周春麗, 蘇虎, 王德解, 李玉萍
【摘要】 目的提取馬齒莧中多糖、生物堿、多不飽和脂肪酸和黃酮有效成分及定量,為研制治療糖尿病的功能性食品提供根據。方法分別采用不同有機溶劑提取方法提取有效成分。結果幾種有效物質的含量由大到小依次為多糖、生物堿、黃酮、多不飽和脂肪酸。結論南昌地區馬齒莧中含有以上4種有效成分且生物堿含量比其他地區稍高。
【關鍵詞】 馬齒莧 有效成分 提取
Abstract:ObjectiveTo extract and determine the contents active ingredients from polysaccharide, alkaloids, flavonoid material and polyunsaturated fatty acid of Portulace oleracea L. MethodsThe active ingredients were extracted in different organ solvent respectively. ResultsThe result showed that veral active ingredients content existed in Rortulace olercaeal. The content order was subquently polysaccharide, alkaloids, flavoinvid material, and polyunsaturated fatty acid. ConclusionThe result shows that four act
ive ingredients really exist in Portulace oleracea L. in Nanchang and alkaloids in Nanchang are higher than the ones in other area.
Key words:Portulace oleracea L.; Active ingredients; Extraction
馬齒莧Portulaca oleracea L.屬馬齒莧科(Portulacaceae),一年生肉質草本植物,是我國古老的菜藥兼用植物,在我國大局部地區均有分布,又名長命菜、五行草、瓜子菜、麻繩菜、五色莧、馬食菜等。馬齒莧以其豐富的營養、獨特的藥理作用以及菜藥兼用特性,早已被民間廣泛應用于治療熱毒血痢、癰腫、疔瘡、蛇蟲咬傷和便血等疾病[1,2],日益受到廣泛的研究。現代科學研究也說明,馬齒莧含有大量維生素、礦物質、不飽和脂肪酸、微量元素和豐富的檸檬酸、蘋果酸、氨基酸、去甲腎上腺素、多巴胺、強心苷、蒽醌類、香豆素、黃酮、生物堿等多種活性成分[3~5],具有降血脂、降血糖、抗衰老、消炎抑菌、增強免疫等多種保健功能和疾病治療作用[5~7],被國家衛生部認定為藥食同源的保健功能食品之一,具有廣闊的開發前景。本實驗對馬齒莧有效成分進展提取和定量分析,以期為治療糖尿病的功能性食品的研制提供根據。
1 器材與方法
1.1 儀器與試劑
LAMBDA 35 型紫外分光光度計,Heraeus 烘箱,Philips Comfort粉碎機,SORVALL Evolution RC型離心機,磁力攪拌器〔SI VORTEX〕,通風櫥,安捷倫6820型氣相色譜、旋轉蒸發儀(RE-52AA)。
石油醚,氫氧化鉀,無水乙醇,尿素,10%硫酸,氨水,無水乙醇,氯仿均為國產分析純。
1.2 材料馬齒莧采自江西南昌一帶,將其于烘箱中在60℃烘干至恒重,粉碎,密封備用。
1.3 步驟
1.3.1 馬齒莧多糖的提取葡萄糖標準曲線的制作:蒽酮硫酸法測定糖含量,標準曲線方程:Y=0.584 3X+0.010 3(R2=0.997 1)。
馬齒莧多糖的提取和測定[8]:準確稱取馬齒莧粉末100 g,按照1:30(W:V)參加蒸餾水,水煎煮3次〔1.5,1.0,0.5 h〕,過濾,合并3次提取液,濃縮提取液,冷卻后4 000 r/
min離心15 min,取上清,以無水乙醇調制終濃度為75%,4℃靜置過夜,沉淀物再分別以無水乙醇、丙酮、乙醚回流洗滌,得灰白色粗多糖粉末,以適量蒸餾水溶解粉末,置4℃冰箱備用。
1.3.2 馬齒莧多不飽和脂肪酸的提取亞麻酸甲酯標準曲線的制作:利用安捷倫6820型氣相色譜制作標準曲線,采取標準品內標法。氣相色譜條件:前進樣口溫度220℃,前檢測器溫度300℃,后檢測器溫度275℃,柱溫150℃保持時間1 min,以15℃/min升溫至200℃,以2℃/min升溫至250℃,保持5 min。載氣〔N2〕20ml/min,輔助氣〔H2〕30 ml/min,空氣〔助燃氣〕350 ml/min,進樣量1μl。標準曲線方程:Y=2 196.9X+1 305.4(R2=0.981 6)。
馬齒莧不飽和脂肪酸的提取和測定[9,10]:稱取馬齒莧干粉100 g,按1∶4的體積比例參加400 ml石油醚,室溫攪拌2 h,4 000 r/min,4℃離心15 min,取上清液,揮發盡石油醚,得黏稠狀褐色油狀物,稱重,稱取1/4倍于油狀物的KOH,以3∶80〔W/V〕的比例溶于無水乙醇中。加至油狀物中,攪拌,皂化反響45 min。再在4℃反響60 min。過濾,得透明溶液,濃縮回收乙醇,使乙醇含量不大于50%。參加等體積的蒸餾水,用濃鹽酸調至
出現分層〔pH 2.0左右〕為止,取上層油相。70℃水浴制備含有一定比例〔20%〕尿素的乙醇溶液。按2.4倍濾液體積的比例參加油相中,70℃水浴攪拌使溶液呈均勻的透明相。置4℃冰箱放置6h,過濾或離心除去包合物,濃縮回收乙醇。參加4倍于油狀物的蒸餾水稀釋,用1/3倍體積的氯仿萃取3次,揮發氯仿,得濃縮的多不飽和脂肪酸。
1.3.3 馬齒莧生物堿的提取[11]稱取100 g馬齒莧粉末,加500 ml無水乙醇,40℃攪拌1 h。過濾,搜集濾液,濾渣中加300 ml的無水乙醇,40℃攪拌1.5 h。過濾,搜集濾液,濾渣中加300 ml的無水乙醇,40℃攪拌30 min。過濾,搜集濾液,合并以上3次濾液。置旋轉蒸發儀中揮發盡乙醇,出現黑色浸膏。在浸膏中加50 ml 10%的硫酸溶解,過濾。用氨水調pH至10.0,參加10ml 飽和NaCl〔36 g NaCl / 100 g〕水溶液。用1/5倍體積于原溶液的氯仿萃取5次,置通風廚中將氯仿揮發盡,10%乙醇溶解。