急性子中balsaminone A和balsaminone B對人肺癌A549細胞生長及周期的影

植物資源與環境學報２０１ １，２０（２）：１５—１８

Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ

急性 子中ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對

人肺癌Ａ５４９細胞生長及周期的影響

裴 慧 ，錢士輝 ，①

（ｉ．南京中醫藥大學，江蘇南京２１００４６；２．江蘇省中醫藥研究院，江蘇南京２１００２８）

摘要：應用ＭＴ１１法和流式細胞儀研究了急性子（Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ ｂａｌｓａｍｉｎａ Ｌ．）中雙萘呋喃一７，１２一酮類化合物ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ

Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對人肺癌Ａ５４９細胞生長及周期的影響。結果表明：２Ｏ、４Ｏ、６０和８０ ｍｏ１．Ｌ～ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和

Ｂ作用４８ ｈ均對Ａ５４９細胞生長的抑制作用顯著（Ｐ＜０．０５），其吸光值均顯著低于陰性對照且隨濃度的提高逐漸降

低，但均高于陽性對照（１００ ｍｇ?Ｌ－１５－氟尿嘧啶）；各處理組Ａ５４９細胞的生長抑制率均低于陽性對照組，其中

６０和８０ ｔｘｍｏｌ?Ｌ‘。ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處理組的生長抑制率接近陽性對照。ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ作用４８ ｈ使ＤＮＡ合成前期

（Ｇ。／Ｇ 期）的細胞比例減少，ＤＮＡ合成期（Ｓ期）和ＤＮＡ合成后期（Ｇ：／Ｍ期）的細胞比例增加，但無明顯的量效關

系；而ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ作用４８ ｈ使Ｇ。／Ｇ，期的細胞比例減少，ｓ期的細胞比例明顯增加，呈明顯的量效關系。研究結

果顯示：ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和Ｂ對Ａ５４９細胞的生長均具有顯著的抑制作用，二者的作用機制可能與誘導細胞周期阻滯

有關但有一定的差異

關鍵詞：急性子；ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ；ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ；人肺癌Ａ５４９細胞；生長抑制；細胞周期

中圖分類號：Ｑ９４９．７５５．７；Ｒ２８５．５ 文獻標志碼：Ａ 文章編號：１６７４－７８９５（２０１１）０２－００１５－０４

Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ａｎｄ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ ｆｒｏｍ Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ ｂａｌｓａｍｉｎａ ｓｅｅｄ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｃｙｃｌｅ

ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ Ａ５４９ ｃｅｌｌ ＰＥＩ Ｈｕｉ ｒ，ＱＩＡＮ Ｓｈｉ．ｈｕｉ ，①（１．Ｎａｎｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ

Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００４６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，

Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００２８，Ｃｈｉｎａ）， Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒ．＆Ｅｎｖｉｒｏｎ．２０１１，２０（２）：１５—１８

Ａｂｓｔｒａｃｔ： ｒｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｎａｐｈｔｈｏｆｕｒａｎ－７，１２一ｄｉｏｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ，ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ａｎｄ

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ．ｆｒｏｍ Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ ｂａｌｓａｍｉｎａ Ｌ．ｓｅｅｄ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｃｙｃｌｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ Ａ５４９ ｃｅｌｌ

ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ａｓｓａｙ ａｎｄ ｌｆｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｂｏｔｈ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ａｎｄ Ｂ ｗｉｔｈ ２０，

４０，６０ ａｎｄ ８０ ＬＬｍ０１．Ｌ ｈａｖｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ａ５４９ ｃｅｌｌ ａｆｔｅｒ ４８ ｈ（Ｐ＜

０．０５）．ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｖａｌｕｅｓ。ｗｈｉｃｈ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｗｉｔｈ ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｏｆ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ａｌｌ ａｒｅ

ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｂｕｔ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（１ ００ ｍｇ?Ｌ～５一

ＦＵ １．Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ａ５４９ ｃｅｌｌ ｉｎ ａｌｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｉｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ

ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．ｉｎ ｗｈｉｃｈ．ｔｈａｔ ｉｎ ６０ ａｎｄ ８０ ｐ￣ｍｏｌ?Ｌ。。ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｉｓ ｃｌｏｓｅ ｔｏ ｔｈａｔ ｏｆ

ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏ１．Ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ ＤＮＡ ｐｒｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ

（Ｇｏ／Ｇｌ ｐｈａｓｅ）ａｎｄ ｔｏ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ（Ｓ ｐｈａｓｅ）ａｎｄ ＤＮＡ

ｐｏｓｔｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ ｆ Ｇ，／Ｍ ｐｈａｓｅ）ａｆｔｅｒ ４８ ｈ ｗｉｔｈ ａｎ ｕｎｏｂｖｉｏｕｓ ｄｏｓｅ—ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．Ｗｈｉｌｅ

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ １ｃａｄｓ ｔｏ ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ Ｇｎ／Ｇ】ｐｈａｓｅ ａｎｄ ｔｏ ｅｖｉｄｅｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｃｅｌｌ

ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ Ｓ ｐｈａｓｅ ａｆｔｅｒ ４８ ｈ ｗｉｔｈ ａｎ ｏｂｖｉｏｕｓ ｄｏｓｅ．ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ．Ｉｔ ｉｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ

Ａ ａｎｄ Ｂ ｈａｖｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ａ５４９ ｃｅｌ１．ｔｈｅｉｒ ａｃｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ

ｔｏ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ｂｕｔ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｅｘｉｓｔ ｓｏｍｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｅｅｄ ｏｆ Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ ｂａｌｓａｍｉｎａ Ｌ．；ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ；ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ；ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ Ａ５４９

ｃｅｌｌ；ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ；ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ

收稿日期：２０１０—１２－２３

基金項目：江蘇省公益研究項目（ＢＭ２００６１０４）

作者簡介：裴慧（１９８７一），女，江蘇連云港人，碩士研究生，主要從事中藥品質評價方面的研究。

①通信作者Ｅ－ｍａｉｌ：ｎｊｑｓｈ２００５＠１２６．ｔｏｍ

１６ 植物資源與環境學報 第２０卷

中藥急性子為鳳仙花科（Ｂａｌｓａｍｉｎａｃｅａｅ）植物風

仙花（Ｉｍｐａｔｉｅｎｓ ｂａｌｓａｍｉｎａ Ｌ．）的干燥成熟種子…，中

國大部分地區均有分布，資源豐富。急性子具有破血

軟堅、消積的功效，其味微苦、性溫，有小毒；人肝、脾

經、降氣行瘀，主治經閉、噎膈、腹部腫塊、骨哽咽喉和

外瘍堅塊…；臨床上可用于避孕 ，終止早孕 ，食

管賁門癌及梗阻、癌癥、腫瘤 ，閉經和骨質增生

等 ］。現代藥理學研究表明：急性子具有促透皮、抗

生育、抗腫瘤及抗菌等作用。

細胞異常增殖是惡性腫瘤的生物學特征之一，檢

測藥物是否影響腫瘤細胞的增殖活性通常是篩選抗

腫瘤藥物的主要方法。Ｍ１Ｔ法（噻唑藍法）是最為常

用的方法之一，該法靈敏度高，線性關系好，簡便、經

濟、快速，廣泛應用于大規模抗腫瘤藥物篩選、細胞毒 度３７ 、飽和濕度、５％ＣＯ 培養箱內培養。細胞呈

性實驗以及腫瘤放射敏感性測定等方面 Ｊ。

作者以人肺癌Ａ５４９細胞株為實驗對象，對從急 ７０％～８０％時傳代。實驗均在細胞對數生長期進行。

性子中分離得到的雙萘呋喃一７，１２一酮類化合物 １．２．２細胞生長抑制率的測定采用ＭＴＦ法 測

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ體外抑制腫瘤細胞生 定Ａ５４９細胞的生長抑制率。取對數生長期的Ａ５４９

長的作用以及對細胞周期的影響進行研究，以期為抗

腫瘤中藥的開發和臨床應用提供實驗依據。

１ 材料和方法

１．１材料

人肺癌Ａ５４９細胞株購自中國科學院上海生命

科學研究院生物化學與細胞生物學研究所。

急性子購自江蘇省盱眙縣中藥飲片廠，經江蘇省

中醫藥研究院錢士輝研究員鑒定為鳳仙花的干燥成

熟種子。采用體積分數８０％和６０％乙醇加熱回流提

取，并經溶劑萃取、Ｄ１０１大孔樹脂富集、硅膠柱層析、

Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０和ＯＤＳ柱層析以及重結晶等方法獲 棄上清液，每孔加入１００ ＩｘＬ ＤＭＳＯ，振蕩１０ ｍｉｎ，溶解

