攜帶的基因也不完全一致，因而每個(gè)品種就形成了一　個(gè)獨(dú)特的基因庫(kù)，它們中間所蘊(yùn)藏的各種豐富基因?yàn)橛N工　作者提供了大量的素材。現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)為我們準(zhǔn)確　了解生物群體遺傳特性提供了方便，使我們能夠在此基礎(chǔ)上　科學(xué)地保護(hù)和利用我國(guó)豐富的地方畜禽品種資源。根據(jù)聯(lián)　合國(guó)糧農(nóng)組織ＦＡＯ和國(guó)際動(dòng)物遺傳學(xué)會(huì)ＩＳＡＧ的建議，微衛(wèi)　星標(biāo)記已經(jīng)作為首選的測(cè)定畜禽遺傳距離的標(biāo)記，并且推薦　了標(biāo)準(zhǔn)引物以便使世界各國(guó)在測(cè)定畜禽遺傳距離的時(shí)候其　數(shù)據(jù)可以相互比較。孫飛舟（２００２）【６　采用世界糧農(nóng)組織　ＦＡＯ和國(guó)際動(dòng)物遺傳學(xué)會(huì)ＩＳＡＧ聯(lián)合推薦的２７對(duì)微衛(wèi)星標(biāo)　記分析了中國(guó)地方豬種的群體內(nèi)和群體間的遺傳變異，將５６　個(gè)中國(guó)地方豬種大致分為１２大類，并建議采取保種場(chǎng)和保　種區(qū)相結(jié)合的保種措施。李榮嶺等（２００７）【９　選用聯(lián)合國(guó)糧　農(nóng)組織（ＦＡ０）和國(guó)際動(dòng)物遺傳學(xué)會(huì)（ＩＳＡＧ）推薦的１２對(duì)微衛(wèi)　星引物，對(duì)１２個(gè)中外牛品種群體遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，結(jié)果　１２個(gè)中外牛品種被聚為４類，即南方黃牛品種、中原黃牛品　種、北方黃牛和外來(lái)牛品種，為中國(guó)地方牛品種的保護(hù)和利　用提供了理論依據(jù)。李慧芳等（２００８）【１　０］利用２８對(duì)微衛(wèi)星　標(biāo)記對(duì)中國(guó)２４個(gè)地方鴨品種的親緣關(guān)系進(jìn)行分析，結(jié)合中　國(guó)地方鴨種的歷史起源、地理位置、生態(tài)條件、特定性狀以及　形態(tài)特征等，將２４個(gè)中國(guó)地方鴨種分為５大類，為有效保護(hù)　和利用中國(guó)地方鴨種打下了基礎(chǔ)。　２．４親子鑒定　親子鑒定，即利用分子遺傳學(xué)、生物學(xué)及醫(yī)學(xué)的理論和　技術(shù)判斷親代與子代是否具有血緣關(guān)系。由于微衛(wèi)星標(biāo)記　的個(gè)體識(shí)別幾率和非父排除率高，且所需要的檢材量少，靈　敏度和成功率高，ＰＣＲ擴(kuò)增片長(zhǎng)度較短等特點(diǎn)，它被認(rèn)為是　第二代法醫(yī)ＤＮＡ指紋技術(shù)的核心，是目前親子鑒定的主要　發(fā)展方向。葉俊華等（２００５）【ｌ”采用多重ＰＣＲ和四色熒光自　動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)調(diào)查公安部直屬四家警犬基地進(jìn)口種犬和準(zhǔn)　繁犬７個(gè)品種共２６９頭樣本１Ｏ個(gè)微衛(wèi)星ＤＮＡ多態(tài)性，結(jié)果　總共檢測(cè)到８８?jìng)€(gè)等位基因，該１０個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的非父排除　萬(wàn)頭，種豬不僅有梅山豬、楓涇豬、沙烏頭豬、浦東白豬、上海　白豬等地方及培育品種，還有大約克夏豬、杜洛克豬、長(zhǎng)白豬　等外來(lái)引進(jìn)品種。上海的奶牛育種體系完善、育種技術(shù)先　進(jìn)，上海奶牛育種中心有限公司目前存欄優(yōu)質(zhì)荷斯坦種公牛　１８０多頭，年產(chǎn)荷斯坦公牛冷凍精液３６０萬(wàn)支。家禽方面，上　海擁有浦東雞這一優(yōu)良的地方品種，該品種已被作為珍貴的　遺傳資源列入《國(guó)家級(jí)畜禽遺傳資源保護(hù)名錄》，另外，上海　家禽育種有限公司還成功地選育出了褐殼蛋雞配套系。這　些優(yōu)秀種質(zhì)資源的積累，為本市發(fā)展種源生產(chǎn)打下了堅(jiān)實(shí)的　基礎(chǔ)。　微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)的日益成熟，為畜禽品種質(zhì)量的提升帶　來(lái)了良好的機(jī)遇，在本市畜禽種質(zhì)資源的開(kāi)發(fā)與利用中，主　要可以開(kāi)展以下幾方面的工作。　３．１　品種鑒別　３．１．１優(yōu)良種質(zhì)資源引進(jìn)：本市現(xiàn)已從國(guó)外引進(jìn)了大量的　種質(zhì)資源，種群結(jié)構(gòu)和規(guī)模漸趨穩(wěn)定，通過(guò)持續(xù)的育種投入，　品種質(zhì)量有了一定提高。