三種中草藥抗氧化性研究
第26卷，第6期
2009年11月
光譜實驗室
ChineJournalofSpectroscopyLaboratory
V o1.26,NO.6
November,2009
三種中草藥抗氧化性研究①
韓明藺志鐸薛福玲吳冬青②
(河西學院化學系西部資源環境化學重點實驗室甘肅省張掖市甘州區北環路87號734000)
摘要微波輔助法提取3種中草藥中黃酮類化合物，從還原能力，清除羥基自由基和抗油脂氧化方
面，研究其抗氧化活性.結果表明:3種中草藥中，總黃酮含量從高到低依次為：老鶴草(132.516mg/g)，孺
薟草(78.4749mg/g)，白花蛇舌草(35.6519mg/g).其提取物具有較好的還原能力，且對羥基自由基均有明
顯的清除作用，其清除效果隨提取物濃度的增加而增強.三種中草藥提取物也具有一定的抗油脂氧化能
力，它們的抗氧化能力存在差異.實驗結果為我們更加合理開發利用這些藥用植物提供了很好的科學依
據.
關鍵詞三種中草藥；總黃酮；抗氧化能力
中圖分類號:R282.71~O657.31文獻標識碼:A文章編號:1004—8138(2009)06—1480—05
l前言
黃酮類化合物是一類廣泛存在于植物界，具有多種生物活性的多酚類化合物n].它
有著廣泛的
生理活性，具有抗癌防癌，抗衰老，降血脂，免疫調節，抗菌等生物學功效瞳].在醫藥生產，功能食品
開發等領域有著廣闊的應用前景.目前有關黃酮類化合物的化學成分，藥理藥效與應用方面的研究
已成為該領域的熱點.
白花蛇舌草，孺薟草，老鶴草均為我國傳統中藥品種，白花蛇舌草具有清熱利濕，抗腫瘤，抗菌
消炎等作用].稀薟草，老鶴草均具有祛風濕，利關節等功效.它們在中醫中藥領域都具有很高的
藥用價值.近年來隨著對中草藥有效成分的不斷深入探討，有必要對我國傳統中草藥藥效功能和在
制藥和食品工業的進一步開發利用做出細致研究.本文采用微波輔助法提取3種中草藥中黃酮類
化合物，從還原能力，清除羥基自由基和對油脂抗氧化效果等方面對其抗氧化性進行了研究.此結
果有望為中草藥黃酮類化合物在制藥和食品工業領域的深入開發利用提供實驗數據.
2實驗部分
2.1材料
白花蛇舌草，孺薟草，老鶴草(購于張掖中藥店)，豬油(自制).
2.2主要試劑
蘆丁[生化試劑，中國醫藥(集團)上海化學試劑公司]；鄰二氮菲,HO,AI(NO.).,NaNO.,
①甘肅省教育廳科研資助項目(0509—02)；西部資源環境化學重點實驗室科研資助項目(xz0603)
②聯系人，電話:(0936)8282566；手機:(o)130****0331;E-mail:*******************.gs
作者簡介：韓明(1985一)，女，甘肅省金昌市人，研究方向：天然產物活性物質提取與
分析
吳冬青(1961一)?女，沈陽市人，教授，主要從事無機及分析化學教學工作.
收稿日期:2009一o4—23；接受Ft期:2009—05—11
第6期韓明等：三種中草藥抗氧化性研究
FeSO,KI，無水KHzPO,KzHPO,K.Fe(CN)e,95乙醇,NaOH，碘，冰乙酸，三氯甲烷，三氯乙酸,
三氯化鐵均為國產分析純.
2.3主要儀器
WFJ21o0型可見分光光度計(尤尼柯儀器有限公司);I.G燒烤型微波爐[樂金電子(天津)電器
有限公司];RE一52型旋轉蒸發儀(上海青浦滬西儀器廠);SHB—III循環水式多用真空泵(鄭州長城
科工貿有限公司)；國華HH一6數顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司).
3實驗方法
3.1黃酮類化合物測定_s]
3.1.1黃酮化舍物提取
稱取樣品粉末4.0000g兩份，加入95乙醇40mI，室溫浸提2h后，用微波低火提取3min，重
復3次，抽濾，合并濾液，濃縮定容至100mI容量瓶中，得一定濃度的黃酮備用液.