得提取物，再經 Ｈ—ＮＭＲ、”Ｃ—ＮＭＲ、ＭＳ、ＩＲ和ｕＶ等

方法鑒定結構，并參照文獻［７］的數據鑒定提取物為

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ，經ＨＰＬＣ檢測純度均

大于９８％。臨用時用ＤＭＥＭ培養液分別配制成不同

濃度備用，其中ＤＭＳＯ終濃度小于體積分數０．５％。

主要試劑包括：ＤＭＥＭ完全培養基（美國ＧＩＢＣＯ 于６孔板中，每孑Ｌ ２ ｍＬ細胞懸液；培養２４ ｈ后，處理

公司，批號：４５０５４２）、新生牛血清（蘭州民海生物工 組分別添加含不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和Ｂ的培養液

程有限公司，批號：０８０５０８）、ＭＴＴ（美國ＡＭＲＥＳＣＯ公

司，批號：０７９３）、胰酶（美國ＡＭＲＥＳＣＯ公司，批號：

０４５８）、碘化吡啶（ＰＩ染液，美國Ｓｉｇｍａ公司）、核糖核 養基２ ｍＬ，重復３次；培養４８ ｈ后分別收集細胞，并

酸酶（美國Ｓｉｇｍａ公司）、ＴｒｉｔｏｎＸ一１００（美國

ＡＭＲＥＳＣＯ公司，批號：０１０３７０４０５）、ＤＭＳＯ（美國

ＡＭＲＥＳＣＯ公司，批號：０１９Ｄ０４０４）和５一氟尿嘧啶（天

津金耀氨基酸有限公司，批號：０７１００５２）。

主要儀器包括：ＨＥＲＡ Ｃｅｌｌ １５０ ＣＯ 細胞培養箱

（美國Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ Ｉｎｃ．）、ＣＫＸ３１ ＳＦ倒置

相差顯微鏡（日本ＯＬＹＭＰＵＳ公司）、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ

Ｍｕｈｉｓｋａｎ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ全波長酶標儀（美國Ｔｈｅｒｍｏ

Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ Ｉｎｃ．）、ＭＨ一１４０３平板振蕩器（江蘇海

門其林貝爾儀器制造有限公司）和ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ流

式細胞儀（美國ＢＤ公司）。

１．２方法

１．２．１ 細胞培養將Ａ５４９細胞接種在含體積分數

１０％滅活小牛血清的ＤＭＥＭ完全培養基上，置于溫

單層生長，當細胞單層面積長至培養瓶瓶底面積

細胞，用質量體積分數０．２５％胰酶和質量體積分數

０．０２％ＥＤＴＡ混合消化液消化，用含體積分數１０％滅

活小牛血清的ＤＭＥＭ完全培養基將細胞密度調整至

５￣１０ ｍＬ。。，接種到９６孑Ｌ培養板中，每孔１００ ｉＬＬ細

胞懸液；繼續培養２４ ｈ后，吸棄培養液；處理組分別

添加含不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ的培

養液９０ Ｌ至終濃度為２０、４０、６０和８０ ｍ０Ｉ．Ｌ，

陰性對照添加含ＰＢＳ的ＤＭＥＭ完全培養基９０ Ｌ，

陽性對照添加含５～氟尿嘧啶的ＤＭＥＭ完全培養基

９０ Ｌ至最終質量濃度１００ ｍｇ?Ｌ～；每處理及陰性、

陽性對照均設６個復孔，并設空白調零孔；繼續培養

４８ ｈ，每孔加入５ ｇ?Ｌ Ｍ１Ｔｒ １０ Ｌ；繼續培養４ ｈ，吸

結晶；用酶標儀測定波長５７０ ｎｍ處的吸光值（Ａ），實

驗重復３次。計算Ａ５４９細胞的生長抑制率，公式

為：生長抑制率＝［（Ａ陰性對照一Ａ用藥）／Ａ陰性對照］￣１００％。

１．２．３ 細胞周期檢測 取對數生長期的Ａ５４９細胞

制成單細胞懸液，調整細胞密度至１ Ｘ１０ ｍＬ～，接種

２ ｍＬ至終濃度為２０、４０、６０和８０ ｍｏ１．Ｌ～，對照組

添加含體積分數１０％滅活小牛血清的ＤＭＥＭ完全培

于１ ５００ ｒ?ｍｉｎ 離心５ ｍｉｎ，ＰＢＳ洗滌后，經３００目

第２期 裴慧，等：急性子中ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對人肺癌Ａ５４９細胞生長及周期的影響 １７

尼龍網過濾，調整細胞密度至１×１０。ｍＬ一；加入由５０

ｍＬ?Ｌ ＰＩ和２５ ｍｇ?Ｌ ＲＮａｓｅ Ａ組成的染液１ ｍＬ，

４ ＣＩ＝避光染色３０ ｍｉｎ后采用流式細胞儀檢測，參照文

表１不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對人肺癌Ａ５４９細胞

