總花色苷含量測定

2024年1月4日發(作者：訂婚女方致辭簡短)

總花色苷含量?測定—分光光度法

1、綜合國內外資?料,主要有以下幾?種計算吸光值?A 的方法[1]:

(1) 當葉綠素是該?樣品中主要存?在的干擾色素?時,需消除葉綠素?吸收含量的影?響;此時,計算公式為: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620)

(2) 含有其它干擾?物質時花色苷?總量的測定:

a) 直接法:在新鮮的植物?提取物中,因為很少含有?在花色苷的最?大吸收區發生?吸收的干擾物?質,花色苷總量可?以直接由可見?區最大吸收波?長處的吸光度?來測定。

計算公式為: A = Amax

直接法吸收光?譜測定:用××分光光度計于?250 - 800nm 下全波長掃描?,得到花色苷在?0.1 % 鹽酸—80 % 乙醇中的可見?光區最大吸收?波長,在此最大波長?下測定各樣品?的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或儲藏?過程中,會產生褐色降?解物,這些降解物和?花色苷具有相?同的能量吸收?范圍。這類花色苷總?量的測定,通常用pH示?差法[8] 。

計算公式為: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光?譜測定:先確定合適的?稀釋因子,使樣品在λm?ax下的吸光?度在分光光度?計的線性范圍?內;然后制備兩個?樣品稀釋液,其中一個用氯?化鉀緩沖液(0.025M,pH1.0) 稀釋,另一個用醋酸?鈉緩沖液(0.4M,pH4.5) 稀釋,將稀釋液平衡?15min

后,用蒸餾水做空?白,分別測定兩種?樣品稀釋液在?λmax和7?00nm處的?吸光值A。

2、花色苷總含量?的測定[2]：通過波長掃描?,確定××花色苷在可見?區的最大吸收?波長為λma?x。利用花色苷的?結構特性,當pH為1.0時在λma?x處有最大吸?收峰,而當pH為4?.5時,花色苷轉變為?無色查爾酮形?式,在λmax處?無吸收峰,用示差法計算?溶液中總花色?苷含量。

計算公式為: C (mg/ g) = (A0 - A1) ×V ×n ×M / (ε×m )

式中: A0 、A1 —分別為pH1?.0、pH4.5時花色苷在?λmax處的?吸光值

V —提取液總體積?(mL )

n —稀釋倍數

M —cy-3-glu (矢車菊- 3-葡萄糖苷)的相對分子質?量(449.4)

ε—cy-3-glu的消光?系數( 29600)

m —樣品質量( g)

3、花色苷含量T?Acy的計算?公式為(以天竺葵色素?-3-葡萄糖苷計)[3] :

TAcy (mg/ hg) =(A ×433 ×10 ×V）÷(22 400 ×m)×100

A = (OD500n?m - OD700n?m) pH1.0 - (OD500n?m -OD700n?m) pH4.5

式中: V — 提取液的總體?積(mL)

m — 取樣量(g)

22 400 —天竺葵色素-3-葡萄糖苷的摩?爾消光系數

433 — 天竺葵色素-3-葡萄糖苷的摩?爾分子量。

4、花色苷含量測?定[4]

樣品處理: 將各品種的干?燥樣品粉碎(40目)后,準確稱取0.5 g用10 mL 65%的酸性乙醇提?取24 h,提取3次,然后將3次提?取液混合抽濾?,真空旋轉揮發?回收乙醇,用蒸餾水定容?到100 mL,搖勻,靜止備用。

測定方法:含量測定用p?H示差法,按照下面公式?計算,測定3 次取其平均值?。

C(mg/L ) = (OD ×M ×DF ×1000)/ α×1

式中: OD 為吸光度, DF為稀釋倍?數,M 為分子量,α=26900。

花色苷[5]：將提取液稀釋?合適倍數，用1cm 比色杯測其吸?光值，參照Fule?ki[6]的計算方法轉?換成總花色苷?濃度，公式如下：

C/(mg/mL)=(A×MW × DF × 1000)/(ε×1)

式中：A為吸光值；MW 為分子量（以矢車菊素-3-葡萄糖苷為標?準[7]，449.4）；

DF為稀釋倍?數；ε為消光系數?，26900 -1。

參考文獻

[1] 霍琳琳,蘇平,呂英華, 分光光度法測?定桑葚總花色?苷含量的研究?[J]. 釀酒, 2005 年7月,第32卷第4?期.

[2] 李穎暢,孟憲軍,張琦,于娜，藍莓果主要物?質含量及處理?方式對其花色?苷的影響[J]. 食品工業科技?, Vol. 29, N o. 05, 2008.

[3] 盛小娜,王璋, 不同預處理方?式對速凍草莓?花色苷含量的?影響[J]. 冷飲與速凍食?品工業, 2006年1?2月第12 卷第4期.

[4] 王振江,肖更生，廖森泰等，不同品種桑椹?的抗氧化作用?與其花色苷含?量的相關性研?究[J]. 蠶業科學， 2006，32(3).

[5] 呂英華，蘇平，那宇，李輝, 桑椹色素體外?抗氧化能力研?究[J]. 浙江大學學報?(農業與生命科?學版) 33(1)：102～107，200

[6] Fuleki? T， Franci?s F J． Quanti?tative? method?s for anthoc?yanins?． 1． Extrac?tion and

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[7] Suh H J，Noh D 0，Kang C S，eta1．Therma?l kineti?cs of color degrad?ation of mulber?ry

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