細(xì)菌學(xué)檢驗中痰培養(yǎng)的檢測方法及臨床意義

2024年2月21日發(fā)(作者：病樹前頭)

細(xì)菌學(xué)檢驗中痰培養(yǎng)的檢測方法及臨床意義

摘要】目的：探討細(xì)菌學(xué)檢測中痰培養(yǎng)的方法及臨床意義。方法：選取2015年3月—2016年10月收治的呼吸感染患者36例痰直接涂片和常規(guī)培養(yǎng)方法及臨床意義進行分析。結(jié)果：呼吸感染患者36例痰標(biāo)本檢出菌株數(shù)31株，病原菌分離陽性率86.11%。結(jié)論：按照正確、標(biāo)準(zhǔn)的操作方式采集標(biāo)本可提高痰標(biāo)本中病原菌的陽性檢出率，臨床檢驗痰標(biāo)本主要是采用病原菌進行檢查，而使用其方法進行檢查結(jié)果有較高的效果，但檢查結(jié)果也受很多因素的影響以實現(xiàn)診斷治療的效果。

【關(guān)鍵詞】細(xì)菌學(xué)檢驗；痰培養(yǎng)；檢測方法；臨床意義

【中圖分類號】R446 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】1007-8231（2017）05-0088-01

培養(yǎng)的目的在于從臨床標(biāo)本中分離出致病真菌，獲得純培養(yǎng)。當(dāng)咳嗽、咯痰、痰量增多、痰帶膿或膿血，或痰有惡臭，常提示支氣管和肺部感染，需要進行病原學(xué)檢驗和藥敏試驗以指導(dǎo)病因?qū)W治療。通常做需氧培養(yǎng)，根據(jù)需要可做厭氧培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)或結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)[1]。厭氧培養(yǎng)通常需要吸引支氣管深部的分泌物，隔絕空氣并避免口腔和咽喉的正常菌群污染。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年3月—2016年10月收治的呼吸感染患者36例，其中男21例，女15例，年齡30～80歲，平均年齡55.2±3.5歲。

1.2 標(biāo)本采取

取早晨第一口氣管深部痰。囑患者除去義齒，用清水(溫開白水)漱口數(shù)次，以減少口腔正常菌群污染，然后咯出氣管深部的痰置入無菌有蓋痰盒內(nèi)，避免混入口腔和鼻咽腔分泌物，在2小時內(nèi)送檢。流感嗜血桿菌易死亡，應(yīng)保溫并在半小時內(nèi)送檢。標(biāo)本容器外不得被痰液污染，因可造成對標(biāo)本轉(zhuǎn)送和實驗室人員的危害。不合格的標(biāo)本在說明原因后可以拒收。對少痰或痰液不易咯出者，可用5%～10% NaCl溶液霧化吸入20～30分鐘誘導(dǎo)排痰；經(jīng)口腔咯出或支氣管鏡吸引的分泌物，通常有上呼吸道正常菌群污染，不適用于嗜肺軍團菌的培養(yǎng)，因污染菌大量快速繁殖可抑制軍團菌生長[2]。用帶刷子的支氣管導(dǎo)管(TPC)或帶鞘的痰刷子采取支氣管分泌物，可有效避免上呼吸道細(xì)菌污染。將刷頭剪下置入約1ml液體培養(yǎng)基中震蕩洗脫分泌物，可用于需氧和厭氧培養(yǎng)，或適用于軍團菌或真菌培養(yǎng)；但厭氧培養(yǎng)不能接觸空氣。

1.3 檢驗方法

1.3.1痰培養(yǎng)標(biāo)本的前處理 于痰標(biāo)本中加入適量無菌生理鹽水，劇烈振蕩5～10s后，將沉淀于管底的濃痰小片取出，置于另一試管中，同法再處理2次，可洗去痰中的正常菌群。然后向洗滌過的痰液中加入等量pH 7.6的1%胰酶溶液，放置37℃培養(yǎng)90min，使痰液勻質(zhì)化后備用。

1.3.2直接涂片 取膿和膿血部分薄涂片3～4張，做單染色、革蘭染色、抗酸或熒光染色鏡檢。如發(fā)現(xiàn)革蘭陽性刀尖形雙球菌或同時莢膜染色陽性，對肺炎球菌肺炎的診斷是有力的支持；檢驗結(jié)果作初步報告。

