2023年12月9日發(作者:十三歲的際遇)

第
48卷
第
1
期福建林業科技Jour
oh
Fujian
Forestry
Sol
and
TechVcb
48
No.
16
0
6
1
年
3
月dol
:
10.13428/j.
adi.
fjlk. 2061.20
2/Mne5,2021福建省兩棲類新記錄——粵琴蛙黃雅瓊1,李文周1,陳
斌1,蔡孝星1,鄭志學1,呂植桐4
(5福建戴云山國家級自然保護區管理局,福建
德化302525;4.中山大學生命科學學院,廣東廣州510476)摘要:2010年2月,在福建戴云山國家級保護區內采集到4號琴蛙標本,結合形態比較和線粒體CO
/基因的分子系統發
育分析,確定為粵琴蛙(Nidirana gung 廣東北部、湖南東南部和江西南部向東擴展至福建中部,為琴蛙屬的系統學和譜系地理學研究提供了重要信息。并根據福 建省彈琴蛙和粵琴蛙物種的分布范圍,探討了 5個物種的地理隔離因素。關鍵詞:粵琴蛙;新記錄;戴云山自然保護區;福建省中圖分類號:S785.5;Q959.5 文獻標識碼:A 文章編號:1002 -7351(2021)01 -0084 -06Nmiraan gaangOongensis, A New Amphibian Recerb in Fujian ProvinceHUANG YaqUng1 ,LI Wenzhou1, CHEN Bin1 , CAI Xiaoxing1 , ZHENG Zhuue1 ,LU Zhitong5 (1 . Dafya Mountain Nationai Nature Rerve Administration Buonn ,Dhin 302500,Fuian,China; 5. Schooi oO Lfe Sciencee, Sun Yat-n Universif, Guangzaoo 510578, Guangdong, Chinn)Abstroct:Four Nidirana specimens were collected from Daiynnshan National Nature Rerve, Fujian on June 2010. Bad on mor-phological comparisons and molechlar phylogeny oh mitochondrial CO I gexe,the specimens are idenUfied as Nidirana guanndon- geed,which is the new amphibian record in Fujian Province. This discoverg expands the disWiduPon oh N. guanndonnensi) from the previously known northern Guangdong, southeastern Hunan and southwestern Jiangxi to central Fujian, providing important informa-tion oh the phylogexy and biogeography oh Nidirana. In aPdiCon,we discusd the geographio isoUtion factor oh N. guanndonnensi) and N. adenopleura in Fujian,bad on their known bs: Nidirana guangdopgensi) ; /cw record ; Daiynnshan Nature Rerve ; Fujian Province蛙科(Ranibae)琴蛙屬(Nidirana)物種廣泛分布于東亞和東南亞的亞熱帶地區,目前該屬共有已知物 種10種,且所有已知種在我國均有分布⑴彈琴蛙(N. Sespeua)是琴蛙屬中命名較早的物種之一,曾 經是該屬中分布范圍最廣的物種,被廣泛記錄于我國華東、華南、西南等地[4]近年來,隨著分子生物學 oo技術的發展及綜合分類法的應用,原先曾被鑒定為彈琴蛙的多個不同種群,先后被發表為新物種[(8-0] 其中,分布于廣西大瑤山的種群被認定為瑤琴蛙(N. yaoico),分布于貴州雷公山和梵凈山的種群被認定為 o雷山琴蛙(N. 1ehhanensW),分布于湖南湘江流域的種群被認定為湘琴蛙(N. 2iangicU ),分布于浙江北部的 種群被認定為孟聞琴蛙(ni-),分布于廣東北部、湖南東南部和江西西南部的種群為粵琴蛙 (N. gungdopged))。分布于福建省的琴蛙種群,此前也均被鑒定為彈琴蛙[48-4]此后,經過形態比較和分子系統發育分 o析研究,福建北部的種群被確認為是真正的彈琴蛙[(,],而福建南部的琴蛙種群目前仍缺乏相關厘定。 26/年4月,在福建戴云山國家級自然保護區采集到4號琴蛙屬標本,經過詳細的形態比較和分子系統 發育分析鑒定為粵琴蛙,為福建省兩棲類新記錄。