藥分鹽酸普魯卡因胺、對氨基水楊酸
鹽酸普魯卡因，對乙酰氨基酚，鹽酸丁卡因的鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測定
0924 第三組徐一三冷濤
2012092412 2012092409 芳胺類藥物主要分為兩類：一類為芳伯氨基未被取代，而在芳環(huán)對位有取代的對氨基苯甲酸酯類。另一類則為芳伯氨基被酰化，并在芳環(huán)對位有取代的酰胺類藥物。
鹽酸普魯卡因，鹽酸丁卡因?qū)Π被郊姿狨ヮ愃幬?/span>
①芳伯氨基特性顯重氮化－偶合反應(yīng)；與芳醛縮合反應(yīng)；易氧化變色等。
②水解特性含酯鍵（或酰胺鍵）易水解。其水解的快慢受光線、熱或堿性條件的影
響。水解產(chǎn)物主要為對氨基苯甲酸（PABA）。
③弱堿性除苯佐卡因外，因其脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子，故具有弱堿性。因此能與生
物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)；但在水溶液中不能用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定，在非水溶
劑中能滴定。
對乙酰氨基酚酰胺類藥物
①芳酰氨基在酸性溶液中易水解為芳伯氨基，并顯芳伯氨基特性反應(yīng)。
②酚羥基特性對乙酰氨基酚(FeCl3)。
此外，本類藥物的紫外吸收和紅外吸收光譜特征均可供分析用。
一．鹽酸普魯卡因
（一）鹽酸普魯卡因的鑒別《中國藥典》規(guī)定鑒別鹽酸普魯卡因的方法：水解反應(yīng)、 IR 法、氯化物的反應(yīng)、芳香第一胺反應(yīng)。
1.水解反應(yīng)：
原理：鹽酸普魯卡因遇氫氧化鈉試液即析出白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗铮^續(xù)加熱，產(chǎn)生
的蒸汽能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色，加熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。沉淀可溶于過量的鹽酸。
方法：取供試品約0.1g，加水2ml溶解后，加10%氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變成油狀物，繼續(xù)加熱，發(fā)生的蒸氣使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；加熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀；沉淀可溶于過量的鹽酸。
2．氯化物的反應(yīng)：按《中國藥典》附錄“一般鑒別試驗(yàn)”中“氯化物”項(xiàng)下的沉淀反應(yīng)和氧化還原反應(yīng)進(jìn)行鑒別。
(1)沉淀反應(yīng)取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。
(2)氧化還原反應(yīng)取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸潤濕，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使?jié)櫇竦牡饣浀矸墼嚰堬@藍(lán)色。
沉淀反應(yīng)：硝酸銀試液、硝酸酸性，agcl白色凝乳狀沉淀。
3. 芳香第一胺反應(yīng)
又稱為重氮化一偶合反應(yīng)，用于鑒別芳香第一胺。收載于《中國藥典》附錄“一般鑒別試驗(yàn)”項(xiàng)下。鹽酸普魯卡因具有芳伯氨基，在鹽酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉作用，生成重氮鹽，重
氮化鹽進(jìn)一步與β-萘酚偶合，生成紅色偶氮合物。
所用試劑：稀鹽酸、亞硝酸鈉溶液、β—萘酚試液。
現(xiàn)象：生成橙色或猩紅色的沉淀。
方法：取本品約50mg,加稀鹽酸1ml，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L，亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃到猩紅色沉淀。
（二）鹽酸普魯卡因的雜質(zhì)檢查
鹽酸普魯卡因的雜質(zhì)檢查項(xiàng)目有：酸度、溶液的澄清度、干燥失重、熾灼殘?jiān)㈣F鹽及重金屬和對氨基苯甲酸。在鹽酸普魯卡因的生產(chǎn)和貯藏中都有可
能引入對氨基苯甲酸。《中國藥典》2010年版加強(qiáng)對藥物中雜質(zhì)的控制，與2005年版相比，對氨基苯甲酸是鹽酸普魯卡因原料藥質(zhì)量控制中新增加的檢查項(xiàng)目。采用反相液相色
譜檢查。方法如下：
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.1%庚烷磺酸鈉的0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（68:32）為流動相；檢測波長279nm。理論板數(shù)按對氨基苯甲酸峰計(jì)算不低于2000，鹽酸普魯卡因峰和對氨基苯甲酸峰的分離度應(yīng)大于2.0。
系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液：取供試品溶液1ml與對照品溶液9ml混合均勻，既得。
測定法：取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.2mg的溶液，作為供試品溶液；另取對氨基苯甲酸對照品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中含1μg的溶液，作為對照品溶液。取對照品溶液10μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分峰高約為滿量程的20%。精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液包譜圖中如有與對氨基苯甲酸峰保留時間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過0.5%。
