二苯胺試劑

1

教材實驗——檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

(全國卷：2017全國卷Ⅰ；地方卷：2018北京、海南卷；2017江蘇卷；2016江蘇、海

南卷；2015江蘇、廣東卷)

【師說考問】

考問1(科學(xué)探究)本實驗的實驗方案如何？

1．實驗原理(連線)

2．實驗步驟

(1)還原糖的檢測

選材：含糖量較高、白色或近于白色的植物組織

↓

制備組

織樣液?

?

?

?

?制漿

↓

過濾用一層紗布

↓

取液

↓

顏色

反應(yīng)

↓

結(jié)論：組織樣液中有還原糖

(2)脂肪的檢測

方法一：花生種子勻漿＋3滴蘇丹Ⅲ染液→橘黃色

方法二：

取材花生種子(浸泡)將子葉切成薄片

↓

制片

?

?

?

?

?①取最理想的薄片

②滴2～3滴蘇丹Ⅲ染液染色3min

③去浮色～2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液

④制成臨時裝片滴蒸餾水，加蓋玻片

↓

2

觀察：先在低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，再用高倍鏡觀察，花生子葉切片中有

橘黃色顆粒

↓

結(jié)論：花生種子的子葉中有脂肪存在

(3)蛋白質(zhì)500字寫事作文 的檢測

選材與制備

?

?

?

?

?鮮肝提取液或蛋清稀釋液

黃豆?jié){濾液

↓

顏色反應(yīng)

↓

結(jié)論：組織樣液中存在蛋白質(zhì)

特別提醒

(1)鑒定非還原糖(如蔗糖)時：如果與斐林試劑混合，屬鼠和屬猴 水浴加熱后的現(xiàn)象不是無色，而

是淺藍色[Cu(OH)2的顏色]。

(2)脂肪鑒定現(xiàn)象觀察時

①若要觀察被染色的脂肪顆粒，則使用顯微鏡。

②若要通過溶液顏色變化，則不必使用顯微鏡。

(3)蛋白質(zhì)鑒定時

①若用大豆作材料，必須提前浸泡。

②若用蛋清液作材料，必須稀釋，防止其黏在試管上不易冠冕堂皇近義詞 刷洗。

考問2鑒定還原糖時使用的斐林試劑為何要現(xiàn)配現(xiàn)用？

提示：因為斐林試劑很不穩(wěn)定，容易產(chǎn)四年級周記 生藍色的Cu(OH)2沉淀，所以應(yīng)將甲液和乙液

分別保存，使用時現(xiàn)配現(xiàn)用。

考問3鑒定蛋白質(zhì)時，加入試劑B后，如果沒有產(chǎn)生紫色反應(yīng)，可能的原因是什么？

提示：可能加入的雙縮脲試劑B過量，CuSO4在堿性溶液中生成大量的藍色Cu(OH)2

絮狀沉淀，會遮蔽實驗中所產(chǎn)生道家養(yǎng)生功 的紫色，影響觀察結(jié)果。

【實驗歸納】

1．區(qū)分斐林試劑與雙縮脲試劑的“一同三不同”

2．三類有機物檢測在操作步驟上的“三個唯一”

(1)唯一需要加熱——還原糖檢測，且必須水浴加熱，不能用酒精燈直接加熱。若不加

熱，則無磚紅色沉淀出現(xiàn)。

(2)唯一需要顯微鏡——脂肪檢測。

(3)唯一使用酒精——脂肪的鑒定，實驗用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精洗去浮色。

3．實驗中的三個注意點

(1)三個實驗中都不宜選取有顏色的材料，否則會干擾實驗結(jié)果的前任三歌曲 顏色變化。

(2)脂肪鑒定的過程中滴加1～2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精的目的是洗去浮色，原因是蘇

3

丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液易溶于酒精。

(3)物質(zhì)鑒定實驗一般不設(shè)立對照實驗，若需設(shè)立對照實驗，對照組應(yīng)加入成分已知的

物質(zhì)，如驗證唾液淀粉酶是蛋白質(zhì)，對照組可加入稀釋的雞蛋清。

【題組跟進】

高考題組——研考向

考向一糖類、脂肪與蛋白質(zhì)的檢測原理和方法的考查

1．高考重組，判斷正誤。

(1)高倍鏡下無法觀察到花生子葉中被染色的脂肪顆粒。[2018海南卷，T23B]()

(2)用蘇丹Ⅲ染液染色，觀察花生子葉細(xì)胞中有橘黃的脂肪滴(顆粒)。[2018北京卷，

T4C](√)

(3)檢測氨基酸的含量可用雙縮脲試劑進行顯色。[2017全國卷Ⅰ，T2B]()

(4)斐林試劑是含有Cu2＋的堿性溶液，可被葡萄糖還原成磚紅色。[2017全國卷Ⅰ，

T2D](√)