3.1.2校準曲線的繪制
準確稱取蘆丁對照品30rag，用80乙醇微熱溶解后，置于50mI容量瓶中，用80%乙醇定容.
準確吸取2O.00mI，再以乙醇定容于50mI，搖勻，即得蘆丁對照液，濃度為0.24mg/mI.
準確吸取蘆丁對照液0,0.2,0.4,0.6,1.0,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6mL，分別置于10mI容量瓶中，均用80乙醇補至4mI，準確加入50/0NaNOz0.4mL，搖勻，放置6min后，加入10 AI(NO.).0.4mI，搖勻，再放置6min，然后加5NaOH溶液4.0mI，用蒸餾水定容至刻度，放置
15min后，在510nm處測定吸光度(以試劑空白為參比)，以蘆丁濃度為橫坐標，吸光
度值為縱坐標
作圖，繪制校準曲線.繪圖，得回歸方程：一0.28z+0.0065一0.9998
黃酮含量(mg/g)一(z×)/叫
式中:——稀釋倍數；髓，一一樣品重量g.
3.2提取物還原能力的測定
移取不同體積的提取液，加入pH6.6的磷酸鹽緩沖液和1%K.Fe(cN)溶液各2.5mI 并混
合均勻，混合液50C保溫20min后加入 2.5mI10的三氯乙酸溶液，混合后以3000r/rain離心
10min.取上清液0.5mI，加入10.OmI蒸餾水及0.5mI0.1%的FeC1.溶液.測定反應液在700nm
處的吸光度值.吸光度的大小表示還原力的強弱.
3.3羥自由基清除率的測定口
取0.7mI5mmol/I鄰二氮菲，加2.OmIpH7.4的磷酸緩沖液，充分搖勻，加0.3mI
7.5mmol/IFeSO，每加一管立即搖勻，加2.0ml0.5H:O，最后用HO補至10mI.在37C 水
浴下反應1l，然后在536nm波長下測定吸光度A(損傷).同上法，加提取液后加H.0.測定
(加藥).同上法，不加入HO和提取物，測定AⅢ(未損傷).羥基自由基清除率d計算如下:
一
≠墮×100%n未損傷一n損傷
3.4提取物對油脂抗氧化能力的測定[8
3.4.1校準曲線的繪制
準確移取碘化鉀一碘(CI一0.001mol/I)標準溶液0.5,0.6,0.7,0.8,0.9mI置于具塞試管
中，加入2.OmI的氯仿一冰醋酸溶液(V/V=2:3)后，再加入1.0mL1%的可溶性淀粉溶液，最后
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定容至15mL，搖勻后，取上清液于波長為585nm處，測定其吸光度值(以蒸餾水為參bL).以碘量為
橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制校準曲線.得方程為:
一0.652z一0.0604r一0.9966
3.4.2油脂過氧化值(POV)的測定
取30mI豬油，加人一定量的樣品提取物于100mL燒杯中，充分混勻后，置于(60+1)℃恒溫
箱中避光保存，每24h攪拌一次，并交換它們在恒溫烘箱中的位置，每隔48h進行取樣測定.
油脂測定POV方法：稱取油樣約0.6g于具塞試管中(同時做平行試驗與空白試驗，以蒸餾水
為參比)，加人2.0mI的氯仿一冰醋酸溶液，搖勻溶解后加人1.0mL的1O的KI溶液，具塞搖勻
30s，并置于暗處反應3min.取出后加入1.0mI1的可溶性淀粉溶液，以后操作同校準曲線.根據
其吸光度和校準曲線計算碘的生成量，并計算樣品的POV.
POV(meq/kg)一.
4結果與討論
4.1樣品中總黃酮含量
準確吸取一定量的樣品備用液，根據3.1.2方法測定樣品在510nm處吸光度值，代人回歸方
程，計算出樣品中黃酮的含量，結果見表1.
表1總黃酮含量(mg/g,Jl=5)
由表1可知，三種中草藥中老鶴草黃酮含量最高，達到132.516mg/g；白花蛇舌草最低，其黃
酮含量為35.6519mg/g.各樣品中黃酮含量測定的RSD值在0.11一0.52%之l'~-J，說明測定黃酮
類化合物的方法具有一定的可靠性.
4.2提取物的還原能力1
