生理實驗－-小腸平滑肌生理特性的觀察與分析
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消化道平滑肌生理特性及藥物影響
一、實驗目的：
1、學習哺乳動物離體器官的灌流實驗法。
2、觀察消化道平滑肌自律性運動及藥物溫度的影響。
二、實驗原理?消 化道平滑肌和骨骼肌、心肌一樣,也具有興奮性、傳導性和收縮性,有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的興奮性低，收縮慢，伸展性大，具有緊張性收縮， 對
化學物質、溫度變化及牽張刺激較敏感等特性。小腸離體后,置于適宜的溶液中，觀察其收縮活動及環境變化的影響,觀察分析上述生理特性。
三、實驗材料——?1、實驗動物：家兔?2、 器械、藥品：電熱恒溫水浴鍋、浴槽、張力換能器(量程為２５g以下)、ＢＬ－４１0生物記錄系統、L型通氣管、道氏袋、注射器、培養皿、溫度計、燒杯、螺 絲夾、三維調節器、臺氏液、0.0１%去甲腎上腺素、０．01％乙酰膽堿、1ｍoｌ/L NａOH溶液、lmol/L?。菴l溶液、2％CaCl2溶液。?四、實驗方法和步驟
1、標本制備流程:?①擊昏家兔：
用木槌猛擊兔頭枕部,使其昏迷。?②剖開腹腔快速取出腸管:
立即剖開腹腔,找出胃幽門與十二指腸交界處,快速取長20~30ｃm的腸管,先將與該腸管相連的腸系膜沿腸緣剪去，置于供氧臺氏液中輕輕漂洗,把腸內容物基本洗凈。?③制作離體腸標本:?將腸管分成數段,每段長2-3cm,兩端各系一條線,保存于供氧的38℃左右的臺氏液中?2、儀器安裝與調試實驗安裝(如圖)：
恒溫水浴鍋控制加熱，恒溫工作點定在３8℃。將充滿氧氣的道氏袋與通氣鉤相連接,將腸段一端系在通氣管鉤上，另一端與張力換能器相連?？刂仆饬?使氧氣從通氣管前端呈單個而不是成串逸出。
儀 器調試：BＬ-410系統的使用,選擇“實驗項目”中的“消化實驗”選中“消化道平滑肌生理特性”。相關參數設置的參考值：時間常數ｔ→ＤC，高頻濾波 F→30Hz，顯速→4.00ｓ／div,增益→1０0ｇ。用鼠標左鍵單擊工具條上的“開始”按鈕,調節參數至波形幅度、密度適當,待收縮曲線穩定后,單 擊記錄按鈕。?五、實驗結果:
實驗項目 收縮幅度 收縮節律 |
室溫臺氏液→3７度 1/１0萬Ach2滴 ↑ ↓ 1/萬 Aｄr2滴 ↑ ↓ 1／萬 Atr２滴 ↑ ↓ 2min后加Aｃh2滴 ↑ ↓ 換25度臺氏液 繼之→42度 42度→ |
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六、觀察項目現象及解釋
1．待標本穩定后，記錄小腸平滑肌收縮的對照曲線。?2．乙酰膽堿的作用 用滴管吸入0.０1％乙酰膽堿向灌流浴槽內滴１~２滴。觀察到明顯效應后,立即從排水管放出浴槽內含乙酰膽堿的臺氏液，加入新鮮溫臺氏液，由此反復3次,以洗滌或稀釋殘留的乙酰膽堿，使之達到無效濃度,待小腸運動恢復后進行下一項。?3.腎上腺素的作用 按上述方法將0．０１%腎上腺素加入浴槽內１~2滴,觀察小腸運動的反應。當效果明顯后，立即更換臺氏液。?4.氯化鈣的作用 加２%CaC１2溶液2~3滴入灌流浴槽內,觀察其反應，效果明顯后迅速沖洗。?5．鹽酸的作用 加1~２滴1mｏｌ/L?。菴l溶液入浴槽內，觀察其反應。
6.氫氧化鈉的作用 在(5)基礎上加等容量的1mol/Ｌ NaOH溶液入浴槽內,觀察其反應。按上述方法更換臺氏液，反復沖洗。?７.溫度的影響 將浴槽內臺氏液放出,注入25℃臺氏液，觀察平滑肌收縮有何改變,當效應明顯后再換入38℃臺氏液，持續一段時間后,再換入42℃臺氏液,觀察收縮活動的變化(亦可根據室溫的具體情況選做其中的一項）。?七、注意事項——?1. 實驗過程中必須保證標本的供氧(通氣)及浴槽內臺氏液的恒溫（3８℃),以維持標本活性。?2. 灌流浴槽內的液面高度應保持恒定。?3. 放大器零點調好后不要再移動旋鈕，以免影響基線。