的生長抑制作用（ ±ｓＤ）

Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ

ｂａｌｓａｍｉｎｏ

ｎｅ Ａ ａｎｄ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ Ａ５４９ ｃｅｌｌ

．

（ ±ＳＤ）¨

獻［９］的方法分析Ａ５４９細胞的周期。

１．３數據統計處理

采用ＳＰＳＳ １５．０統計軟件對數據進行單因素方

差分析，Ｐ＜０．０５表示有統計學差異。用Ｍｏｄｆｉｔ軟件

對熒光強度進行分析，并據此計算出ＤＮＡ合成前期、

ＤＮＡ合成期和ＤＮＡ合成后期細胞的比例。

２結果和分析

２．１ 對Ａ５４９細胞的生長抑制作用

采用ＭＴＹ法檢測不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和Ｂ

對人肺癌Ａ５４９細胞的生長抑制作用，結果見表１。

與陰性對照組相比，２０、４０、６０和８０ ｔ．￣ｍｏｌ?Ｌ

”ＣＫ１：陰性對照Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ；ＣＫ２：陽性對照（１００ ｍｇ?Ｌ一 ５一

氟尿嘧啶）Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（１００ ｍｇ?Ｌ ５－ＦＵ）．￥：與陰性對照

相比差異顯著（Ｐ＜０．０５）Ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ

ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｐ＜Ｏ．０５）．

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和Ｂ對Ａ５４９細胞生長有顯著抑制作

用（Ｐ＜Ｏ．０５），各處理組的吸光值均顯著低于陰性對

照組；且隨著二者濃度的提高，對Ａ５４９細胞的生長

抑制率均呈逐漸增加的趨勢，這一作用具有明顯的量

效關系。但各處理組的吸光值均大于陽性對照組

（１００ ｍｇ?Ｌ ５一氟尿嘧啶），其中，ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ各

生長抑制率均低于陽性對照組，其中２０、４０、６０、８Ｏ

Ｉｘｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ處理組和２０、４０ Ｉｘｍｏｌ?Ｌ

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處理組的生長抑制率與陽性對照組差

異較大，而６０和８０ Ｉ．ｚｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ對Ａ５４９

處理組的吸光值與陽性對照組有較大差異，而２０和

４０ Ｉｘｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處理組的吸光值與陽性

對照組也有較大差異，但６０和８０ ｔｘｍｏｌ?Ｌ

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處理組的吸光值與陽性對照組的差異

較小。由生長抑制率可見：各處理組對Ａ５４９細胞的

細胞的生長抑制率接近陽性對照組。

２．２對Ａ５４９細胞周期分布的影響

人肺癌Ａ５４９細胞的細胞周期特點是細胞群分

布于細胞的各個時期。經不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和

Ｂ處理后Ａ５４９細胞各時期的比例見表２。

表２不同濃度ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅＡ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對人肺癌Ａ５４９細胞周期分布的影響（Ｘ￣ＳＤ）

Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ ａｎｄ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ ｏｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ Ａ５４９ ｃｅｌｌ（ｘ±