2．[2016江蘇卷，5]關(guān)于生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實驗，下列

敘述正確的是()

A．還原糖、DNA的鑒定通常分別使用雙縮脲試劑、二苯胺試劑

B．鑒定還原糖、蛋白質(zhì)和DNA都需要進行水浴加熱

C．二苯胺試劑和用于配制斐林試劑的NaOH溶液都呈無色

D．脂肪、蛋白質(zhì)鑒定時分別可見橘黃色顆粒、磚紅色沉淀

解析：鑒定還原糖的試劑是斐林試劑，鑒定DNA的試劑是二苯胺試劑，A錯誤；鑒定還

原糖和DNA需進行水浴加熱，蛋白質(zhì)鑒定不需進行水浴加熱，B錯誤；二苯胺試劑和用于配

制斐林試劑的NaOH溶液都呈無色，C正確；脂肪鑒定時可見橘黃色顆粒，蛋白質(zhì)鑒定時呈

紫色，D錯誤。

答案：C

考向二借助物質(zhì)檢測，課后輔導(dǎo) 考查種子成熟和萌發(fā)中物質(zhì)的變化

3．[廣東卷]油菜種子成熟過程中部分有機物的變化如下圖所示。將不同成熟階段的種

子勻漿后檢測，結(jié)果正確的是()

選項取樣時間檢測試劑檢測結(jié)果

A第10d斐林試劑不顯色

B第20d雙縮脲試劑不顯色

C第30d蘇丹Ⅲ染液橘黃色

D第40d碘液藍色

解析：第10d有可溶性糖，不排除有還原糖的可能，故加入斐林試劑，水浴加熱后可

能出現(xiàn)磚紅色沉淀；種子中一定有蛋白質(zhì)，加入雙縮脲試劑后會出現(xiàn)紫色反應(yīng)；第30d種

子中有脂肪，與蘇丹Ⅲ染液發(fā)生反應(yīng)，呈現(xiàn)橘黃色；第40d種子中無淀粉，加入碘液后不

會呈現(xiàn)藍色。

答案：C

4．[江蘇卷](多選)在1、3、5號試管中分別加入2mL蒸餾水，2、4、6號試管中分別

加入2mL發(fā)芽的小麥種子勻漿樣液，然后在1～4號試管中適量滴加斐林試劑，5、6號試

4

管中合理滴加雙縮脲試劑，搖勻。預(yù)期觀察到的實驗現(xiàn)象是()

A．1、3、5號試管內(nèi)都呈藍色

B．3組實驗中甲組和乙組的實驗結(jié)果相同

C．4號試管內(nèi)呈磚紅色，其余試管內(nèi)都呈藍色

D．4號試管內(nèi)呈磚紅色，6號試管內(nèi)呈紫色

解析：發(fā)芽的小麥種子勻漿中含有淀粉酶，淀粉酶能使小麥種子中的淀粉水解產(chǎn)生麥芽

糖等還原糖。1～4號試管中加入斐林試劑后，因1、3號試管中是蒸餾水而無還原糖，故顯

示斐林試劑本身的藍色，2號試管中雖含還原糖，但未水浴加熱，故仍呈藍色，4號試管進

行水浴加熱后出現(xiàn)磚紅色沉淀。5、6號試管中加入雙縮脲試劑后，因5號試管中是蒸餾水，

加入的雙縮脲試劑可呈現(xiàn)藍色；6號試管中含淀粉酶等蛋白質(zhì)，故加入雙縮脲試劑后出現(xiàn)紫

色反應(yīng)。

答案：AD

[題后悟道]種子成熟與萌發(fā)時有機物的變化

(1)種子成熟時有機物的變化：

種子成熟時，小分子有機物合成大分子物質(zhì)，以便于儲存，主要營養(yǎng)物質(zhì)變化如下：

①可溶性糖類→不溶性糖類(如淀粉)。

②非蛋白質(zhì)氮→蛋白質(zhì)。

③糖類→脂肪。

(2)種子萌發(fā)時有機物的變化：

種子萌發(fā)時，儲存的大分子有機物在酶的作用下水解為小分子物質(zhì)，作為幼胚生長的營

養(yǎng)物質(zhì)。

①淀粉――→

淀粉酶

麥芽糖――→

麥芽糖酶

葡萄糖。

②蛋白質(zhì)――→

蛋白酶

氨基酸。

③脂肪――→

脂肪酶

甘油＋脂肪酸。

模擬題組——預(yù)趨勢

預(yù)測一糖類、脂肪與蛋白質(zhì)的檢測方法的比較

1．[經(jīng)典模擬]下列關(guān)于有機物的鑒定實驗中，易導(dǎo)致實驗失敗的操作是()

