分子雜交技術

DNA分子雜交技術

在高中生物教材中，多次提到DNA分子雜交技術，但愛倫坡短篇小說集 對于DNA分子雜交技術所用到的工具、

依據的原理及應用領域等都只是一帶而過，讓許多教師和學生深感疑惑，從而導致對此知識

理解不深，造成教學和學習上的困難。在此，筆者對其在高中生物教材中出現過的一些內容

進行補充介紹，以期加深理解，達到解疑釋惑的目的。

1、什么叫DNA分子雜交技術？

DNA分子雜交技術又稱DNA探針技術，是利用DNA分子的變性、復性以及堿基互補

配對的高度精確性，對某一特異甜糯米飯 性DNA序列進行探查的新技術。

2、DNA分子雜交技術的原理

DNA分子雜交的原理是,具有互補堿基序列的DNA分子,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形

成穩(wěn)定的雙鏈區(qū)。在進行DNA分子雜交前,先要將兩種生物的DNA分子從細胞中提取出來,

再通過加熱或提高pH的方法,將雙鏈DNA分子分離成為單鏈,這個過程稱為變性。然后,將兩

種生物的DNA傳遞的英文 單鏈放在一起雜交,其中一種生物的DNA單鏈事先用同位素進行標記。如果兩

種生物DNA分子之間存在互補的部分,就能形成雙學校鑒定 鏈區(qū)。由于同位素被檢出的靈敏度高,即使

兩種生物DNA分子之間形成百萬分之一的雙鏈區(qū),也能夠被檢出。

3、DNA分子雜交技術的工具軍官職業(yè)化 ------ＤＮＡ探針

DNA探針是利用放射性同位素(如32P)、熒光分子等標記的特定DNA片斷，該片斷可大至寄

生蟲基因組DNA，小至20個堿基。DNA探針具有特異性；由于用放射性同位素（如32P）或

生物素標記探針，使雜交試驗同時具有高度的敏感性。

4、DNA分子雜交技術的應用

(1)不同種生物之間親緣關系的判斷

不同種生物之間親緣關系的判斷，常采用比較不同生物DNA分子差異來進行,常用DNA分子

雜交法。二百字的日記 將兩種生物的DNA分子單鏈放在一起剪紙動物 ,如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列,就會形

成雜合雙鏈區(qū)。互補的堿基序列越多，形成的雜合雙鏈區(qū)就越多，說明兩種生物間的親緣關南京吃喝玩樂

系就越近(如圖)。或者是把兩個物種的DNA單鏈融合在一起，然后對這條新的DNA加熱。兩

個物種DNA序列的相似程度越高，讓這條DNA雙鏈解開的溫度也就越高。用這種方法，科學

家推測出黑猩猩和人的DNA相似程度是大約98．5％，黑猩猩是與人類親緣關系最近的動物。

(2)基因診斷

基因診斷是上世紀70年代末迅速發(fā)展一項診斷技術，不僅及時推廣應用于臨床，并且也很

快的被公安部門采用來偵破刑事案件。基因診斷是利用DNA分子雜交等分子學技術直接探查

人體基因組DNA存在的缺損或基因表達產物的異常以及患病毒、細菌、寄生蟲、真菌等感梁

性疾病時，病原體的基因組織或其基因的表達產物作出迅速正確診斷；并取量相微。病毒，

細菌等原體得入人體內后需要潛伏一定時間才能出現顯示癥狀，因此采用通常形態(tài)學、生化

學或血清方法診斷很難及時診斷出來，往往延遲了有效的治療時間；只有基因診斷技術才能

做到病原體尚沒有出現癥狀前，就能作出準確的診斷。基因診斷是用放射性同位素(如32P)、

熒光分子等標記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測標本上的遺傳信息，

達到檢測疾病的目的。例如，如何浪漫的表白 利用DNA探針可以迅速地檢出肝炎患者的病叉燒是什么肉 毒，為肝炎的診

斷提供了一種快速簡便的方法。目前用基因診斷方法已經能夠檢測出腸道病毒、單純皰疹病

毒等許多種病毒。目前核酸分子雜交不但用來檢測急性病人標本中的病毒DNA，也用于檢測

不易分離培養(yǎng)的慢性感染、潛伏感染、整合感染病人標本中的病毒DNA。

(3)環(huán)境監(jiān)測。

據報道，用DNA探針可以檢測飲用水中病毒的含量。具體的方法是使用一個特定的DNA片段

制成探針，與被檢測的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測出來。此方法的特點是快速、靈敏。

用傳統(tǒng)方法進行檢測，一次需要耗費幾天或幾個星期的時間，精確度也不高。用DNA探針只

需要花費一天的時間，并且能夠大幅度地提高檢測精度。

Southern雜交──DNA和DNA分子之間的雜交。目的基因是否整合到受體生物的

染色體DNA中，這在真核生物中是目的基因可否穩(wěn)定存在和遺傳的關鍵。如何證

明這一點，就需要通過Southern雜交技術。基本做法是：第一步，將受體生物

DNA提取出來，經過適當的酶切后，通過瓊脂糖凝膠電泳，將不同大小的片段分

開；第二步，將凝膠上的DNA片段轉移到硝酸纖維素膜上；第三步，用標記了放

射性同位素的目的DNA片段作為探針與硝酸纖維素膜上的DNA進行雜交；第四步，

將X光底片壓在硝酸纖維素膜上，在暗處使底片感光；第五步，將X光底片沖洗，

如果在底片上出現黑色條帶（雜交帶），則表明受體植物染色體DNA上有目的基

因。