2024年1月4日發(fā)(作者:樊增祥)

關于離心機及rpm單位與g(RCF)單位的換算
離心技術在生物科學,特別是在生物化學和分子生物學研究領域,已得到十分廣泛的應用,每個生物化學和分子生物學實驗室都要裝備多種型式的離心機。離心技術主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。
基本原理:
當一個粒子(生物大分子或細胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時,此離心力“F”由下式定義,即:
F = m&S226;a = m&S226;ω2 r
a — 粒子旋轉(zhuǎn)的加速度, m — 沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角速度, r—粒子的旋轉(zhuǎn)半徑( cm )。
通常離心力常用地球引力的倍數(shù)來表示,因而稱為相對離心力 “ RCF ”。或者用數(shù)字乘“g”來表示,例如25000×g,則表示相對離心力為25000。相對離心力是指在離心場中,作用于顆粒的離心力相當于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度“g”
(980cm/c2),此時“RCF”相對離心力可用下式計算:
∴ RCF = 1.119×10-5×(rpm)2 r
( rpm — revolutions per minute每分鐘轉(zhuǎn)數(shù),r/min )
由上式可見,只要給出旋轉(zhuǎn)半徑r,則RCF和rpm之間可以相互換算。但是由于轉(zhuǎn)頭的形狀及結(jié)構的差異,使每臺離心機的離心管,從管口至管底的各點與旋轉(zhuǎn)軸之間的距離是不一樣的,所以在計算是規(guī)定旋轉(zhuǎn)半徑均用平均半徑“ra v”代替:
ra v=( r min+rmax) / 2
一般情況下,低速離心時常以轉(zhuǎn)速“rpm”來表示,高速離心時則以“g” 表示。計算顆粒的相對離心力時,應注意離心管與旋轉(zhuǎn)軸中心的距離“r”不同,即沉降顆粒在離心管中所處位置不同,則所受離心力也不同。因此在報告超離心條件時,通常總是用地心引力的倍數(shù)“×g”代替每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)“rpm”,因為它可以真實地反映顆粒在離心管內(nèi)不同位置的離心力及其動態(tài)變化。科技文獻中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其平均值(RCFa v),即離心管中點的離心力。
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單位rpm與g的換算:
離心機可分為工業(yè)用離心機和實驗用離心機。實驗用離心機又分為制備性離心機和分析性離心機,制備性離心機主要用于分離各種生物材料,每次分離的樣品容量比較大,分析性離心機一般都帶有光學系統(tǒng),主要用于研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),依據(jù)待測物質(zhì)在離心場中的行為(用離心機中的光學系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測),能推斷物質(zhì)的純度、形狀和分子量等。分析性離心機都是超速離心機。
制備性離心機可分為三類:
⑴ 普通離心機:最大轉(zhuǎn)速6000 rpm左右,最大相對離心力近6000×g,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能嚴格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),于室溫下操作,用于收集易沉降的大顆粒物質(zhì),如紅血球、酵母細胞等。這種離心機多用交流整流子電動機驅(qū)動,電機的碳刷易磨損,轉(zhuǎn)速是用電壓調(diào)壓器調(diào)節(jié),起動電流大,速度升降不均勻,一般轉(zhuǎn)頭是置于一個硬質(zhì)鋼軸上,因此精確地平衡離心管及內(nèi)容物就極為重要,否則會損壞離心機。
⑵ 高速冷凍離心機:最大轉(zhuǎn)速為20000~25000rpm(r/min),最大相對離心力為89000×g,最大容量可達3升,分離形式也是固液沉降分離,轉(zhuǎn)頭配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭和大容量連續(xù)流動式轉(zhuǎn)頭、一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0~40℃,轉(zhuǎn)速、溫度和時間都可以嚴格準確地控制,并有指針或數(shù)字顯示,通常用于微生物菌體、細胞碎片、大細胞器、硫銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細胞器(如核蛋白體)或單個分子。
⑶ 超速離心機:轉(zhuǎn)速可達50000~80000 rpm,相對離心力最大可達510000×g,最著名的生產(chǎn)廠商有美國的貝克曼公司和日本的日立公司等,離心容量由幾十毫升至2升,分離的形式是差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,離心管平衡允許的誤差要小于0.1克。超速離心機的出現(xiàn),使生物科學的研究領域有了新的擴展,它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細胞器得到分級分離,還可以分離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。
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