鱉甲的鑒別研究

中藥鱉甲品種鑒別的研究

中國現代應用藥學 1999年第4期第16卷 中藥與天然藥物

作者：徐玲玲 胡蓓莉

單位：徐玲玲（上海 200437 上海中醫藥大學附屬岳陽醫院）；胡蓓莉（上海 200332 上海中醫藥大學）

關鍵詞：鱉甲；生藥形態鑒別；蛋白電泳

摘要 目的：為了探索不同種源中藥鱉甲的鑒別方法。方法：應用生藥形態學和蛋白電泳實驗方法對不同種源鱉

甲進行鑒別。結果：5種不同種源的鱉甲在生藥形態學上有明顯的區別。蛋白電泳實驗表明不同種源的鱉甲具有不同的

特征，其結果與形態學上區別相吻合。結論：生藥形態學結合蛋白電泳實驗可作為鑒別鱉甲品種的鑒定方法。

Identification study of different breed of turtle(A Chime traditional medicine)

Xu Lingling(Xu LL),Hu Peili(Hu PL)(Yue Yang Hospital,Shanghai College of Traditional Chine

Medicine,Shanghai 200043)

ABSTRACT OBJECTIVE：To study the differential method of different breed of :Pharmacognosy

morphology and electrophoresis were ud to identify different breed of S:There were

significant morphological difference between five breed of ophoresis of protein indicated that

different breed of turtle had different result was similar to the morphological

SION:Pharmacognosy morphology,as well as the electrophoresis of protein,can be ud to

identify differcnt breed of turtle.

KEY WORDS turtle,pharmacognosy morphology identification,electrophoresis of protein

鱉甲為常用中藥之一，除臨床的配方使用外，尚在人參鱉甲煎丸、參桂鹿茸丸等數種中成藥中應用。其動物來源：

［1］

中國藥典95版明確規定為鱉科動物鱉Trionyx sinensis Witgmam的背甲。但商品鱉甲中帶有非中國藥典規定的品

種鱉的背甲混雜其中。為保證藥品質量，我們對商品鱉甲中混入的非中國藥典品種鱉背甲進行收集，共收集到非中華

鱉的背甲樣品10份。經鑒定分屬4種，本文對上述樣品進行生藥學研究和蛋白電泳實驗，現總結如下。

1 實驗材料

1.1 藥品及試劑

丙烯酰胺(Acr)(上海生化所西巴斯生物技術開發公司)；甲叉雙丙烯酰胺(Bis)(Flukachenic AG CH-9470 Buchs)；

三羥甲基氨基甲烷(Tris)(上海復旦大學科教器材公司)；過硫酸銨(AP)(華美生物公司)；四甲基乙二胺(TEMED)(Pormga

Corporration 608-274-4330 malison WL 53711-5399 USA)；甘氨酸、溴酚藍、鹽酸、無水乙醇、乙酸均為分析純。

考馬斯亮藍R250，上海試劑站，Fluka進口分裝。

1.2 儀器

DY-A電泳儀(上海生化所西巴斯生物技術開發公司)；V16-夾心式垂直電泳槽(上海精益有機玻璃制品廠)。80-1離

心機(上海手術器械廠)。

1.3 實驗樣品

中華鱉甲：鱉科動物鱉Trionyx sinensis Wiegmann的背甲共10份樣品。

緣板鱉甲：鱉科動物緣板鱉Lismys punctata Scutata(sohoepff)的背甲共4份。

黿甲：鱉科動物黿Pelochlys bibroni(owen)的背甲，共1份樣品。

軟鱉甲：鱉科動物軟鱉甲Trionyx catilaginens(Bod-daert)的背甲，共2份樣品。

宏鱉甲：鱉科動物宏鱉Trionyx hurum Gray共3份樣品。

上述材料均由市場商品鱉背甲收購時揀出，經上海自然博物館馬積藩教授鑒定。

2 實驗方法

2.1 生藥形態鑒別

根據中國藥典95版附錄記載的藥材性狀鑒別規定要求進行生藥形態鑒別。

2.2 蛋白電泳(PAGE)法鑒別

2.2.1 樣品液的制備：將上述樣品分別打成細粉，以3種不同的方式處理樣品：①緩沖液提取：各取鱉甲粉1g

加3ml稀釋2倍的電極緩沖液；電極緩沖液:Tris 6g甘氨酸28.8 g,加水至1 000 ml,pH為8.3。②酸性蛋白液提取：

各取鱉甲粉1g加3ml酸性蛋白提取液；酸性蛋白提取液：檸檬酸80mmol/L,NaHPO 32mmol/L,抗壞血酸液5mmol/L,巰

24

基乙醇10mmol/L pH為2.8。③堿性蛋白提取液：各取鱉甲粉1g加3ml堿性蛋白提取液；堿性蛋白提取液:Tris HCl

0.1mol/L,蔗糖0.5mol/L,抗壞血酸0.1mol/L巰基乙醇10mmol/L,pH為8.0。以上各樣品，分別置乳缽中研磨成勻漿，

倒入5ml離心管中超聲提取30min,離心15min(3 000 r/min)，取上清液與40%蔗糖溶液等比例混勻，置冰箱中備用。

2.2.2 電泳操作：本實驗采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法(Polyacrylamide-gelectrep Horesis簡稱PAGE)。

