
菌種酵母菌異養(yǎng)兼性厭氧型單細(xì)胞真菌(葡萄皮上附著有野生型酵母菌)
原理
流程
果酒制作
條件控制
有氧條件:進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖
無氧條件:進(jìn)行酒精發(fā)酵
挑選葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→果酒(應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避
免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會)
葡萄汁裝瓶時,要留有
大約1/3的空間
溫度:18~25℃
時間:10~12天左右
目的
①先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖,耗盡氧氣后再進(jìn)行酒精發(fā)酵
②防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO造成發(fā)酵液溢出)
2
葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因發(fā)酵過程中,隨著酒精度數(shù)的提高,紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液
在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這種環(huán)境而受到抑制
菌種醋酸菌(異養(yǎng)需氧型細(xì)菌,變酸的酒的表面白色菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖形成的)
原理
流程挑選葡萄→沖洗→榨汁→(酒精發(fā)酵→)醋酸發(fā)酵→果醋
果醋制作
氧氣充足、糖原充足時:糖→醋酸
氧氣充足,缺少糖源時:乙醇→乙醛→醋酸
全程通氣
條件控制溫度:30~35℃
時間:7~8天左右
①裝置中a為充氣口,用于向裝置內(nèi)通氣;b為排氣口,用于排出CO;c為出料口,
2
用于取樣檢測
②b長而彎曲,目的是防止空氣中微生物的污染
③此裝置用于果酒制作時,應(yīng)關(guān)閉充氣口a,制作果醋時,應(yīng)將充氣口連接氣泵,
輸入氧氣
發(fā)酵裝置
傳
統(tǒng)
發(fā)
酵
技
術(shù)
的
應(yīng)
用
菌種主要是毛霉(異養(yǎng)需氧型真菌),來源于空氣中的毛霉孢子
原理
蛋白酶:蛋白質(zhì)→小分子的肽+氨基酸
脂肪酶:脂肪→甘油+脂肪酸
讓豆腐長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制
腐乳外部有一層致密的“皮”,這層“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的毛霉菌絲形成的
水含水量約70%(過高:豆腐塊不易成形;過低:不利于毛霉的生長)
作用①析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬;②抑制微生物生長
鹽用量毛坯:鹽=5:1(過高:會影響腐乳的口味;過低:不足以抑制微生物的生長)
用法逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些
①使腐乳具有獨特的香味;②抑制微生物生長條件控制作用
約12%(過高:會使腐乳成熟時間延長;過低:不足以抑制微生物生長)用量
流程
腐乳制作
酒
香辛料作用:①調(diào)制腐乳的風(fēng)味;②防腐殺菌
溫度:前期15~18℃,并保持一定的濕度
時間:6個月左右
菌種乳酸菌(異養(yǎng)厭氧性細(xì)菌)
原理在無氧條件下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸
流程選擇原料、預(yù)處理→調(diào)味、裝壇→發(fā)酵→成品
鹽水
清水:鹽=4:1
要煮沸后冷卻再使用(煮沸作用:①殺滅鹽水中其他細(xì)菌;②除去水中的氧氣)條件控制
成分碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子等
固體培養(yǎng)基(加入了凝固劑——瓊脂)
按物理性質(zhì)半固體培養(yǎng)基(加入了一定比例的瓊脂)
液體培養(yǎng)基(不加凝固劑)
目的允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其它種類微生物生長的培養(yǎng)基
選擇
培養(yǎng)基
舉例以尿素為唯一氮源,分離尿素分解菌;以纖維素為唯一碳源,分離纖維素分解菌
目的鑒定出是否有某種菌
鑒別
培養(yǎng)基
舉例加入剛果紅,鑒別纖維素分解菌(菌落周圍出現(xiàn)透明圈)
加入青霉素,分離酵母菌和霉菌;加入高濃度食鹽,分離金黃色葡萄球菌
不添加氮源,分離固氮微生物分類
按功能
加入酚紅指示劑,鑒別尿素分解菌(菌落周圍變紅)
加入伊紅美藍(lán),鑒別大腸桿菌(菌落呈現(xiàn)紫黑色或黑色)
富集
培養(yǎng)基
使混合微生物中的特定菌種的數(shù)量比例不斷增高,并引向純培養(yǎng)
也稱營養(yǎng)培養(yǎng)基,是一種液體培養(yǎng)基
培養(yǎng)基
微
生
物
的
實
驗
室
培
養(yǎng)
無菌技術(shù)方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法等
關(guān)鍵防止外來雜菌的入侵
消毒
滅菌
實驗流程
概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物
概念用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子
方法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板
注意平板冷凝后,要將平板倒置,以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染
平板劃線法
每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而
逐步減少,最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落
接種環(huán)在沾取菌液前、每次劃線前(除沾取菌液后第1次劃線)、劃線結(jié)束后,都需要灼燒滅菌
稀釋涂布平板法用涂布器將一定稀釋倍數(shù)的菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基的表面
將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后,放入4℃的冰箱中保藏臨時保藏法
適用于需要長期保存的菌種,在菌液中加入甘油,放在–20℃的冷凍箱中保存甘油管藏法
純化大腸桿菌的方法
菌種的保存
微
生
物
的
培
養(yǎng)
與
應(yīng)
用
尿素不能直接被農(nóng)作物吸收,被土壤中的細(xì)菌分解成氨后,才能被植物利用(有些細(xì)菌能合成脲酶,將尿素分解成氨)
用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基,使得土壤中能夠合成脲酶分解尿素的細(xì)菌可以生長,其他細(xì)菌不能生長分離原理
稀釋涂布平板法接種方法
土壤取樣→樣品梯度稀釋→取樣接種→培養(yǎng)觀察→菌種鑒定實驗流程
在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑
