鑒定蛋白質(鑒定蛋白質的方法)

如何鑒定蛋白質

鑒定蛋白質可以用雙縮脲試劑。

雙縮脲（NH2CONHCONH2）由兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產物，在強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物，雙縮脲反應產生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關，故可用來測定蛋白質含量。

優點：雙縮脲法測定蛋白質的測定范圍是1~10mg蛋白質，操作簡單、快捷。既適合手工操作，又適合自動化分析，重復性好、線性關系好， 雙縮脲試劑可以長期保存（ 若貯存瓶中有黑色沉淀出現，則需要重新配制）。

缺點：靈敏度差，測定范圍窄，樣品需要量大，不同的蛋白質產生顏色的深淺相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精確的蛋白質測定。 干擾測定的物質包括有：在性質上是氨基酸或肽的緩沖液，如TrIs緩沖液，因為它們產生陽性呈色反應，銅離子也容易被還原，有時出現紅色沉淀。

蛋白質的作用：

人體內的一些生理活性物質如胺類、神經遞質、多肽類激素、抗體、酶、核蛋白以及細胞膜上、血液中起“載體”作用的蛋白都離不開蛋白質，它對調節生理功能，維持新陳代謝起著極其重要的作用。人體運動系統中肌肉的成分以及肌肉在收縮、作功、完成動作過程中的代謝無不與蛋白質有關，離開了蛋白質，體育鍛煉就無從談起。

在生物學中，蛋白質被解釋為是由氨基酸借肽鍵聯接起來形成的多肽，然后由多肽連接起來形成的物質。通俗易懂些說，它就是構成人體組織器官的支架和主要物質。蛋白質缺乏：成年人：肌肉消瘦、肌體免疫力下降、貧血，嚴重者將產生水腫。

未成年人：生長發育停滯、貧血、智力發育差，視覺差。蛋白質過量：蛋白質在體內不能貯存，多了肌體無法吸收，過量攝入蛋白質，將會因代謝障礙產生蛋白質中毒甚至于死亡。

以上內容參考百度百科-雙縮脲試劑

以上內容參考百度百科-蛋白質

鑒別蛋白質的方法有哪些

常見的蛋白質鑒定方法有：

一、最簡單的方法就是對所要鑒定的物體進行灼燒

二、使用化學藥劑進行化學反應來鑒定蛋白質

三、較為精準的方法是使用儀器進行蛋白質鑒定，如質譜儀等

在生物學研究中經常會遇到一些關于蛋白質鑒定的問題，如單一蛋白質或者簡單混合物的鑒定；對單一蛋白質的序列分析等。這一類蛋白質鑒定，在精密度上要求較高，所以幾乎都是采用質譜儀器，來對蛋白質進行精密鑒定。

質譜技術是鑒定蛋白質的其中一種平臺技術。可用到的質譜儀有Thermo Fisher的Q Exactive質譜儀，LTQ Orbitrap Velos質譜儀，以及AB SCIEX的6500 Q TRAP質譜儀。所在鑒定機構的不同，在硬件品牌的使用上也會有不同。

蛋白質鑒定的流程一般分三大步：蛋白質提取、純化、鑒定。這個流程是一個將蛋白質層層“解剖”的過程，從中我們可以對蛋白分子量進行測定，蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質進行鑒定，非變性質譜分析以及Pull-down靶蛋白質譜鑒定等，較為細致的去分析蛋白質中的各種物質、性質等。

如何鑒定蛋白質

1、對物體進行灼燒，看是否能聞到燒焦的羽毛味，如果可以聞到燒焦的羽毛味，那么證明有蛋白質的存在。

2、蛋白質和濃HNO3進行反應，如果能夠變性產生黃色不溶性物質，那么該物體是蛋白質。

3、把含有蛋白質的豆子磨成漿然后過濾，取濾液進行測試，可以先在濾液中加氫氧化鈉（NaOH），然后再加入雙縮脲試劑，如果出現紫色反應，為蛋白質。

4、通過質譜儀，它的原理主要是根據肽質量指紋圖譜與蛋白質數據庫中蛋白質的理論PMF進行比

蛋白質的鑒定方法？

1.最簡單的方法，也是人們最耳熟能詳的方法，就是對物體進行灼燒，看是否能問到燒焦的羽毛味，如果可以問到燒焦的羽毛味，那么證明有蛋白質的存在。
2.中學的化學課上也教過我們不少的方法，比如說吧蛋白質和濃HNO3進行反應，如果能夠變性產生黃色不溶性物質，那么該物體是蛋白質。
3.還有一種方法就是把含有蛋白質的屋子磨成漿然后過濾，取濾液進行測試，可以先在濾液中加氫氧化鈉（NaOH），然后再加入雙縮脲試劑，如果出現紫色反應，就為蛋白質。

蛋白質檢驗實驗步驟

選擇高蛋白的食物漿液，比如豆漿和蛋清。然后準備檢測蛋白質的雙縮脲試劑，由A液和B液組成，A液：氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/mL的水溶液。B液：硫酸銅的質量分數為0.01 g/mL的水溶液。

在實驗時，需要現在待測液體中先在加入A液，先制造出堿性環境，滿足B液與蛋白質反應的條件，這樣才可以方便進行蛋白質的檢測。一段時間后，如果試管中的液體變為紫色，說明待測液體中含有蛋白質，而且顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

擴展資料：

蛋白質檢驗注意事項：

用戶需要注意樣品應是均勻的，若是固體樣品應事先研細過篩，液體樣要混合均勻。

樣品放入凱氏燒瓶時，不要黏附瓶頸上，萬一黏附可用少量水緩慢沖下，以免被檢樣消化不完全，使結果偏低。

如果稱1g以上的樣品，就需要K氏燒瓶最小500ml，800~1000ml的更好，這樣的K氏燒瓶對于縮短氨化時間，加熱的均勻性和完全氨化效果最好。

參考資料來源：百度百科-蛋白質濃度測定

怎樣鑒別一種食物中含有蛋白質?

一般鑒別蛋白質的最簡便方法分以下兩種情況：

1、檢驗固體物質：最簡便方法是火燒，聞其是否有燒焦羽毛的氣味，有則含蛋白質，無則不含;

2、檢驗液體物質：最簡便方法是加入適量食鹽或身邊易得的可溶性鹽充分混合看其是否凝聚現象出現，有則含蛋白質，無則不含。

蛋白質的基本單位是氨基酸，氨基酸通過脫水縮合形成肽鏈。蛋白質由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子，每一條多肽鏈有二十~數百個氨基酸殘基不等；各種氨基酸殘基按一定的順序排列。產生蛋白質的細胞器是核糖體。

擴展資料：

如果想要做實驗來證明食物當中含有蛋白質，那么應該加入某一些化學試劑。比如說加入一些試劑之后會呈現別的顏色。

蛋白質是由α-氨基酸按一定順序結合形成一條多肽鏈，再由一條或一條以上的多肽鏈按照其特定方式結合而成的高分子化合物。蛋白質就是構成人體組織器官的支架和主要物質，在人體生命活動中，起著重要作用，可以說沒有蛋白質就沒有生命活動的存在。每天的飲食中蛋白質主要存在于瘦肉、蛋類、豆類及魚類中。

參考資料來源：百度百科-蛋白質