
112中國南方果樹2021年第50卷第2期
楊桃花粉離體萌發研究
朱楊帆,何江,黃歆恰,莫干輝,黃雪梅,
陳豪軍,歐景莉,陳燕,
寧琳,周俊岸,榮濤
(
廣西壯族自治區亞熱帶作物研究所,南寧,530001)
摘要以楊桃品種“
香蜜”“夏威夷”
新鮮花粉為材料,采用單因素試驗方法
,比較不同濃度蔗糖、
硼酸
、
氯化鈣培養條件下楊桃花粉萌發率和花粉管長度。結果表明,當蔗糖、硼酸、氯化鈣濃度在
一定范圍內均可提高花粉萌發率.但超過一定濃度則起到抑制作用;10%蔗糖,0.01%氯化鈣、
0.01%硼酸時,兩個品種的花粉萌發和花粉管生長均較好,萌發率79%以上
,花粉管平均長度達
270jzm以上。此外.當蔗糖和氯化鈣濃度過高時.“夏威夷”
花粉萌發的抗逆性比“香蜜”的更強。
關鍵詞楊桃
;花粉;
離體萌發;花粉管長度;蔗糖
楊桃AverrhoacarambolaL.又名洋桃、
三穩子、五斂子等,屬酢漿草科(Oxalidace-
ae)楊桃屬植物,原產于東南亞熱帶亞熱帶地
區,主要分布在我國廣東、廣西、云南、福建、
海南
、臺灣等地區,是一種久負盛名的嶺南佳
果我國楊桃栽培歷史悠久,20世紀80
年代以后,逐漸從馬來西亞、新加坡等地引進
大果甜楊桃⑷。楊桃新品種選育方面,主要
是從實生苗和嫁接苗中選擇優良單株,
選育
的楊桃新品種主要有臺農1號⑷、臺農
4號旳、大果甜楊桃3號⑷、大果甜楊桃4
號⑺等
,但遠不能滿足國內市場需求,楊桃新
品種選育對產業發展具有重要意義。花粉活
力測定是開展育種工作的基礎,楊桃花粉活
力測定方面的研究鮮見報道
。測定花粉活力
主要有TTC染色法、
醋酸洋紅染色法、I—
KI染色法、離體萌發法等
。由于染色法測定
花粉活力只能反映花粉內營養物質含量或代
謝情況,
且顏色判斷存在主觀因素導致誤差
較大;離體萌發法被認為是檢測花粉活力較
為可靠的方東京奧運會獎牌榜 法⑷。有關研究表明,蔗糖⑷、硼
酸l訓、鈣離子在花粉離體萌發中對萌發
率和花粉管生長有明顯促進作用
。因此,我
們研究了不同濃度蔗糖、硼酸、氯化鈣條件對
楊桃花粉萌發率和花粉管生長的影響
,
旨在
為楊桃科學授粉和育種工作提供參考。
1材料與方法
1.1材料
以廣西亞熱帶作物研究所楊桃種質資源
圃的楊桃品種“香蜜”“夏威夷”為試材。
1.2方法
在早晨花未完全開放前用銀子及時采摘
當日開放花朵,放入硫酸袋中迅速帶回實驗
室,
立即進行花粉培養。
以略微改動的BK培養基為基礎培
養基,采用單因素試驗篩選培養基各組分最
佳濃度,蔗糖設5%、10%、15%、20%等4個
濃度,硼酸設0.001%.0.01%,0.1%等3個
濃度,氯化鈣設0.001%、0.01%.0.1%等3
個濃度;
探討不同因素對花粉萌發的影響時
,
待探討因素設置不同濃度梯度,以濃度0為
對照,
其余因素均以BK培養基(含10%蔗
糖.0.01%硼酸.0.01%氯化鈣)
為假設的最
適宜濃度。
花粉培養采用液體培養法。在凹槽載玻
收稿日期:2020-03-12;修回日期:2020-04-24
基金項目:廣西工作目標 直屬公益性科研院所基本科研業務費專項資金(桂熱研201902);廣西創新驅動發展專項資金(桂科
AA17204045-4
);廣西農墾科學研究與技術開發項目(桂墾科攻201706)資助。
第一作者:朱楊帆(1991-),女,碩士,
研究實習員,從事楊桃等果樹種質資源收集、保存、鑒定評價與利用研究。
E-mail:zhuyangfan0907@
通信作者:榮濤(1990—),男,碩士,研究實習員,從事果樹種質資源收集、保存、鑒定評價與利用研究。E-mail:fdrt818@
DOI
:
10.13938/.1007-1431.20200153
2021年第50卷第2期
中國南方果樹113
片的凹面中間滴加培養液50用銀子取
發育良好的6朵花的所有花藥于培養液中,
用銀子輕輕點壓載玻片上的花藥,使花粉充
分散落于培養液中。將載玻片放入鋪有濕潤
濾紙的培養皿內,在30C條件下保濕培養
3h。
用光學顯微鏡觀察,每個載玻片選取3
個不重復的視野,
每個視野花粉數不少于20
粒,以花粉管長度大于花粉直徑視為萌發。
花粉萌發率(%)=視野內已萌發的花粉數/
視野內花粉總數X100
1.3數據分析
采用MicrosoftExcel2010軟件整理數
據,所有試驗數據為3次重復的平均值士標