然而，為了實(shí)現(xiàn)種質(zhì)水平的持續(xù)提　升甚至自主培育新品種新品系的目標(biāo)，仍需有目的地少量引　進(jìn)一些高質(zhì)量、高純度的種質(zhì)資源。因此，引進(jìn)的種質(zhì)情況　是否與引進(jìn)目的要求相一致，同一新引進(jìn)的品種品系和已有　的品種品系的遺傳背景有無(wú)差異、是否兼容，引進(jìn)群體的遺　傳穩(wěn)定性好不好，都需要做到科學(xué)監(jiān)測(cè)、有效評(píng)估。微衛(wèi)星　標(biāo)記技術(shù)在這方面具有優(yōu)勢(shì)，為今后的引種工作提供了有力　的技術(shù)支撐。　３．１．２種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)管理：為了滿足市場(chǎng)的多元化需求，　部分種質(zhì)企業(yè)從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)了不同的品種品系，由于系問(wèn)雜　交群體往往在體型外貌和生產(chǎn)性能上具有一定的優(yōu)勢(shì)，個(gè)別　企業(yè)在制種或售種的過(guò)程中，不僅會(huì)有純系，而且還生產(chǎn)了　各種形式的系間雜交群體。企業(yè)為了追求利潤(rùn)，可能會(huì)將系　間雜交群體作為純系進(jìn)行銷售，而購(gòu)買(mǎi)種質(zhì)的客戶單純通過(guò)　體型外貌有時(shí)難以分辨出純系與系間雜交的群體區(qū)別，但如　果作為種質(zhì)進(jìn)行繁育則后代容易出現(xiàn)性狀分離，影響種群的　整齊度和一致性，從而會(huì)與售種企業(yè)發(fā)生經(jīng)濟(jì)糾紛。因此，　可通過(guò)微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)對(duì)純系與系間雜交群體進(jìn)行科學(xué)鑒　定，加強(qiáng)出售畜禽的質(zhì)量監(jiān)測(cè)，規(guī)范種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)行為。　３．２地方品種保護(hù)與開(kāi)發(fā)利用　３．２．１地方品種保護(hù)：為了有效地對(duì)本市畜禽地方品種進(jìn)　行保護(hù)與開(kāi)發(fā)利用，首先有必要利用微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)現(xiàn)有畜禽　地方品種遺傳資源進(jìn)行遺傳多樣性分析，如通過(guò)微衛(wèi)星標(biāo)記　研究梅山豬、沙烏頭豬、楓涇豬、浦東白豬等地方豬種之問(wèn)以　及和其它省市地方品種的遺傳差異，通過(guò)微衛(wèi)星標(biāo)記研究了　解浦東雞的群體遺傳多樣性和進(jìn)化分析等。通過(guò)分析，將從　分子水平上摸清各地方品種的遺傳背景，同時(shí)剔除少量在保　種過(guò)程中有可能出現(xiàn)的與外來(lái)群體雜交群體，為進(jìn)一步的開(kāi)　

《上海畜牧獸醫(yī)通訊》２０１０年第５期　?　５９　?　中草藥添加劑在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究　吳國(guó)林　（青海省湟中縣田家寨鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站青海湟中８１１６０３）　現(xiàn)代飼料工業(yè)中人工合成的飼料添加劑的使用，在對(duì)畜　５　ｇ／ｋｇ、３　ｇ／ｋｇ的劑量添加于４０日齡健康斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧　牧業(yè)起到巨大推動(dòng)作用的同時(shí)，也帶來(lái)了很大的負(fù)面作用。　中，并于７５　１３齡時(shí)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：３個(gè)處理組豬糞便中的大腸埃　大量人工合成的飼料添加劑，如抗生素、促長(zhǎng)劑、驅(qū)蟲(chóng)劑等的　希氏菌數(shù)均低于對(duì)照組，而乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)均明顯高　長(zhǎng)期使用、添加，造成畜產(chǎn)品中如肉、蛋、奶中的藥物殘留，進(jìn)　于對(duì)照組。　而危害人們的健康（王靜等，２００６）。為此，許多國(guó)家已經(jīng)用　１．２在豬育肥中的作用　立法形式禁止或限制在飼料中添加這些藥品。而中草藥兼　大量研究證明，中草藥添加劑可提高豬的采食量，可代　有營(yíng)養(yǎng)和藥用雙重功效，并以其無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)殘留、無(wú)耐藥　替抗生素進(jìn)行豬病的預(yù)防，從而能有效提高育肥豬的日增　性的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。　重。