花青苷(花色苷)種類、提取及檢測(2020年10月整理)

2024年1月4日發(作者：績效改進計劃)

花青苷種類、提取及檢測

一.種類

花色素均具有類黃酮的基本結構，由兩個苯環和一個含氧雜環組成的(C6-C3-C6)C15化合物(如圖)，根據B環羥基化和甲基化位置和數目的不同而將花色素主要分為六類:天竺葵色素((Pelargonidin)、矢車菊色素((cyanidin)、芍藥色素(peonidin)(3＇-甲基矢車菊色素)、飛燕草色素(delphinidin)、矮牽牛色素(petunidin)(3＇,5＇-甲基飛燕草色素)和錦葵色素(malvidin)( 3＇,5＇-二甲基飛燕草色素)。不同植物中花色素發生糖苷化的位點(C3、C5和C7位等)和數目的差異，及酞化程度的不同使植物中存在著不同的花色素普，其結構復雜，但都以這六種花色素為基本結構(Grotewold，2006)。

二.提取

國內外學者對花青苷的提取做了大量研究，提取目的及目標花青苷不同，提取方法略有差異?；ㄇ嘬找兹苡谒?、甲醇、乙醇等極性溶液，花青苷的穩定性受酶、溫度、氧氣、光、pH值、金屬離子等理化性質的影響，在中性和堿性條件下不穩定。

提取過程常采用酸性溶液，酸能夠破壞植物細胞膜并溶解水溶性色素，甲醇溶液提取效率高于乙醇及水溶液。花青苷一般用于食品著色，考慮到甲醇的不安全因素，一般選用體積分數為1%的乙醇溶液。采用鹽酸酸化可保持提取液pH值較低，阻止無?；ㄇ嘬盏慕到?。隨著鹽酸被濃縮，pH 值升高，導致花青苷的降解。為獲得更接近于天然狀態的花青苷，采用弱有機酸或中性溶劑做初步提取，弱有機酸多用甲酸、乙酸、丙酸、檸檬酸和酒石酸，中性溶劑一般采用丙酮作提取劑。粗提后的花青苷提取液濃度很低，濃縮時一般不超過40℃，時間也不宜太長。

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花青苷含量的測定：用0.1%的鹽酸甲醇浸提葉片2 h后,測657nm、530nm處的吸光度。

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三.檢測

紫外—可見光譜是花青苷結構鑒定的經典方法，其鑒定方法為：①花青苷有2個最大吸收波長,500~540nm附近及27nm附近，據此可判定是否為花青苷色素；②若B環有鄰位酚羥基，則向體積分數0.01%鹽酸-甲醇溶液中滴加 3~5 滴 AlCl3，甲醇或乙醇溶液時會出現藍移；③糖苷位置可據花青苷吸光度比值A440/Amax判定；④在波長300~330nm間有吸收峰，表明存在?；?；⑤若在波長440n處有肩峰，則5號位羥基沒被取代；⑥若在紫外光下有熒光，表明在5號位有取代基。（取代基位置參考下圖）

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