本發現為琴蛙屬的系統學和譜系地理學研究提供重要 信息。收稿日期:2020 -05 -08;修回日期:2020 - 00 -15基金項目:生態環境部生物多樣性保護專項第一作者簡介:黃雅瓊(I86—),女,福建戴云山國家級自然保護區管理局工程師,從事野生動植物保護研究。E-mail: 249421074@ qq. com。通信作者:呂植桐(1095—),男,中山大學生命科學學院博士研究生,從事兩棲動物系統與進化研究。E-maiUlvzht@fox- mail. com。第1 期黃雅瓊,等:福建省兩棲類新記錄一一粵琴蛙? 85 ?1材料與方法/. 7材料4號琴蛙標本是22)7年6月26日夜晚徒手采集自福建戴云山國家級自然保護區九仙山(115°02, 44. 22〃E、25O/39. 96〃N)。標本安樂死后,剪取大腿腹側肌肉樣品保存于97%乙醇中;標本用5%福爾馬 林溶液固定定型后轉移至79%乙醇溶液中,保存于中山大學生物博物館(SYS)。22形態鑒定與測量使用游標卡尺對4號標本的形態特征進行測量,精確到4. 7 mm。測量標準及形態特征鑒定均依照 Lye等⑴的定義。2 3 DNA提取、PCR擴增和測序使用Tiangex Gexomlc DNA Kit試劑盒提取樣品的基因組DNA(方法參照其說明書、,提取的DNA溶 液保存于-22 C備用。利用PCR擴增線粒體CO I基因片段。擴增引物參照Lye等7〕的dgLCO (5,- GGTCAACAAATCATAAAGAYATYGG-33 和 dgHCO(7, - AAACTTCAGGGTGACCAAARAAYCA - 3'、,反 應條件為97 C預變性4 min,隨后以94 C變性44 s、52 C退火44 s49 C復性1 mix進行35個循環,最后 72 C補充延伸12 min。PCR產物進行雙向測序,所得序列用于系統發育分析。24序列分析及分子系統樹的構建從Ge/Band數據庫下載琴蛙屬部分物種及其近緣類群拇棘蛙屬(Babina Thompson) , 1212物種的相 關CO I基因序列(表2。拇棘蛙屬物種作為構建分子系統樹的外群7〕。所有序列在MEGA 6. 7軟件7〕 中使用Clustal W算法[9]進行序列比對,采用默認參數。比對后的序列在jModeUest v2軟件中基于AIT標 準計算最佳核苷酸替代模型;用MEGA 6. 4軟件的p-distauce距離模型計算各物種間的遺傳距離;使用 RaxmlGU / 3軟件70 ,采用最大似然法(maximum liUeliUooP, ML)構建ML系統發育樹,并進行1002次 bootstrap重復抽樣分析以檢驗系統發育樹各節點置信度。表1所有樣品的采集信息、標本憑證和Ge/Band序列號序號物種粵琴蛙(NiCirana guanndonnensis )粵琴蛙(NiCirana guanndonnensi))粵琴蛙(NiCirana ginndongensiq )粵琴蛙(NiCirara guangdongensi))粵琴蛙(NiCirara gua噸"。!^!!)))粵琴蛙(NiCirara 譽111隅40隅671)))粵琴蛙(NiCirara gua噸"。!^!!)))粵琴蛙(NiCirara 譽111隅40隅671)))粵琴蛙(mfana guu)粵琴蛙(mfana guu)彈琴蛙(mfana anenopleura、彈琴蛙(mfana anenopleura、彈琴蛙(mfana anenopleura、彈琴蛙(mfana adenopleura、彈琴蛙(mfana anenopleura、彈琴蛙(mfana adenopleura、彈琴蛙(mfana anenopleura、彈琴蛙(mfana adenopleura、彈琴蛙(mfana anenopleura、采集地福建戴云山國家級自然保護區福建戴云山國家級自然保護區福建戴云山國家級自然保護區福建戴云山國家級自然保護區廣東石門臺國家級自然保護區標本憑證GenBaud序列號本文本文本文本文1234SYS )064/SYS )0602SYS )060/SYS )0602SYS )05765SYS )05720SYS )06935SYS )025SYS )06196SYS )04071SYS )07359SYS )0592SYS )05940SYS )0412SYS )05901SYS )02725SYS )0709SYS )04451SYS )04025T2433/2000. 43505MN945124678廣東南昆山廣東天井山MN94523MN945171MN945174MN945176MN945173廣東仁化湖南八面山江西九連山91411臺灣臺中福建延平MN9452061213MF807334MF807390福建武夷山福建邵武14MF807376MF807331/161718福建牙梳山浙江景寧MF807366MN945204MN945913江西寧都江西遂川220江西井岡山MF807366KR037625沙巴琴蛙((Cirara caapaensi))越南老街? 86 ?