多肽修飾(多肽修飾是什么意思)

更新時間:2023-02-28 19:56:29 閱讀：評論：0

多肽修飾有哪些?作用是什么?

目前大致分為以下幾種： 1.氨基化及乙酰化 2.生物素及FITC標(biāo)記 3.多種二硫鍵修飾 4.多種磷酸化 5.KLT,BSA,OVA 6.聚乙二醇修飾 7.同位素標(biāo)記 8.符合抗原肽標(biāo)記目前，我只知道大概有這幾種你可以參考一下

多肽修飾的原理及操作步驟

目前大致分為以下幾種：
1.氨基化及乙酰化
2.生物素及FITC標(biāo)記
3.多種二硫鍵修飾
4.多種磷酸化
5.KLT,BSA,OVA
6.聚乙二醇修飾
7.同位素標(biāo)記
8.符合抗原肽標(biāo)記
目前，我只知道大概有這幾種你可以參考一下

定制多肽的PEG修飾有哪個方面

生物學(xué)角度來說；作為藥物先導(dǎo)化合物的多肽分子在體內(nèi)的應(yīng)用受到一定程度的限制，主要體現(xiàn)在生物體腎小球的過濾作用、體內(nèi)蛋白酶的水解破壞作用以及因多肽分子引起的體內(nèi)抗原反應(yīng)。將多肽用PEG修飾后（Pegylation），上述三方面的限制均大幅減小，從而提高了多肽在生物體內(nèi)的應(yīng)用。

物理化學(xué)性質(zhì)角度；因為PEG的親水性，可以改善多肽整體的親疏水性質(zhì)，小分子PEG可以做為Link,把修飾基團和多肽結(jié)合起來，有時候要比6-氨基己酸更有優(yōu)勢。常見的是Biotin-PEG4-Peptide。

PEG4的結(jié)構(gòu)如下：

接下來，我將詳細(xì)介紹下多肽的PEG修飾。

小分子PEG修飾。分子量區(qū)間在PEG2-PEG24之間。如

AEA 5-amino-3-oxapentanoic acid

AEEA 8-Amino-3,6-Dioxaoctanoic Acid 9 atoms （mini-PEG）

TTDS 1,13-diamino-4,7,10-trioxatridecan-succinamic acid

Ebes 8 - amino - 3,6 - dioxa - octyl)succinamic acid （PEG2-Suc-OH）

AEEEA 11-Amino-3,6,9-Trioxaundecanoic Acid 11 atoms（mini-PEG3）

dPEG(4) 15-amino-4,7,10,13-tetraoxa-pentadecanoic acid

dPEG(8) alpha-amino-omega-carboxy octa(ethylene glycol)

dPEG(12) alpha-amino-omega-carboxy dodeca(ethylene glycol)

這類小分子PEG就相當(dāng)于特殊的氨基酸，修飾步驟和合成氨基酸的步驟一樣。

例如我們在多肽中插入AEEA，

那么所使用的原料一般為Fmoc-AEEA-OH，（CAS:166108-71-0)

大分子PEG的修飾，分子量區(qū)間在PEG500-PEG40K之間。例如PEG2000和PEG5000的修飾。具體以PEG2000為例。

常見的PEG2000的修飾位點為

1：多肽的N端，如PEG2000-DTGLIWAPQNT-OH。

2：氨基酸Lys的側(cè)鏈H2N-DTGLIW-K（PEG2000）-APQNT-OH

3：Cys的側(cè)鏈，如H2N-Cys(Mal-PEG2000)-DTGLIWAPQNT-OH,通過巰基和Mal結(jié)合來把PEG2000修飾在多肽上。

特殊的PEG2000修飾位點

1：在多肽中間，如H2N-DTGLIW-PEG2000-APQNT-OH，因為通過固相合成，PEG2000很難連接到H2N-APQNT-Resin上，我們之前做過大量固相合成實驗，反應(yīng)速率慢，收率低，使用PEG2000原料也比較多，所以通常我們采用液相分段合成，這樣可以節(jié)約很多的PEG2000原料。是個產(chǎn)品在市場上更有優(yōu)勢。

2: 在多肽C端，如H2N-DTGLIWAPQNT-PEG2000，這個比在中間的要簡單很多。

PEG2000其實是一個混合物，因為其n值在一個范圍內(nèi)，例如n=40、41、42…45…46、47等。我們可以通過下面Tof圖譜看出PEG2000的峰型，是一簇比較集中的峰。

如何將小分子多肽修飾到脂質(zhì)體上

用針對表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）的小分子多肽配體D4修飾PEG化的陽離子脂質(zhì)體,觀察其提高質(zhì)粒DNA和siRNA對腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的作用。方法：將D4連接在DSPE-PEG2000的末端以修飾PEG化的陽離子脂質(zhì)體,檢測該載體系統(tǒng)對高表達EGFR的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株H1299中質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率的影響,Sirius照度儀檢測質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染后H1299細(xì)胞熒光素酶的表達,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染FAM-siRNA后H1299細(xì)胞的熒光強度。結(jié)果：制備的脂質(zhì)體/質(zhì)粒DNA復(fù)合物隨著電荷比的提高,復(fù)合物粒徑逐漸減小,復(fù)合物Zeta電位逐漸升高。在質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染中,與無修飾的非靶向脂質(zhì)體相比,D4修飾的脂質(zhì)體可以顯著提高H1299細(xì)胞中熒光素酶的表達（P〈0.05或P〈0.01）;D4修飾的脂質(zhì)體在各個電荷比處對H1299細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著高于無修飾的非靶向脂質(zhì)體（P〈0.05或P〈0.01）。在FAM-siRNA的轉(zhuǎn)染中,熒光顯微鏡下可以觀察到D4修飾的脂質(zhì)體組有更高水平的FAM熒光強度。結(jié)論：D4修飾的陽離子脂質(zhì)體提高高表達EGFR腫瘤細(xì)胞中質(zhì)粒DNA和siRNA的轉(zhuǎn)染效率。