1.3.3普通分離培養(yǎng) 痰標(biāo)本應(yīng)在無菌鹽水中洗滌后取中間部分接種血瓊脂平板和巧克力色平板；流感桿菌分離培養(yǎng)接種兔血平板。根據(jù)臨床需要選擇厭氧培養(yǎng)、嗜肺軍團菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)或分枝桿菌培養(yǎng)[3]。肺膿腫、肺壞疽應(yīng)同時作需

氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)。懷疑真菌感染應(yīng)作10% KOH直接涂片鏡檢和真菌培養(yǎng)。懷疑結(jié)核菌感染應(yīng)作直接涂片抗酸或熒光染色鏡檢和結(jié)核菌培養(yǎng)。

1.4 回報時間

直接涂片結(jié)果可當(dāng)時(電話)或當(dāng)日(書面)報告；普通培養(yǎng)初步報告通常在24小時，分離鑒定報告可于48～72小時作出。

2.結(jié)果

正常痰可有上呼吸道菌群，氣管吸引物或支氣管鏡吸引物通常易被口腔菌群污染。雙套管經(jīng)氣管的支氣管吸引物，正常無細(xì)菌生長。呼吸感染患者36例痰標(biāo)本檢出菌株數(shù)31株，病原菌分離陽性率86.11%。其中真菌分布最高，占42.96%，其次為革蘭氏陽性球菌，占30.28%。

3.討論

用于肺和支氣管感染的病原體分離和鑒定。適宜使用的痰標(biāo)本應(yīng)含有較多的中性粒細(xì)胞，無或有少量扁平上皮細(xì)胞；后者是唾液污染的標(biāo)志。有較多鱗狀上皮的痰不能用作細(xì)菌培養(yǎng)，因為被污染的痰培養(yǎng)結(jié)果有時不僅不能作出正確評價，甚至還可起誤導(dǎo)作用造成嚴(yán)重危害[4]。痰中分離的細(xì)菌無論是否為上呼吸道常在菌，實驗室都要給予報告。在免疫損害時，上呼吸道常在菌群可造成吸入性感染。

痰普通培養(yǎng)可發(fā)現(xiàn)的病原菌主要有：金黃葡萄球菌、流感桿菌、鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎球菌、副流感桿菌、綠膿桿菌、克雷伯桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、卡他球菌等。而百日咳桿菌、白喉桿菌、嗜肺軍團菌、結(jié)核分枝桿菌、脆弱類桿菌以及其他嗜血菌屬和奈瑟菌屬細(xì)菌等，常規(guī)培養(yǎng)不能分離出；當(dāng)臨床懷疑時，需要特別申請和專門留取標(biāo)本，用特殊方法證明。從痰液中檢出嗜肺軍團菌、結(jié)核分枝桿菌、放線菌及奴卡菌，具有重要臨床意義，是確定診斷和治療的依據(jù)。軍團菌病的病原體是嗜肺軍團菌，該病主要累及肺臟，也可發(fā)生全身多器官的嚴(yán)重?fù)p害。嗜肺軍團菌可引起暴發(fā)流行、散在流行和醫(yī)院內(nèi)持久流行，從痰液中分離到該菌對軍團菌病具有確診意義。肺結(jié)核在結(jié)核病中最為多見，由結(jié)核分枝桿菌引起。痰液結(jié)核菌檢查是確診肺結(jié)核最特異的方法，涂片抗酸染色鏡檢快速簡便，培養(yǎng)則敏感性和特異性高。大約1/3痰培養(yǎng)陽性的病人，在初次痰涂片中可找到抗酸桿菌，若連續(xù)檢查幾天，涂片陽性率可至2/3。因此有條件時涂片和培養(yǎng)均應(yīng)進行。

【參考文獻】

[1]侍效春，劉正印，徐英春，等.痰培養(yǎng)絲狀真菌陽性的臨床意義[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2010，90(4):245-248.

[2]黃萍.簡析痰標(biāo)本在細(xì)菌學(xué)檢驗中的運用效果[J].現(xiàn)代養(yǎng)生，2015(4):279-279.

[3]劉奇.痰標(biāo)本在細(xì)菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師:醫(yī)學(xué)專業(yè)，2012，14(31):234-234.

[4]王成林.痰標(biāo)本在細(xì)菌學(xué)檢驗中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2013，29(23):3612-3613.