硫酸銨沉淀蛋白質方法

2024年3月15日發(作者：護士個人述職報告)

硫酸銨沉淀蛋白質方法

硫酸銨沉淀蛋白質方法是一種常用的蛋白質純化方

法，通常被用于分離和濃縮蛋白質。本文將從硫酸銨沉淀

蛋白質的原理、步驟、優缺點及注意事項等方面進行介

紹。

一、硫酸銨沉淀蛋白質原理

硫酸銨沉淀蛋白質法是根據不同蛋白質在一定鹽度和

pH 值下的溶解度差異而進行的蛋白質分離、富集和純化方

法。在適宜的濃度下，硫酸銨可使一些蛋白質（多為大分

子蛋白質）發生酸性沉淀，而不影響小分子的低分子量蛋

白質。這是因為硫酸銨分子從溶液與蛋白質結合，降低蛋

白質的有效離子濃度，使蛋白質失去溶解度而發生沉淀。

二、硫酸銨沉淀蛋白質步驟

硫酸銨沉淀蛋白質的步驟大致分為預處理、沉淀和洗

滌、脫鹽和保存等步驟。

1. 預處理

將待純化的樣品通過超聲波或攪拌等方法打散，去除

雜質，并加入適量的緩沖液進行 pH 值的調節。調節 pH

值的考慮因素包括離子強度、鹽度、親水性等。

2. 沉淀和洗滌

加入硫酸銨至攪拌后樣品中，反復攪拌，將待純化的

蛋白質沉淀出來。這其中的具體步驟可在下文中詳細介

紹。

待沉淀后進行洗滌處理，以去除雜質和溶質，獲得較

純的蛋白質。

3. 脫鹽和保存

向蛋白質樣品中加入脫鹽液，進行脫鹽，使蛋白質完

全溶解。將蛋白質溶液過濾并保存。

三、硫酸銨沉淀蛋白質優缺點

優點：

1. 適用性廣，大多數蛋白質都可以通過硫酸銨沉淀方

法來純化。

2. 操作簡單，不需要高級技術和設備。

3. 此方法不會破壞蛋白質的天然結構和功能性。

缺點：

1. 蛋白質沉淀不純，沉淀物中可能含有許多不同的蛋

白質，同時有許多不溶性物質，需要進行再次分離。

2. 操作難度在某些情況下會受到蛋白質和樣品特性的

限制。

四、硫酸銨沉淀蛋白質注意事項

1. 操作中需嚴格控制緩沖液的 pH 值，保證硫酸銨完

全溶解。

2. 反復攪拌時需小心操作，以免造成樣品的脫失。

3. 沉淀和洗滌處理時需要保持低溫，以孕育樣品質

量。

4. 注意沉淀物的分離和收集，防止樣品中的不溶性溶

質附著在上面。

5. 注意保存樣品至干燥處。

總之，硫酸銨沉淀法作為一種常用的蛋白質純化方

法，可以廣泛應用于生物化學、分子生物學等領域，并且

還可以與其他分離和分析方法協同運用，提高分離純化效

果。