準差表示,用PASWStatistics18編輯英語 軟件進行
差異顯著性分析,使用Image-ProPlus6.0
軟件測量花粉管長度。
2結果與分析
2.1蔗糖濃度的影響
由表1可以看出,蔗糖是楊桃花粉萌發
的一個重要因素,
當培養基的蔗糖濃度為
0時,“香蜜”“夏威夷”
的花粉萌發率極低,分
別為0.87%和0.92%。隨著蔗糖濃度升高,
花粉萌發率和花粉管長度均呈先升后降的趨
勢。當蔗糖濃度達到10%時,“香蜜”“
夏威
夷”花粉的萌發率均達到峰值,分別為
79.56%和79.77%,顯著地高于其他濃度處
理;
同時花粉管長度也達到最大值,
分別為
295.07pm和271.71“m,也顯著地高于其
他濃度處理
。當蔗糖濃度達15%時,兩個品
種的花粉萌發率和花粉管長度比10%蔗糖
處理顯著地降低,“香蜜”花粉萌發率降至
9.18%,而“夏威夷”花粉萌發率降低幅度較
小
,為51.43%。
當蔗糖濃度為20%時,“香
蜜”“夏威夷”
花粉的萌發率和花粉管長度均
降至對照水平,花粉的萌發率分別為0.27%
和4.31%,花粉管長度分別為38.00和
42.54#m。
表1不同蔗糖濃度培養基對兩個品種楊桃花粉萌發率和花粉管生長的影響
蔗糖濃度/%-
香蜜夏威夷
花粉萌發率/%
花粉管長度/“n
花粉萌發率/%
花粉管長度/“n
0(對照)0.870.77a
35.83土7.61a0.92O.58a35.1511.29a
511.251.54b
66.9212.01b10.283.25b
82.569.01b
1079.564.39c
295.07
11.01c79.775.37d
271.71土&54c
15
9.18土3.71b76.667.24b
51.435.82c69.416.18b
200參贊大臣 .270.47a3&002.60a
4.312.93ab
42.54土6.45a
注:BK培養基中含0.01%硼酸和0.01%氣化鈣.不同小寫字母表示在0.05水平下差異顯著.表2和表3同.
2.2鈣離子濃度的影響
由表2可知,鈣離子濃度為0時,兩個品
種的花粉都能夠萌發,萌發率達50%以上,
花粉管長度也都達到280卩m以上。鈣離子
濃度為0.01%時,兩個品種花粉萌發率都達
到79%以上,顯著高于對照,明顯促進了花
粉萌發;而鈣離子濃度0.1%時,兩個品種的
花粉萌發率均顯著低于對照,“香蜜”“夏威
夷”萌發率分別降低至U.17%和53.96%,
過高的鈣離子濃度抑制花粉萌發,
但對“夏威
夷”花粉萌發的抑制作用較弱。
2.3硼酸濃度的影響
從表3可知,
硼酸對楊桃花粉萌發和花
粉管生長的影響和鈣相似。硼酸濃度為
0時,兩個品種的花粉都能夠萌發,萌發率達
64%以上,花粉管長度也都達到275以
上。當硼酸濃度為0.01%時,兩個品種楊桃
的萌發率均最高,分別為79.56%和
79.77%,“香蜜”花粉萌發率顯著高于對照
,
“夏威夷
”花粉萌發率與對照無顯著性差異。
而硼酸濃度0.1%時,“香蜜”“夏威夷”花粉
的萌發率分別降低至2.84%和2.24%,顯著
的低于其他處理,花粉管長度也顯著降低,分
別降低至111.69fzm和110.17ptm。過高硼
114中國南方果樹2021年第50卷第2期
注:BK培養基中含10%蔗糖和0.01%氯化鈣。
酸濃度對楊桃花粉的萌發率和花粉管生長起到較強烈的抑制作用。
表2不同鈣離子濃度培養基對兩個品種楊桃花粉萌發率和花粉管生長王源簡介 的影響
鈣離子濃度/%
香蜜
夏威夷
花粉萌發率
/%
花粉管長度/ym
花粉萌發率/%
花粉管長度/“n
0(對照
)
54.44+12.60b
298.89士
65.954.23b
281.9825.
28a
0.001鋼鐵是怎樣煉成的心得體會
80.511.17c
311,1714.99b
68.
694.64b
283.
7714.77a
0.0179.564.39c
295,07+11.01b
79.775.37c271.71士&54a
0.111.17+2.96a
257.4824.41a
53.960.50a335.7019.14b
注:BK培養基中含10%蔗糖和0.01%硼酸。
表3不同硼酸濃度培養基對兩個品種楊桃花粉萌發率和花粉管生長的影響
硼酸濃度/%
香蜜
夏威夷
花粉萌發率/%
花粉管長度/“n花粉萌發率/%
花粉管長度/“n
0(對照
)64.653.14b316.109.
