最大吸收波長

這幾天看到大家對參比波長和檢測波長出現比較多的疑問，故整理下帖子，供板油們參考：

是用紫外可見分光光度計進行全掃描,然后選擇最大吸收的波長,如果有幾個最大吸收波長

的時候,選擇雜質峰較少的波長做測定波長。檢測波長不是參比波長，只有很少物質測定需

要用到參比波長,參比波長主要起到消除噪音的影響

選擇參比波長的依據是被測樣品在參比波長處沒有吸收，參比波長應盡可能的接近檢測波

長。說白了,參比波長就是空白對照的作用如果把參比波長值設成檢測波長，樣品在紫外光

下無吸收。

參比波長應設在樣品沒有吸收的地方，且越靠近樣品的檢測波長越好。

選擇參比波長是為了更好的消除噪音的影響。一般參比波長的選擇依據是樣品在參比波長沒

有吸收,同時跟檢測波長相差不是太大,應盡量靠近，以便消除干擾物質的影響。就象做紫外

分光光度計的實驗，選擇參比溶液一樣，為了消除空白溶液中物質的干擾。

下面是一個關于參比波長選擇的例子：

例:X和Y是兩種吸光物質的吸收曲線，現采用雙波長吸光光度法對它們進行分別測定。如

圖所示如何選擇參比波長及測量波長。

（1）測量X時，Y可視為干擾物質。則選擇l1作為測量波長，l2作為參比波長，因為l1

和l2兩處Y的吸光度相等,可以用以消除Y對X的干擾。（2）測量Y時,X可視為

干擾物質.則選擇l3作為測量波長，l4作為參比波長，因為l3和l4兩處X的吸光度

相等，可以用以消除X對Y的干擾。

如果你的檢測器可以設參比波長，應該是dad或者mwd檢測器.這類檢測器的.檢測

的不是你實際設的波長，比如你設的234，16nm.450,80.表示檢測器檢到的從

226-242nm的紫外吸收圖，再平均得到一個數據,參比設置也類似，然后2個相減,

就是工作站上顯示得到峰高和峰面積。

（2）如果你的樣品剛好在234nm,吸收最強,你可以設到234，2nm.（資料上一般寫頻寬

寬度設置是最大吸收峰的半峰寬的寬度）如果你的樣品在410—530nm有紫外吸

收,你可以把參比設的更高，或者干脆不設參比.

島津紫外檢測器波長不準故障的檢修

1波長不準故障的檢修

在正常使用下，如果顯示波長不準，根據波長自檢和自校原理,故障是由光電管沒有檢

測到亮線引起的。當顯示波長不準時，應首先檢查出流動相使用得是否合適,波長設定是否

超出儀器的使用范圍。當排除了這些人為因素后，利用儀器的自校功能進行一次波長校正(校

正方法見使用說明書）。校正后如仍顯示波長不準，則按面板上的Func鍵，把波長設定為

254nm，并且使檢測池充滿甲醇或乙晴，查看SMPLEN（流通池）和REFEN（參比池)的

吸光度值。如果流通池和參比池的值相差很大，則故障是由光柵部分污染或氘燈能量降低引

起的，按面板上的VP和Func鍵，查看氘燈的使用時間是否超過2000小時.如果氘燈使用時

間過長，即使氘燈能夠正常啟動，有時也發不出0nm,486nm和656nm亮線，從而引起波長

不準。這時，需要更換新的氘燈。如果氘燈使用時間不長,則故障是由光柵部分引起的。

2光柵部分的檢修與調試

光柵部分主要是由M1、M2、M3、石英窗口和光柵組成的，是整個光路的核心。反射

鏡鏡面的光潔度越高,光電池接受到的光就越強，儀器的靈敏度就越高.如果紫外光長時間故

地功能照射鏡面的一個地方，會在鏡面上產生光斑。如果使用環境不干燥，會在鏡面上生成

霉斑.如果使用環境不潔凈，灰塵也會對鏡面造成污染。這些都將使鏡面的光潔度下降，嚴

重時會使光電池無法檢測出氘燈的亮