吳鳳舟等（２００６）將沙棘葉、黨參、神曲、蒲公英、蒼術(shù)、陳　１　中草藥添加劑在豬生產(chǎn)中的作用　皮、石膏、芒硝、牡蠣，干制后加工成粉，加入調(diào)味劑，按１％比　１．１　在仔豬生長(zhǎng)中的應(yīng)用　例均勻混合于育肥豬基礎(chǔ)日糧中，試驗(yàn)組豬日增重比對(duì)照組　中草藥添加劑可增強(qiáng)仔豬抗病力，并能顯著提高仔豬的　增加了２０５．６　ｇ。翟向和等（２００６）用黃芪、黨參、麥飯石、山　１３增重。中藥免疫促長(zhǎng)劑中主要成分之一的黃芪可增強(qiáng)機(jī)　楂、神曲、麥芽、何首烏、石膏、元明粉女貞子等中草藥組成　體的抵抗力，而降低發(fā)病率（張會(huì)峰，２００３）。童曉莉（２００２）　方劑，分別按１％和２％的比例在豬基礎(chǔ)１３糧中添加，飼喂　等于仔豬日糧中添加１％中藥免疫促長(zhǎng)劑，與對(duì)照組相比，仔　３０　ｄ后測(cè)得：Ｔ３的含量分別比對(duì)照組增加了２８．５％和　豬腹瀉頻次降低了３１．０３％，日增重提高了３４．１２％；料重比　３６．１％，差異顯著（Ｐ＜０．０５）和差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；Ｔ４的　比對(duì)照降低２０．２Ｏ％，證明中藥添加劑在防治仔豬疾病的同　含量分別比對(duì)照組增加了１９．３％和３２．８％，差異顯著（Ｐ＜　時(shí)可促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。張顯花等（２００５）報(bào)道，用胡麻、陳皮、食　Ｏ．０５）和差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。程遠(yuǎn)芳（２００６）將苦蒿、薄　鹽、酒曲、砂仁、大青葉、板藍(lán)根、大黃、川芎、蒼術(shù)、當(dāng)歸、熟地　荷、棉花根、桑白皮、生地、黃連、地骨皮、香菇、板藍(lán)根、蒼術(shù)、　等組成中草藥復(fù)方添加劑，按１．２％的比例飼喂３５日齡斷奶　甘草等中草藥組方，添加于豬基礎(chǔ)日糧中飼喂，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組　仔豬，經(jīng)過(guò)４０　ｄ的飼養(yǎng)試驗(yàn)，試驗(yàn)組的日增重比對(duì)照組提高　豬的增重和采食量均高于對(duì)照組。現(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，天然　９．６２％（Ｐ＜０．０５），料重比降低４．９５％（Ｐ＜０．０５）。周圻　中草藥所含的糖類、有機(jī)酸類、生物堿類、甙類和揮發(fā)油類都　（２００５）選用胡麻、陳皮、酒曲、砂仁、大青葉、川芎、蒼術(shù)等１２　有增強(qiáng)機(jī)體免疫的功能。豬在接種豬瘟疫苗的同時(shí)服用中　種中草藥按１．２％的比例添加于３５～４０日齡斷奶仔豬的１３　草藥添加劑（黃芪、黨參、何首烏、淫羊藿、女貞子、白術(shù)、白　糧中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中草藥組的生長(zhǎng)激素和三碘甲腺原氨酸水　芍、五昧子），能顯著增強(qiáng)豬瘟疫苗的免疫效果，促進(jìn)Ｔ淋巴　平均顯著高于抗生素組。張孝清等（２００６）用黨參、黃芪、枸　細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)其免疫力（王自然，２００６）。易洪斌等　杞、杜仲葉、神曲、山楂等１６味中草藥組方，按３０　ｇ／ｋｇ、　（２００６）將絞股藍(lán)、蒼術(shù)、黃芪、花粉等多種中草藥中提取的中　發(fā)利用打好基礎(chǔ)。　定中的應(yīng)用研究．農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)。２００４，９（１）：１４６～１５２．　３．２．２地方品種開(kāi)發(fā)利用：在地方品種雜交利用時(shí)，可利用　［４］陳靈芝．中國(guó)的生物多樣性現(xiàn)狀及其保護(hù)對(duì)策．北京科學(xué)出版社，　微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)品種間的雜交效果進(jìn)行成功預(yù)測(cè)。張英杰等　１９９３，９９～１１３．　（２００６）【１３］利用微衛(wèi)星對(duì)４個(gè)引進(jìn)肉羊與小尾寒的雜交效果　［５］張毅．中國(guó)水牛分子遺傳多樣性及其起源分化的研究．中國(guó)農(nóng)業(yè)　進(jìn)行了預(yù)測(cè)，結(jié)果顯示與實(shí)際雜交優(yōu)勢(shì)測(cè)定結(jié)果相符。黃生　大學(xué)博士論文，２００６．　強(qiáng)等（２００７）【１４　３分析了微衛(wèi)星標(biāo)記分析了豬經(jīng)濟(jì)性狀雜種優(yōu)　［６］孫飛舟．采用微衛(wèi)星ＤＮＡ標(biāo)記評(píng)估中國(guó)地方豬種遺傳多樣性．