抗人球蛋白配血試驗

2024年3月27日發(作者：美麗的晚霞)

抗人球蛋白配血試驗

紅細胞表面被大量的IgG抗體分子及補體分子C3、C4的片段所包繞，這些包繞物均為人球

蛋白，不足引起凝集反應，這種紅細胞稱為致敏紅細胞。而抗人球蛋白血清(anti—globulin)，

可以與致敏紅細胞作用發生凝集，即紅細胞表面的人球蛋白與抗人球蛋白血清發生特異性反

應而使紅細胞凝集，抗人球蛋白分子起著搭橋作用，從而證明IgG抗體的存在。

(2)材料

1)受血者和供血者血清及5%紅細胞懸液(紅細胞需洗滌3次)。

2)抗人球蛋白血清(最適稀釋度)。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)陽性紅細胞懸液。

(3)操作

1)取小試管3支，分別標明主側管(Ps+Dc)即受血者血清加供血者紅細胞，次側管(Pc+DS)即受

血者紅細胞加供血者血清，自身對照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者紅細胞。

2)主側管內加受血者血清4滴和供血者5%紅細胞懸液1滴；次側管加供血者血清4滴和受

血者紅細胞懸液1滴；自身對照管內分別加受血者自身血清4滴和自身紅細胞懸液1滴。搖

勻混合，置37℃水浴30～60分鐘，每隔15分鐘振搖1次試管，促進反應。

3)取出試管以生理鹽水洗滌紅細胞3次，末次棄盡鹽水。

4)各管內加最適稀釋度抗人球蛋白血清2滴混勻。

5)以3 500r/min離心15秒。肉眼觀察。

6)同時用抗D血清和AB型血清按上述與Rh(D)陽性紅細胞做陽性、陰性對照。

(4)結果分析

先看陽性、陰性對照管是否符合，如對照無問題，再看Ps+Dc及Ds+Pc管有否凝集，無凝集

就可輸用。如Ds+Pc管顯凝集，須看自身對照管。如自身對照管也顯凝集，說明受血者紅細

胞上已有抗體吸收。假如Ds+Pc管凝集不強于對照管，可輸用。Ps+Dc管有凝集時不能輸用。

(5)報告方式

1)Ps+Dc抗人球蛋白試驗陽(陰)性。

2)Pc+Ds抗人球蛋白試驗陽(陰)性。

(6)注意事項

1)抗人球蛋白配血試驗須用受血者血清而不能用血漿，因抗凝劑是抗補體的，對某些需要補

體的抗體可能不能顯示。

2)假如遇到1例受血者，其血清具有一種抗體，既不是自身抗體，又對許多人的紅細胞均顯

凝集，又急需輸血時，可試用其兄弟、姐妹的血液做交配，可能會有配合的。

3)自身免疫性溶血性貧血病人有時血清中有非特異性抗體。對每一個供血者的Ps+Dc管均呈

凝集，此時要參照自身對照，如 Ps+I)c管反應比較弱，受血者又急需輸血，也可輸給。如幾

個供血者中反應有強有弱，就選擇反應弱的。最好先確定受血者的抗體有否型特異性，如受

血者有抗e則選用R2R2血液，除特異性抗體之外，還有非特異的，還需注意有無同族抗體。

4)本試驗Ps+Dc及Ds+Pc管致敏用血清量太多，這是因抗人球蛋白試驗致敏時用的血清量愈

大愈敏感。做配血試驗時受血者可能有極弱的抗體，不易檢出，在輸給不合的血液后出現溶

血。

為此將致敏用的血清多加一些，如受血者標本很少，也可按常規做法即血清2滴加供血者壓

積紅細胞1滴。

2 PEG-IAT法

間接抗人球蛋白試驗(IAT)是一種較理想配血試驗，但因試驗所需時間長，臨床急需輸血時使

用極不方便。因此，我們實驗室對IAT試驗進行改良，在原試驗基礎上添加了聚乙二醇(PEG)

試劑，即稱PEG-IAT試驗。PEG為一種無電荷的大分子物質，加入反應溶液中，可增加反應

速度，有利于反應物之間相互碰撞，易形成免疫復合物，提高抗原抗體的敏感性。傳統的

IAT試驗需37℃水浴60分鐘，而改良后PEG-IAT試驗，只需37℃水浴5分鐘。王振芳等改良

后的PEG-IAT配血試驗，經多年臨床觀察，認為該方法時間短，且敏感性高、特異性強，可

作為常規配血技術。PEG- IAT試驗詳見《上海醫學檢驗雜志))1997；12(2)：95。

(1)材料

1)受、供者的血清及5 %紅細胞懸液(紅細胞洗3次)。

2)抗人球蛋白的血清。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)陽性紅細胞懸液。

6)3%PEG溶液。

(2)操作

1)取小試管3支，分別標明主側管(Ps+De)，即受血者血清加供血者紅細胞，次側管(Pc+Ds)即

受血者紅細胞加供血者血清，自身對照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者紅細胞。

2)主側管內加受血者血清1滴和供血者5%紅細胞懸液1滴；次側管加供血者血清1滴和受

血者紅細胞懸液1滴；自身對照管內分別加受血者自身血清1滴和自身紅細胞懸液1滴。

3)主側、次側、自身對照3管分別加入3%PEG溶液2滴。

4)混勻，置37℃水浴5分鐘。

5)取出以上各管，以生理鹽水洗滌3次，末次棄盡鹽水。

6)各管內加最適稀釋度抗人球蛋白血清1滴，并混勻。

7)以3500r/min離心15秒，肉眼觀察。

8)同時用抗D血清和AB型血清按上述與Rh(D)陽性紅細胞做陽性、陰性對照。

(3)結果分析

同抗人球蛋白配血試驗結果分析。

(4)報告方式

1)Ps+Dc PEG-IAT有(無)凝集、溶血。

2)Pc+Ds PEG-IAT有(無)凝集、溶血。

參 考 文 獻

[1]王培華.輸血技術學[M].第2版.北京:人民衛生出版社,2002:126-131.

[2]中華人民共和國衛生部.衛醫發[2000]184號,臨床輸血技術規范.

[3]中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程[M],第3版.南京:東南大學出版

社,2006:262-264.