3 實驗結果

3.1 生藥形態鑒定結果

3.1.1 鱉甲：背甲橢圓形，長10～20cm,寬7～14cm。表面有不規則微凹的網紋，前端頸板兩側各有骨刺1～5個，

頸板與第一對肋板間有的樣品可見兩個圓形空洞，第一對肋板間椎板1塊，長大于寬，第一對肋板外緣小于中縫，肋

板發達，最后一對肋板相接成中逢，肋骨伸出肋板緣。

3.1.2 緣板鱉甲：背甲倒卵圓形，上寬下窄，邊緣微波狀，長15～23cm,寬5～17cm,表面密布顆粒狀突起，頸板

比任何一個后緣板都大，頸板兩側無骨刺，第一對肋板間椎板兩塊，寬大于長。肋板8對，最后2對肋板披此相接。

以最后一對中縫最長，肋骨8條不伸出肋板之外或微伸出。

3.1.3 黿甲：背甲近圓形，長24～129cm,寬22～74cm,整個背盤表面粗糙，有小凹溝和蠕蟲紋。第一對肋板間僅

有一塊椎板，椎板7～8塊，肋板8對，最后一對彼此相接成中縫。

3.1.4 宏鱉甲：背甲卵圓形，或橢圓形，長14～40cm,寬12～36cm,表面布滿長短不一的縱棱和細溝紋，第一對

肋板間常有二枚椎板。第一對肋骨呈漿狀伸出板緣，第8對肋骨極細小。

3.1.5 軟鱉甲：背甲卵圓形或橢圓形，長20～60cm,寬28～56cm,淺黑褐色，布滿黑褐色網紋和蠕蟲紋，前端圓

后端平切，側緣波狀，頸板新月形，第一對肋板僅一枚椎板，第8對肋板后半部彼此相連于中縫，肋骨粗大，略超出

肋板緣。

五種鱉甲的形態檢索表

1 第一對肋板板間有二枚椎板

................................

2 背甲呈倒卵形，上寬下窄，肋骨不伸出肋板外緣板鱉甲

...............

2 卵圓形，長卵圓形，第一對肋骨呈漿狀伸出板緣，第8對肋骨極細小宏鱉甲

1 第一對肋板間有一枚椎板

2橢圓形，表面有不規則的網紋，第一對肋板外緣小于中縫，最后一對肋板相接成中縫，肋骨伸出肋板緣

3背甲橢圓形，小型，長14～24cm,寬7～10cm表面有不規則的微凹的網紋鱉甲

3背甲近圓形，大型，長大于24cm，整個背盤粗糙，表面有小凹溝和蠕蟲紋黿甲

2 卵圓形，前端圓后端平切，肋骨粗大，略超過肋板緣軟鱉甲

..............

............

............................

3.2 蛋白電泳(PAGE)分析結果

從電泳圖譜可見，樣品經3種不同方法處理后所得的電泳圖譜均有差異，可根據電泳譜帶的數目、分布區域、著

色程度及泳動率等方面來加以區別不同的鱉甲。

4 小結與討論

4.1 本次實驗共收集中華鱉背甲10份，非中華鱉類背甲4種樣品共10份，并對非中華鱉類的背甲進行了生藥學

鑒定，共有以下4個品種：①緣板鱉甲Lismys punctata scutata(Schoepff)；②黿鱉甲Pelochelys bibroni(Owen)；

③軟鱉甲Trionys cartilagines(Boddaert)；④宏鱉甲Trionys hurum(Gray)。

4.2 5種不同品種的樣品從性狀特征看，除表面的色澤厚薄有時略有變化外，其肋板、椎板、肋骨的數目、形態、

相對大小及排列位置均有較為明顯的區別且穩定，依據形態研究的情況，本實驗列出了鑒別5種不同鱉的背甲的藥材

檢索表。

4.3 對5種不同品種的鱉甲樣品以聚丙烯酰胺凝膠電泳法試驗表明，各種不同種源的鱉甲含有相同的蛋白質，但

其含量不盡相同。另外，不同種源的鱉甲也具有不同的蛋白質成分，本實驗也證明，動物種間所含蛋白質種類是穩定

的，因而本次蛋白質電泳的結果與形態學上的區別相吻合，可作為鑒別鱉甲品種真偽的鑒定方法。

4.4 鱉甲是常用中藥之一，早記戴于《神農本草經》，列為中品。《中國藥典》95年版僅收載鱉種動物鱉Trongxinem

Witgmau的背甲作鱉甲用。歷代本草對鱉甲早有論述，李時珍《本草綱目》則博采諸家學說加以論述，指出鱉有鱉、納

［2］

鱉、能鱉、珠鱉、朱鱉、黿等數種，并對納鱉、能鱉都指出有毒，與鱉甲不同。《本草逢源》：黿甲功同鱉甲，但

鱉走肝而黿走脾，故治療上稍有不同。由于當時缺乏系統的動物分類學知識，因此描述和分類尚不明確。鱉甲由于醫

療市場需求量日趨增加，因此來源也日趨復雜，所以對鱉甲的研究是十分必要的，這些都需要生物學、生物化學、化

學、藥理學、臨床醫學等各門學科加以研究，希望能引起有關部門的重視。

參考文獻

［1］ 中國藥典.一部.1995∶341.

［2］ 李明珍.本草綱目.第一版.第四冊.北京：人民衛生出版社，1981∶2507.

收稿日期：1998-05-17