中　國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士論文，２００２．　勢(shì)的相關(guān)關(guān)系，結(jié)果表明：親本間微衛(wèi)星標(biāo)記遺傳距離與雜　［７］陳寬維，宋衛(wèi)濤，徐文娟，等．利用微衛(wèi)星標(biāo)記分析中國(guó)地方鵝品　交后代日增重、料肉比等生產(chǎn)性狀均呈強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系，可作　種遺傳變異及分化．畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，２００９，４０（３）：３２７～３３２．　為預(yù)測(cè)這些性狀雜種優(yōu)勢(shì)的指標(biāo)。以上研究將為本市地方　［８］陳國(guó)宏，季從亮，王敏強(qiáng)，等．１２個(gè)中國(guó)地方雞種群體遺傳結(jié)構(gòu)及　品種的開(kāi)發(fā)利用提供良好的借鑒。　遺傳多樣性分析．畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，２００６，３７（２）：１０５～１１１．　４　結(jié)語(yǔ)　［９］李榮嶺，張桂香，王志剛，等．微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)１２個(gè)中外牛品種群體　隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷完善，一系列具有畜禽品種　遺傳結(jié)構(gòu)的研究．遺傳，２００７，２９（１２）：１４６３～１４７０．　特征的微衛(wèi)星標(biāo)記可被用于畜禽品種鑒定上來(lái)，微衛(wèi)星標(biāo)記　［１０］李慧芳．中國(guó)地方家鴨品種的分子遺傳多樣性研究．揚(yáng)州大學(xué)博　士論文，２００８．　技術(shù)必將在畜禽品種引進(jìn)、種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)管理以及地方品　［１１］葉俊華，麻俊武，楊煎勇，等．利用１０個(gè)ＳＴＲ—ＤＮＡ的多態(tài)性進(jìn)　種的保種與開(kāi)發(fā)利用等方面得到逐步應(yīng)用，為畜牧業(yè)科技進(jìn)　行警犬親子鑒定．江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００５，２５（１）：１ｌＯ～１１３．　步和產(chǎn)業(yè)發(fā)展作出新的貢獻(xiàn)。　［１２］Ｌｕｉｋａｒｔ　Ｇ，Ｄｕｖａｌ　Ｍ　Ｂ，Ｅｒｔｕｇｒｕｌ　Ｏ，ｅｔ　ａ１．Ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　２２　ｍｉｅｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ　參考文獻(xiàn)　ｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｅｓ　ｆｏｒ　ｐａｒｅｎｔａｇｅ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｉｎ　ｇｏａｔｓ　【１］Ｒａｎｎａｌａ　Ｂ，Ｍｏｕｎｔａｉｎ　Ｊ　Ｌ．Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｉｍｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｍｕｌｔｉｌｏｅｕｓ　（Ｃａｐｒａ　ｈｉｒｃｕｓ）．Ａｎｉｍａｌ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，１９９９。３０：４３１～４３８．　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　［１３］張英杰，劉月琴，孫洪新，等．利用微衛(wèi)星ＤＮＡ多態(tài)性預(yù)測(cè)引進(jìn)　ＵＳＡ．１９９７。９４：９１９７～９２０１．　肉用綿羊品種雜種優(yōu)勢(shì)．中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００６，３９（５）：１０７６～　［２］李顯耀．微衛(wèi)星標(biāo)記在蛋雞品系鑒定中的應(yīng)用研究．中國(guó)農(nóng)業(yè)大　１０８２．　學(xué)碩士論文，２００３．　（１４］黃生強(qiáng)，柳小春，晏光榮．等．微衛(wèi)星標(biāo)記預(yù)測(cè)豬部分經(jīng)濟(jì)性狀雜　［３］張麗娟，張保軍，楊長(zhǎng)鎖，等．１Ｏ個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在白殼蛋雞品系鑒　種優(yōu)勢(shì)的研究．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００７，３３（５）：５９２～５９４．