福建林業科技第 48卷續表1序號物種仙琴蛙(idircma daueUina)采集地四川峨眉山標本憑證GenBand序列號212223SYS 年04594SYS 年03741SYS 年07908SYS 年03967SYS 年06310SYS 年057/MF807301海南琴蛙(00 hainasgis)雷山琴蛙5daaga eUOanegW)海南吊羅山貴州雷公山云南江城MF807365MN9452092425林琴蛙((dir ana 10)孟聞琴蛙-(dirana mangven) d南昆山 琴蛙(ldacma nankunegi))MF807356MN945180浙江大盤山廣東南昆山2627MF807370NC022870琉球琴蛙(00 okinavana )滇蛙5dnhla pleuaden)湘琴蛙 5dnaoc xiannico )瑤琴蛙 5dnaoc yaoico )日本沖繩云南高黎貢山湖南大圍山廣西大瑤山-SYS 年03778SYS 年06491SYS 年MF807355MN945139MK895041NC022870NCC228713132琉球拇棘蛙(Babina OoPW d奄美拇棘蛙(Babdia subaspera)日本沖繩--日本鹿兒島4結果與分析5.5形態學鑒定及比較采集自福建戴云山國家級自然保護區的0號琴蛙標本為3雄I雌(圖I、,所有標本的形態量度結果 見表5,其形態符合粵琴蛙的鑒定特征。A1.雄性背面;A2.雄性腹面;B1.雌性背面;B2.雌性腹面圖1福建戴云山國家級自然保護區粵琴蛙體型大,雄性頭體長53. 5 -53.2 mm,雌性頭體長56.6 mm。頭長大于頭寬;吻端鈍圓,突出于下唇, 吻長大于眼徑;吻棱明顯,頰部向內略微凹陷;鼻孔位于吻、眼之間,略近于吻端;眼間具顯著松果體;眼間 第(期黃雅瓊,等:福建省兩棲類新記錄———粵琴蛙? 87 ?距小于鼻間距;鼓膜清晰,小于眼徑,接近眼;不具顳褶;具犁骨棱和犁骨齒;舌末端具缺刻。雄性具一對咽 下外聲囊。前肢較粗壯;指細長,指序為n < 表7福建戴云山國家級自然保護區度量粵琴蛙標本的形態度量標本號I <皿;指末端略膨大成吸盤, 除I指外均具腹側溝;無蹼, I指外 側及n、皿、w指內外側具顯著緣膜; SYS 年060I雄性SYS 年060/雄性SYS 年06015雌性SYS 年06010雄性性別頭體長/ mm55625 2185653. 1565653. 1關節下瘤顯著,各指基部具不明顯的 指基下瘤;掌突3個,橢圓形、大而顯 著。雄性第I指基部背面具單個婚 頭長/mm頭寬/mm吻長/mm鼻間距/mm眼間距/ mm20.213.529 220.313.313.27555557585.48. 58墊,無婚刺。4575. 14554. 15.5455454后肢相對粗壯,后肢前伸貼體時 脛跗關節達鼻孔,跟部重疊;趾細長, 趾序為I < v <皿 ;趾末端 略膨大成長而尖的吸盤,各趾均具顯 眼徑/mm鼓膜徑/mm鼓眼距/mm5544545. 14545 59 41.915.35 313.3手長/mm前臂長/mm13.99. 345 910.2著腹側溝;腳蹼中等大小,蹼式: ii%-7 n i% ~2% 皿I% - 85749 010.445.2959405426.2足長/mm3IV 3%V ~I%V;各趾內外側均具顯 脛長/mm26.626.539 5著緣膜;關節下瘤顯著;內突橢圓形,長約為寬的8倍;外?突不顯著,小而圓。背部皮膚粗糙;后背部及后肢密被錐狀角質刺,頭部及體背具稀疏的角質刺;背側褶發達,自上眼瞼后 緣延伸至腹股溝上方,末端斷斷續續,具稀疏角質刺;雄性體側粗糙,具小疣及稀疏角質刺,具顯著、光滑、略微凸起的肩上腺;雌性體側較光滑,不具角質刺,不具肩上腺。腹面光滑,腿后部及肛周圍具扁平疣。 生活時背面棕紅色,角質刺白色;松果體黃色;背部具斷續的黃色背中線,自松果體延伸至肛部上方;體側上部灰褐色,下部淺黃色,肩上腺米黃色。前肢淺褐色,具黑色條紋;后肢深褐色,具黑色橫紋。頰部 及顳部棕色,鼓膜淺褐色;虹膜上I/3淺褐色、下2/3紅棕色。腹面白色;雄性咽部粉色。2.2分子系統發育關系PCR擴增獲得福建戴云山國家級自然保護區琴蛙線粒體CO I基因序列4條,長度各520 bpo用于 系統發育分析的最佳核苷酸替代模型為GTR + G + S最大似然系統發育樹(圖2)顯示,采自福建戴云山 自然保護區的琴蛙標本與廣東北部、湖南東南部、江西西南部的粵琴蛙樣品聚為支持率較高(99% )的單 系群,而與福建北部、江西中部、浙江南部、臺灣的彈琴蛙樣品親緣關系甚遠。基于p-dUtauce距離模型估 算的遺傳距離(表3)顯示,福建戴云山國家級保護區的琴蛙種群內部遺傳距離為5. 