ＳＤ）

Ｇｏ／Ｇｌ：ＤＮＡ合成前期ＤＮＡ ｐｒｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ；Ｓ：ＤＮＡ合成期ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ；Ｇ２／Ｍ：ＤＮＡ合成后期ＤＮＡ ｐｏｓｔｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｐｈａｓｅ． ：與各

自的對照相比差異顯著（Ｐ＜Ｏ．０５）Ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｐ＜Ｏ．０５）

１８ 植物資源與環境學報 第２０卷

ｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ能導致Ａ５４９細胞ＤＮＡ合成前 影響。ｂａｌ

２０、４０、６０和８０ Ｉｘｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ作用于

／Ｇ 期）的細胞比例減少、ＤＮＡ合成期（ｓ期）和 期（Ｇ。

Ａ５４９細胞４８ ｈ后，各處理組ＤＮＡ合成前期（Ｇ０／Ｇ

／Ｍ期）的細胞比例增加，說明 ＤＮＡ合成后期（Ｇ：

期）的細胞比例均較對照顯著減少（Ｐ＜０．０５）；ＤＮＡ合

ｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ主要是將人肺癌Ａ５４９細胞的生長周期 ｂａｌ

成期（Ｓ期）的細胞比例均較對照有所增加，其中，４０

阻滯在ｓ期和Ｇ ／Ｍ期，從而抑制Ａ５４９細胞生長。

和６０ Ｉ￣ｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處理組與對照差異顯

ｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ則能導致Ａ５４９細胞中Ｇ。／Ｇ 期的細胞 ｂａｌ

著；ＤＮＡ合成后期（Ｇ ／Ｍ期）的細胞比例也均較對照

ｓ期的細胞比例增加，且這一作用具有明顯 比例減少、

有所增加，其中，４０和８０ ｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ處

／Ｍ期細胞則無明顯作用，說明 的量效關系，而對Ｇ：

理組與對照差異顯著。研究結果表明：ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ

作用于Ａ５４９細胞，但無明顯的量效關系。

２０、４０、６０和８０ Ｉｘｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ作用于

Ａ５４９細胞４８ ｈ后，各處理組Ｇ。／Ｇ 期的細胞比例均

較對照減少，其中，６Ｏ和８０ ｐ￣ｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ

處理組與對照差異顯著；Ｓ期的細胞比例均較對照顯

著增加；各處理組Ｇ ／Ｍ期的細胞比例與對照差異不

大，但２０、６０和８０ ｐ．ｍｏｌ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ處理組較

對照小幅增加，而４０ Ｉｘｍｏｔ?Ｌ ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ處理組

較對照小幅減少。研究結果表明：ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ作用

于Ａ５４９細胞的Ｇ。／Ｇ 期和ｓ期，且有明顯的量效關

系。

３ 討 論

惡性腫瘤細胞異常增殖是其生物學特征之一，而

腫瘤的發生是細胞增殖與細胞凋亡相互拮抗的最終

結果，由于細胞凋亡的存在，拮抗了細胞的加速增殖，

維持細胞自身穩定，在臨床上常通過各種方法和手段

誘發腫瘤細胞發生凋亡，從而達到治療腫瘤目的。

本文的研究結果表明：從急性子中分離得到的

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ對人肺癌Ａ５４９細胞

的生長均具有較為顯著的抑制作用，其生長抑制率隨

２個化合物濃度的提高而增強，具有明顯的量效關系。

但這２個化合物對Ａ５４９細胞生長的抑制作用低于常

用的藥物５一氟尿嘧啶，推測其原因與化合物濃度、抑

制作用的機制等多種因素有關，有待進一步的研究證

實。

供試的２個化合物對人肺癌Ａ５４９細胞周期均有

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ主要是將Ａ５４９細胞的生長周期阻滯在

ｓ期，阻止細胞進入Ｇ：／Ｍ期，從而抑制Ａ５４９細胞的

生長。推測這２個化合物對人肺癌Ａ５４９細胞不同的

作用機制可能與ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ結構中包含羥基而

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ｂ結構中包含葡萄糖苷基有關。

ｂａｌｓａｍｉｎｏｎｅ Ａ和Ｂ對Ａ５４９細胞周期的影響機制可能

是影響細胞周期蛋白的合成，也可能是通過其他途徑

影響基因表達，其作用機制還有待進一步研究。

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（責任編輯：張明霞）