異硫氰酸胍法提取制備模板核酸此法主要用于RNA的提取.標本為組織細胞及血清等.用途:用于變性裂解細胞;提取RNA和DNA。TRIzol是一種新型總RNA抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。
中文名異硫氰酸胍
外文名Guanidine thiocyanate
分子量118.16
分子式CH5N3·HSCN
基本內容Guanidine thiocyanate簡稱GITC
分子式:CH5N3·HSCN
分子量:118.16
外觀:白色結晶
熔點:115-120℃
PH(4%水溶液):4.5-7.0
紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit
紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit
干燥失重:≤0.5%
用途:用于變性裂解細胞;提取RNA和DNA。無RNA酶和DNA酶活性
提取異硫氰酸胍法提取制備模板核酸此法主要用于RNA的提取.標本為組織細胞及血清等.
1.異硫氰酸胍消化液
異硫氰酸胍4mol/L
檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L
十二烷基肌酸鈉0.5%
β-巰基乙醇0.1mol/L
2.消化方法:用50~100ul細胞懸液及血清,加等體積的異硫氰酸胍消化液振混勻后,或65℃1小時,或室溫放置數分鐘,然后加1/10體積的3mmol/LpH5.2的醋酸鈉緩沖液,再加等體積的酚:氯仿,用力振搖約10s,10000r/min,離心5min,取上清加等體積異丙醇-20℃放置3h后,14000r/min離心15min,沉定用75%冰冷乙醇離心洗滌1~2次,真空干燥,沉淀用TE緩沖液溶解即可用于逆轉錄PCR擴增,或放-20℃保存。
影響異硫氰酸胍潛在的健康影響: 吸入:吸入可能有害。該物質對組織、粘膜和上呼吸道破壞力強。 攝入:誤吞對人體有害。引致灼傷。 皮膚:如果通過皮膚吸收可能是有害的??梢鹌つw燒傷。 眼睛:眼睛濺入,可引起眼睛燒傷。 異硫氰酸胍注意事項:異硫氰酸胍對人體有害,請注意做好個體防護。[1]
參考資料本文發布于:2023-06-07 01:22:51,感謝您對本站的認可!
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