抗菌肽

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微量肉湯稀釋法（borthmicrodilutionmethod）

實驗方法：

1.用無菌蒸餾水在聚丙烯離心管中將抗菌肽和抗生素溶解制成1280g/L的儲備

液，然后用等量無菌的0.02%乙酸（含0.4%BSA）稀釋，在用0.01%乙酸（含

0.2%BSA）溶液對等量稀釋后的溶液在進行一系列的雙倍稀釋，得到質量濃

度為640，320，160……1.25mg/L的共10個梯度的系列稀釋液，4C下保

存備用。

2.將待測細菌在滅菌MH楚雄旅游 肉湯瓊脂平板上過夜培養，挑取菌落接種于滅菌試管中

的MH肉湯，37C，18吃藥能喝綠豆湯嗎 0r/min過夜培養。將培養后的菌液稀釋至2*10^5-7*10^5

CFU/mL，向無菌的96孔平板中的1-11孔各加入100L的菌液，12孔不加

入菌液而加入100LMH肉湯，然后從1～10孔逐一加入相應的待測抗菌肽，

11孔作為掃描對照組不加肽。37C，90r/min培養18-24h，這樣待測抗菌

肽的終質量濃度分別為64，32，16，……0.125mg/L。（不知道待測抗菌肽

添加量是多少，最終抗菌肽的終濃度怎么縮小了10倍）

3.最小抑菌濃度MIC（mininmalinhibitoryconcen搞笑詩朗誦 tration）就是能阻止50%

以上細菌生長的最小肽濃度。用酶標儀在4中國瑰寶 90nm下對平板進行掃描，肽的

MIC的確定按照比對照孔（11孔）的渾濁程度低50%以上的最小質量濃度計

算。

4.最小殺菌濃度MBC（minima紅軍長征的路線 lbactericidalconcentration）就是能抑制任

何殘余菌落生長的肽的最低濃度。從沒有螳螂的簡筆畫 細菌生長的平板孔中的內容物中取

10L涂布到MH瓊脂平板上，37C培養18h，以此來確定肽的MBC。

參考文獻：

【1】汪以真，抗菌肽與抗生素的體外抗菌效果比較[J].中國獸醫學報，2004，

24（3）：270-273.

抗菌肽的體外抑菌實驗（平板法）

1.稀釋：將一定效價的抗菌肽做6個濃度的稀釋，將抗生素按正常使用劑量同

樣做6個濃度的稀釋

2.指示菌：指示菌用液體LB培養基培養24h后稀釋至10^6CFU/mL

3.制板：取1mL指示菌雪花英文 注入培養皿中，倒入滅菌冰心的原名是什么 的固體LB培養基搖勻，放冷

后制成平板。

4.用打孔器打涉足的意思 孔法來確定抑菌效果。

參考文獻：

李曉營，等.一種抗菌肽的體外抑菌實驗、安全性評價及其對腸道菌群的影響[J].

廣東飼料，2014，23（2）：25-28

（注：專業文檔是經驗性極強的領域，無法思考和涵蓋全面，素材和資料部分

來自網絡，供參考。可復制、編制，期待你的好評與關注）