67c
74.4913.78bc275.72士12.70b
0.001
66.27
+2.54b
229.7633.58b
65.
57士1.27b
358.53土20.60c
0.01
79.564.39c
295.0711.01c79.775.37c271.718.54b
0.1
2.842.50a
111.6927.66a
2.24士0.40a110.17
+30.64a
3結論與討論
適宜濃度的蔗糖對花粉萌發和花粉管生
長起到顯著的促進作用。蔗糖不僅作為一種
營養物質為花粉萌發和花粉管生長提供能
量,同時作為滲透物質為花粉萌發提供所需
的滲透壓〔則。蔗糖濃度適宜,能夠維持花粉
和培養基中學歷史教學法 之間的滲透壓平衡。蔗糖濃度過
高
,會造成花粉原生質脫水,導致花粉質壁分
離;蔗糖濃度過低,
花粉吸水
,易造成花粉壁
破裂,這兩種情況都會抑制花粉的萌發。因
此
,蔗糖濃度必須在適宜范圍內才能促進花
粉萌發。不同植物花粉萌發所需培養基的蔗
糖濃度有差異
,應該與品種遺傳差異和花粉
所需滲透壓不同有關。
有關研究表明,薄殼
山核桃花粉萌發適宜的蔗糖濃度是20%?
30%山〕;當蔗糖200g/L時甘蔗花粉的萌發
率達到最高值「⑷;促進火龍果花粉萌發的蔗
糖最佳濃度為25%"1。本試驗中,當蔗糖濃
度為0時,可使楊桃花粉萌發,但萌發率極
低,可能由于楊桃花粉本身蘊含的營養物質
使花粉少量萌發。當蔗糖濃度為10%時,兩
個品種的花粉萌發率都達到最高,
可能此時
的蔗糖濃度最接近于楊桃花粉萌發所需的滲
透壓條件,
故萌發率較高。當蔗糖濃度為
15%時,兩個品種花粉的萌發率比10%蔗糖
處理顯著降低;當蔗糖濃度為20%時,“香
蜜”“夏威夷”花粉的萌發率分別降低為
0.27%和4.31%,在蔗糖濃度過高的條件
下,“夏威夷”花粉萌發率比“香蜜”高,可能是
“夏威夷”花粉在不利生長的滲透壓條件下抗
逆性更強,有關原理還需進一步研究。
鈣離子在花粉管的極性生長中起重要作
用,
鈣離子在花粉管的尖端聚集
,向內流十分
活躍,鈣離子的動態平衡對花粉的萌發和花
粉管生長有重要影響相關研究中,“
保
羅蘭”睡蓮的花粉在氯化鈣20mg/L時最適
宜萌發,氯化鈣5mg/L適宜竹葉蘭花粉
萌發⑴」。本研究中,鈣離子濃度為0時,楊
桃花粉有較高的萌發率,花粉管生長較好,可
能是楊桃花粉自身所含的鈣離子就能滿足花
粉生長發育,對外源鈣離子表現為非必需組
分。鈣離子濃度為0.01%時,兩個品種的花
粉萌發率均較高,
顯著高于對照。因此,一定
濃度的外源鈣離子能在一定程度上提高花粉
萌發率。而鈣離子濃度為0.1%時,“香蜜”
2021年第50卷第2期
中國南方果樹115
“
夏威夷
”花粉的萌發率降低,分別為11.17%
和53.96%,均低于對照
,過高濃度的鈣離子
對花粉萌發起抑制作用。此時,“夏威夷”花
粉萌發率高于“香蜜”,可能是“夏威夷”花粉在
不利生長的鈣離子濃度條件下抗逆性更強。
硼酸是促進花粉萌發的另一重要組分,
適宜的硼酸濃度可顯居里夫人簡介 著提高花粉萌發率。硼
酸對花粉管膜中的果膠合成有重要作用,參
與花粉管頂端細胞壁的形成。此外
,
硼可與提高硬度
蔗糖形成絡合物,增加花粉糖含量,加強糖的
代謝活動相關研究表明,日本海棠花粉
萌發的適宜硼酸濃度為0.02%〔河,香水蓮花
花粉萌發最適硼酸濃度為0.001o本研
究中,硼酸濃度為0時,楊桃花粉也有較高的
萌發率,花粉管生長也較好,可能是花粉本身
所含的成分能夠滿足花粉萌發,對外源硼也
表現為非必需組分
。
低濃度的硼酸能小幅度
促進花粉萌發率,但硼酸濃度為0.1%時,則
會顯著抑制花粉萌發和花粉管生長。因此,
在栽培管理中應注意硼肥濃度,從成本角度
考慮建議不用單施硼肥。
綜合來看,楊桃花粉萌發最適宜的培養
條件為10%蔗糖+0.01%硼酸+0.01%氯
化鈣,萌發率79%以上,花粉管長度達270
以上。此外,蔗糖或鈣濃度過高時,“夏
威夷”花粉萌發的抗逆性比“香蜜”更強,這對
今每個月的14號 后其雜交育種父本品種篩選等方面的研究
具有參考價值。
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(責任編輯:肖田)
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