原理:尿素被分解成氨后,培養(yǎng)基pH升高,指示劑將變紅
原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌
特點適用于統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目
統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目小(因為當(dāng)兩個或多個細(xì)
胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落)
選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計數(shù),以保證結(jié)果準(zhǔn)確平板選擇
某一稀釋度的樣品液需要涂布多個平板,計數(shù)后求平均值,以減少誤差注意
每克(毫升)樣品中的菌株數(shù)=(C/V)×M計算方法
將不接種的空白培養(yǎng)基作為對照,檢驗培養(yǎng)基是否受到污染
設(shè)置對照
果膠
是植物細(xì)胞壁和胞間層的主要組成成分之一
是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物,不溶于水
作用能夠把果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸
多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶組成果膠酶
植物、霉菌、酵母菌、細(xì)菌來源
指催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力概念
在一定條件下,酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度(反應(yīng)速度用單位時
間、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示)
酶的活性
表示方法
果膠酶在果汁
生產(chǎn)中的作用
溫度、pH、酶的抑制劑
探究溫度對
酶活性的影響
影響酶活性的因素無關(guān)變量pH、果泥量、酶用量、反應(yīng)時間、過濾時間等
探究pH對
酶活性的影響
自變量酶的用量
探究果膠酶的用量因變量果汁的出汁量
無關(guān)變量pH、溫度、果泥量、酶用量、反應(yīng)時間、過濾時間等
自變量溫度:設(shè)置溫度梯度來確定最適溫度
因變量果汁的出汁量或澄清度
自變量設(shè)置pH梯度來確定最適溫度
因變量果汁的出汁量或澄清度
無關(guān)變量溫度、果泥量、酶用量、反應(yīng)時間、過濾時間等
加酶洗衣粉
的洗滌效果
加酶洗衣粉
指含有酶制劑的洗衣粉(酶制劑主要有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶)
普通洗衣粉中含有磷,含磷污水的排放會導(dǎo)致微生物和藻類的大量繁殖,造成水體污染
概念是利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)
酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,可以被反復(fù)利用優(yōu)點
只有一種酶,只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)缺點
多采用化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法(因為酶的體積較小)
方法
實例固定化葡萄糖異構(gòu)酶,用于生產(chǎn)高果糖漿
圖示
是利用物理或化學(xué)方法將細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)概念
細(xì)胞內(nèi)有一系列的酶(酶的種類多),可以催化一系列化學(xué)反應(yīng)優(yōu)點
不適于催化大分子的反應(yīng)物缺點
多采用包埋法(因為細(xì)胞的體積較大)
方法
圖示
固定化酵母細(xì)胞
實例
操作步驟
酵母細(xì)胞的活化→配制物質(zhì)的量為0.05mol/L的CaCl溶液→配制海藻
2
酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞
酶
的
應(yīng)
用
與
蛋
白
質(zhì)
的
提
取
和
分
離
固定化
酶技術(shù)
酵母細(xì)胞的固定化
固定化
特點具有很強(qiáng)的揮發(fā)性,其組成主要包括萜類化合物及其衍生物
原理
利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來,形成油水
混合物,冷卻后,重新分出油層和水層
水中蒸餾、水上蒸餾、水氣蒸餾分類
有些原料會焦糊、有效成分水解水中蒸餾缺點
通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油壓榨法原理
使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑獲得芳香油萃取法原理
植物
芳香油
水蒸氣蒸餾法
提取
方法
特點化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、難溶于水、易溶于有機(jī)溶劑、能隨水蒸氣一同蒸餾
方法常用水蒸氣蒸餾法
鮮玫瑰花+水→水蒸氣蒸餾→油水混合物→加NaCl分離油層→加無
水Na2SO4除水→過濾→玫瑰油
如果要提高產(chǎn)品品質(zhì),需要延長蒸餾的時間,且蒸餾溫度不能太高提示
實驗流程
植物芳香油
的提取
玫瑰精油
的提取
蒸餾裝置
特點無色透明、主要成分是檸檬烯
方法壓榨法
植
物
有
效
成
分為了使橘皮精油易于與水分離,可分別加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的
的
提
取
橘皮精油
的提取
石灰水浸泡→漂洗→壓榨→過濾→靜置→再次過濾→橘皮油實驗流程
石灰水能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率;
浸泡時間為10h以上
NaHCO3和5%的Na2SO4,并調(diào)節(jié)pH至7~8
分為α、β、γ三類,β-胡蘿卜素是其中最主要的成分,一分子β-胡蘿卜素可在人體
內(nèi)氧化為兩分子的維生素A(用于治療夜盲癥)
是橘黃色結(jié)晶,化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑特點
植物、巖藻、微生物發(fā)酵來源
提示
分類
胡蘿卜素
提取方法萃取法
實驗流程胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素
提取裝置見選修一教材P圖6-7
78
干燥時溫度和時間的控制
萃取劑的選擇
影響萃取的因素
溫度太高、時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解
沸點較高、毒性低、不與水混溶的有機(jī)溶劑
萃取劑的性質(zhì)和使用量
原料顆粒的大小、緊密程度、含水量
萃取的溫度和時間等有關(guān)
萃取過程中要避免明火加熱,采用水浴加熱
因為有機(jī)溶劑都是易燃物,
直接用明火加熱容易引起燃燒、爆炸
胡蘿卜素
的提取
提示
濃縮可直接使用蒸餾裝置,濃縮之前要進(jìn)行過濾,除去萃取液中的不溶物
紙層析法
鑒定方法
胡蘿卜素的紙層析A、D點點標(biāo)準(zhǔn)樣品(對照)
結(jié)果示意圖B、C點點提取樣品
-4-

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