5% ;與廣東北部、湖 南東南部、江西西南部的粵琴蛙種群遺傳距離為5 5%,略大于該種群內部的遺傳距離(9 8% );與彈琴蛙 的遺傳距離為9.2%o分子系統發育分析結果支持福建戴云山國家級自然保護區的琴蛙標本為粵琴蛙, 而非原文獻記錄的彈琴蛙比5-5 O表3基于線粒體CO I基因的琴蛙屬物種間e-nistance遺傳距離物種10. 123450 6 8 9 1/ 11 I I I1.粵琴蛙# ( N. guangdongegi) P2 .粵琴蛙(N. guangdongegis)1. 39 46 56 67 06 7539260593.彈琴蛙(N. 2neepleua)4.沙巴琴蛙(N. cUapaegp )5.仙琴蛙(N. 4aueUina)5 28 69. 2-4 84 354-5 35 20.海南琴蛙(N. 4anla^ggp )6.雷山琴蛙(N.仏^^^))609 0-55 -6310. 38 林琴蛙( N ednd9 8951/. 2859 39. 4 11. 0 -? 88 ?福建林業科技第 48 卷表3(續)物種114.09 . 49 . 56 76 2287838434.976458 68 462679 . 388 38 3914-111213 149.孟聞琴蛙(N. mangveni)10.南昆山琴蛙(N. nankunensis)83868 414. 7-4 98614.910.512 琉球琴蛙(N. okinavanr、12.滇蛙(N. pleuranen、2 .湘琴蛙(N. xiannica、4.98 414. 710.32 54771---13.211713 211411212.512 810.614.610.014.912614.瑤琴蛙(N. yaoda、&02837435. 48 68 110.09.01172 4 -* :#為福建戴云山國家級自然保護區的粵琴蛙樣品。1粵琴蛙(Nidirana guangdongensis)994121IQO|------29 湘琴蛙(Nidirana xiangica)------23 雷山琴蛙(Nidirana leishanensis) 421---30 瑤琴蛙(Nidira/ia yaoica)-P--------20 沙巴琴蛙(Nidirana chapaensis)45俗1--------21 仙琴蛙(Nidirana daunchina)--------22 海南琴蛙(Nidirana hainanensis) --------24 林琴蛙(Nidirana lini) £91630.0579,95100-11彈琴蛙(Nidirana adenopleura)41654.6-----27 琉球琴蛙(Nidirana okinavana) -25 孟聞琴蛙(Nidirana mangveni) -------26 南昆山琴蛙(Nidirana nankunensis) 57100---------------------28 ^^.(Nidirana pleuraden) 32 奄美拇棘蛙(Babina subaspera) —31 琉球拇棘蛙(Babina holsti)分支末端數字為樣品序號,節點上的數字為最大似然法自舉值圖9基于線粒體CO I基因的琴蛙屬最大似然系統發育樹3討論粵琴蛙為2222年新發表的兩棲動物新物種,在此之前已知的分布范圍為廣東北部、湖南東南部、江西 南部的南嶺山脈中段及羅霄山脈南部⑷。本次在福建中部的戴云山國家級自然保護區報道該物種的新 分布,是福建省兩棲類新記錄。這一發現,將粵琴蛙的分布區域向東擴展至福建中部(圖3)。此前,福建 北部、江西中部的琴蛙種群已被確認為彈琴蛙74]。因此,可以推測從廣東北部沿南嶺山脈、蓮花山脈往 東的閩南、粵東、贛南等地此前記錄的彈琴蛙種群也應該是粵琴蛙。在這些地區需要進行全面和詳細的調 查,以了解這一新物種確切的分布范圍及種群狀況。戴云山國家級自然保護區位于福建中部的戴云山脈,其北部為福建最大河流閩江。目前已經報道確 認過的福建北部的彈琴蛙種群74],均分布于閩江以北;而此次報道的粵琴蛙種群分布于閩江以南的戴云 山。這也表明,閩江可能是彈琴蛙和粵琴蛙2個物種在福建省內分布區的分界線。第1 期黃雅瓊,等:福建省兩棲類新記錄一一粵琴蛙? 86 ?8120O江O°o24O!叫入WNVi GStaWMiOT?L ;一星形為福建戴云山國家級自然保護區;紅色圓形為此前報道的粵琴蛙分布點;黑色圓形為此前報道 的彈琴蛙分布點;右上方小圖為福建戴云山國家級自然保護區粵琴蛙生境。圖3粵琴蛙和彈琴蛙分布范圍及福建戴云山國家級自然保護區粵琴蛙生境* :感謝福建戴云山國家級自然保護區管理局賴鐘俊、陳文偉、徐榮地、陳亞婷,中山大學王英永、王健協助完成室內實 驗、野外調查工作,并對本論文提供了寶貴建議和幫助。參考文獻:[1 ] Lye ZT,Doi KY,Li Y,et al. 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