（三）鹽酸普魯卡因原料藥的含量測定——《中國藥典》采用亞硝酸鈉滴定法，用永停法指示終點(diǎn)。
方法：取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法，在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液
(0.1mol/L)滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于27.28mg的鹽酸普魯卡因。
滴定原理同芳香第一胺的鑒別項(xiàng)下。由重氮化反應(yīng)可知，1mol的亞硝酸鈉相當(dāng)于1mol 的鹽酸普魯卡因，鹽酸普魯卡因的分子量為272.77，所以滴定度T=0.1×272.77=27.28(mg)。
二．對乙酰氨基酚
（一）鑒別
1．與三氯化鐵試液的反應(yīng)：顯藍(lán)紫色
2.水解后重氮化一偶合反應(yīng)：對乙酰氨基酚在稀鹽酸酸性溶液中，加熱水解后產(chǎn)生
具有芳伯氨基的對氨基酚，與亞硝酸鈉試液發(fā)生重氮化反應(yīng)，其重氮鹽與堿性β-萘酚試液偶合顯紅色。
（二）對乙酰氨基酚的雜質(zhì)檢查：需檢查的特殊雜質(zhì)：有關(guān)物質(zhì)和對氨基酚。
1.有關(guān)物質(zhì)：以對氯乙酰苯胺為對照，用薄層色譜法對照品比較法控制有關(guān)物質(zhì)對氨基酚、
對氯乙酰苯胺、偶氮苯、苯醌等中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物。
2. 對氨基酚的檢查：為中間體、水解產(chǎn)物
原理：對氨基酚為芳香第一胺，能與堿性亞硝基鐵氰化鈉試液生成藍(lán)色配位化合物。
注意：對氨基酚毒性較大，易被氧化變?yōu)轷接猩衔?/span>
方法：與對氨基酚對照品同法制成的對照液比色法。
【檢查】對氨基酚及其他雜質(zhì)取本品適量，精密稱定，加溶劑[甲醇－水(4：6)]制成每1ml 中約含對乙酰氨基酚20mg的溶液，作為供試品溶液(臨用新制)；另取對氨基酚和對乙酰氨基酚對照品適量，精密稱定，加上述溶劑制成每1ml中約含對氨基酚1μg和對乙酰氨基酚20μg的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（附錄VD）測定。用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉8.95g，磷酸二氫鈉3.9g，加水溶解至1000ml，
加入10%四丁基氫氧化銨溶液12ml）-甲醇（90：10）為流動相；檢測波長為245nm；柱溫為40℃；理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，對氨基酚與對乙酰氨基酚峰之間的分離度應(yīng)符合要求。取對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使對氨基酚色譜峰的峰高約為滿量程的10%，再精密量取供試品溶液與對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時間的4倍；按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，含對氨基酚不得過0.005%，其他雜質(zhì)相對于對照品溶液色譜圖中對乙酰氨基酚峰面積計(jì)算，單個未知雜質(zhì)不得過0.1%，雜質(zhì)總量不得過0.5%。（三）含量測定
對乙酰氨基酚在0.4% 氫氧化鈉溶液中，max =257 nm ，《中國藥典》采用紫外分光光度法（吸收系數(shù)法）測定對乙酰氨基酚含量。
取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10ml，加水至刻度，搖勻，照分光光度法，在257nm的波長處測定吸收度，按C8H9N02的吸收系數(shù)（E1％1cm）為715計(jì)算含量。
若樣品稱量為m（g），測得的吸收度為A，則含量百分率的計(jì)算式為
計(jì)算公式：A／715 × 250／5 × 1／m×100％
三．鹽酸丁卡因
鑒別: （1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸按溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。（2）取本品約40mg，加水2ml溶解后，加硝酸3ml，即顯黃色。（3）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集314圖）一致。（4）本品的水溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。
檢查: 酸度取本品0.50g，加水5ml溶解后，加溴酚藍(lán)指示液1滴，如顯淡黃色，加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L）1滴，應(yīng)變?yōu)榈{(lán)色。溶液的澄清度取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清；如顯渾濁，與1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液（附錄ⅨB）比較，不得更濃。易炭化物取本品0.50g，依法檢查（附錄ⅧO），與橙黃色3號標(biāo)準(zhǔn)比色液（附錄ⅨA第一法）比較，不得更深。有關(guān)物質(zhì)取本品，加水制成每1ml中含0.10g的溶液，作為供試品溶液。另取對氨基苯甲酸對照品適量，精密稱定，加水制成每1ml中含0.20mg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，
以乙醚-正己烷-冰醋酸（80:16 :4）為展開劑，展開，晾干，于105℃干燥10-15分鐘后，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過1.0%（附錄ⅧL）。熾灼殘?jiān)坏眠^0.1%（附錄ⅧN）。