①鑒定蛋白質(zhì)時，將NaOH溶液和CuSO4溶液混合后再加入樣液②鑒定還原糖時，需

要進行水浴加熱③鑒定淀粉時，直接將碘液滴加到淀粉樣液中④鑒定酵母菌是否產(chǎn)生酒

精，可直接將重鉻酸鉀加入酵母菌培養(yǎng)液的濾液中

A．①④B．①③

C．②③D．③④

解析：蛋白質(zhì)鑒定時，先向樣液中加雙縮脲試劑A液(NaOH溶液)，搖勻后再加雙縮脲

試劑B液(CuSO4溶液)；鑒定還原糖時，需要在50℃～65℃條件下水浴加熱；鑒定酵母菌

產(chǎn)生的酒精時，在酵母菌培養(yǎng)液的濾液中應(yīng)加入酸性重鉻酸鉀溶液。

答案：A

2．[2019四川成都模擬]下列實驗操作中“先后”順序不當(dāng)?shù)氖?)

A．檢測細(xì)胞工資率 中的脂肪顆粒實驗中，先用50%酒精洗去浮色，然后再觀察

B．計數(shù)酵母菌時，先將培養(yǎng)液滴到計數(shù)室上，然后蓋上蓋玻片

C．用顯微鏡觀察細(xì)胞實驗過程中，應(yīng)先用低倍鏡觀察后用高倍鏡觀察

5

D．觀察植物根尖細(xì)胞有絲分裂實驗中，先漂洗再染色

解析：脂肪鑒定中需要先加50%酒精洗掉浮色，然后再觀察，A正確；酵母菌計數(shù)時，

應(yīng)該先將蓋玻片放到計數(shù)室上，再將培養(yǎng)液滴到蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，B錯誤；

顯微鏡的使用是先用低倍鏡尋找到要觀察的物像，后用高倍鏡進一步放大觀察，C正確；制

片時應(yīng)先漂洗(防止解離過度)，再染色，D正確。

答案：B

預(yù)測二考查實驗材料的選擇及過程分析

3．[2019四川診斷]實驗人員利用特殊顏色反應(yīng)對某未知樣品的成分進行鑒定，所用

試劑和實驗結(jié)果(實驗操作正確規(guī)范)如下表所示。根據(jù)實驗結(jié)果推測，該樣品是()

試劑雙縮脲試劑斐林試劑蘇丹Ⅲ染液

結(jié)果紫色藍色棕紅色

A.葡萄糖溶液B．油水混合物

C．可溶性淀粉溶液D．雞蛋清稀釋液

解析：根據(jù)表格分析，用斐林試劑檢測，沒有出現(xiàn)磚紅色，而是表現(xiàn)為藍色(硫酸銅的

顏色)，說明樣品的成分中沒有還原糖(如葡萄糖)，A錯誤；用蘇丹Ⅲ染液檢測，沒有出現(xiàn)

橘黃色，說明該樣品不是油水混合物，B錯誤；表格中沒有檢測可溶性淀粉的試劑，不能確

定該樣品中是否含有可溶性淀粉，C錯誤；用雙縮脲試劑檢測出現(xiàn)了紫色，說明樣品的成分

中含有蛋白質(zhì)，因此該樣品可能是雞蛋清稀釋液，D正確。

答案：D

4．現(xiàn)提供新配制的斐林試劑甲液(質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液)、乙液(質(zhì)量濃度

為0.05g/mL的CuSO4溶液)、蒸餾水，充分利用上述試劑及必需的實驗用具，能鑒別出下

列哪些物質(zhì)()

①葡萄糖②蔗糖③胰蛋白酶④DNA

A．只有①B．①和②

C．①和③D．②③和④

解析：斐林試劑用于檢測還原糖，在①～④中，只有葡萄糖是還原糖；蔗糖納音 是非還原糖，

不能用斐林試劑檢測。胰蛋白酶是蛋白質(zhì)，用雙縮脲試劑檢測，雙縮脲試劑與斐林試劑相比，

所用NaOH溶液相同，斐林試劑乙液比雙縮脲試劑B液的溶液濃度高，所以可用蒸餾水稀釋

乙液后用于檢測蛋白質(zhì)。DNA可用二苯胺試劑來檢測。

答案：C

課堂總結(jié)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)

[網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)]

[答題必備]

1．生物體內(nèi)元素的存在形式：大多以化合物的形式存在。

2．細(xì)胞中產(chǎn)生谷歌怎么用 水的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有線粒體、葉綠體、核糖體、高爾基體和細(xì)胞核等。

3．休眠或越冬的植物體內(nèi)自由水與結(jié)合水的比值下降，正在萌發(fā)的種子中自由水和結(jié)

合水的比值則上升。

4．哺乳動物的血鈣過多，會出現(xiàn)肌無力癥狀，由此說明無機鹽對于維持細(xì)胞和生物體

的生命活動有重要作用。

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5．還原糖遇斐林試劑在水浴加熱條件下可生成磚紅色沉淀，脂肪可被蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)

染液染成橘黃色(或紅色)，而蛋白質(zhì)遇雙縮脲試劑呈紫色。