pda培養(yǎng)基糖加多了有沒有影響
有。pda培養(yǎng)基需要加入不同濃度的蔗糖,可提高瓊脂的凝膠強度,最佳范圍為1.5%~16.0%,超過或是低于這個范圍凝膠強度會下降。所以會影響瓊脂的凝固度,進而影響實驗。
pda培養(yǎng)基注意事項:
1、培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長者方可使用。
2、PDA培養(yǎng)基般不需要調(diào)pH。對于要調(diào)節(jié)pH的培養(yǎng)基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時,可用1mol/LNa0H或lmol/LHCL溶液進行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時應(yīng)逐滴加入NaOH或HC1溶液,防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。
3、培養(yǎng)基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基,用于菌類的震蕩培養(yǎng)。
4、培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L培養(yǎng)基,主要是為了抑制細(xì)菌的生長,減少干擾性。
pda培養(yǎng)基制作注意事項
PDA培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱,即Potato Dextro Agar (Medium),分別對應(yīng)馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。它屬于固體培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基。PDA培養(yǎng)基宜于微生物生長發(fā)育、節(jié)省原料等優(yōu)勢,一般在培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面應(yīng)用廣泛。
PDA培養(yǎng)基的配制
(1)稱量和熬煮
按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。
(2)加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補充水分至所需量。
(3)分裝
按實訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。
分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
(4)加棉塞
培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
(5)包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。
PDA培養(yǎng)基配制注意事項
1.培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后,必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長者方可使用。
2.PDA培養(yǎng)基一般不需要調(diào)pH。對于要調(diào)節(jié)pH的培養(yǎng)基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養(yǎng)基偏酸或偏堿時,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。
3.培養(yǎng)基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基,用于菌類的震蕩培養(yǎng)。
4.培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L培養(yǎng)基,主要是為了抑制細(xì)菌的生長,減少干擾性。
PDA培養(yǎng)基的配制方法是什么?
1、熬煮
取大約200g左右的土豆,去掉外皮切成小塊放入鍋中,加入1000毫升水,煮沸。
2、過濾
煮沸后半小時用2-3層紗布在量杯上將煮好的土豆趁熱過濾,去掉殘渣。
3、加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補充水分至所需量。
4、分裝
按培養(yǎng)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。裝入試管,固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
5、加棉塞
在試管口塞上棉塞以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
6、包扎
加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期。
以上步驟就是PDA培養(yǎng)基的配制方法。
什么情況下選擇pda培養(yǎng)基?什么情況下使用孟加拉紅培養(yǎng)基
在霉菌和酵母計數(shù)中下選擇pda培養(yǎng)基,主要使用以下幾種選擇性培養(yǎng)基。
1、馬鈴薯葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基(PDA)。
2、孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基高。
3、鹽察氏培養(yǎng)基。
4、培養(yǎng)基是培養(yǎng)細(xì)菌、真菌等微生物用的營養(yǎng)物質(zhì),比喻釀成某種后果的因素。
pda培養(yǎng)基和水瓊脂的區(qū)別
是消化酶數(shù)量不同。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)主要適合酵母菌、霉菌、蘑菇等真的生長,沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA),主要用于真菌的檢測和計數(shù)。
PDA與SDA培養(yǎng)基的差別主要在配方上:
PDA:土豆200g,葡萄糖20g,瓊脂15~20g,水1000mL,pH值自然。
SDA:葡萄糖 40g 酪蛋白胰酶消化物、動物組織的胃酶消化物等量混合 10g 瓊脂 15g 純化水 1000ml PH5.6+-0.2。