第一節(jié)概述
依據(jù)藥典進(jìn)行的藥物分析主要有三大項：鑒別、檢查和含量測定。藥物的鑒別試驗（identification test）是用于鑒別藥物的真?zhèn)危谒幬锓治鲋袑偈醉椆ぷ鳎挥凶C實被分析的藥物是真的，才有必要接著進(jìn)行檢查、含量測定。藥典所收載的藥物項下的鑒別試驗方法，僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證實是否為其所標(biāo)示的藥物。它與分析化學(xué)中的定性鑒別有所區(qū)別。這些試驗方法不能賴以鑒別未知物。原料藥：鑒別試驗結(jié)合性狀項下的外觀和物理常數(shù)進(jìn)行確證。一、鑒別的項目（一）性狀藥物的性狀反映了藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、嗅、味、溶解度以及物理常數(shù)等。（二）一般鑒別試驗（general identification test） *以藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理化學(xué)性質(zhì)為依據(jù)，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物真?zhèn)蔚摹?*無機(jī)藥物：根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)，并以藥典附錄III項下的一般鑒別試驗為依據(jù)，*有機(jī)藥物：采用典型的官能團(tuán)反應(yīng)。 *一般鑒別試驗的項目：丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類、
無機(jī)金屬鹽類（鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鈣鹽、鋇鹽、銨鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋁鹽、鋅鹽、銅鹽、
銀鹽、汞鹽、鉍鹽、銻鹽、亞錫鹽）、
有機(jī)酸鹽（水楊酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、酒石酸鹽）、
無機(jī)酸鹽（亞硫酸鹽或亞硫酸氫鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽與碳酸氫鹽、醋酸鹽、磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物）。
*一般鑒別試驗僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時，除另有規(guī)定外，應(yīng)不適用。 *通過一般鑒別試驗只能證實是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物。例如，經(jīng)一般鑒別反應(yīng)的鈉鹽試驗，證實某一藥物為鈉鹽，但不能辨認(rèn)是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其它某一種鈉鹽藥物。要想最后證實被鑒別的物質(zhì)到底是哪一種藥物，必須在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行專屬鑒別試驗，方可確認(rèn)。（三）專屬鑒別試驗（specific identification test）*根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性的不同，選用某些特有的靈敏定性
反應(yīng)，來鑒別藥物真?zhèn)蔚摹Ｊ亲C實某一種藥物的依據(jù)。綜上所述，一般鑒別試驗是以某些類別藥物的共同化學(xué)結(jié)構(gòu)為依據(jù)，根據(jù)其相同的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行藥物真?zhèn)蔚蔫b別，以區(qū)
別不同類別的藥物。而專屬鑒別試驗，則是在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，利用各種藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)差異，來鑒別藥物，以區(qū)別同類藥物或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)部分的各個藥物單體，達(dá)到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康摹６㈣b別試驗條件鑒別試驗是以所采用的化學(xué)反應(yīng)或物理特性產(chǎn)生的明顯的易于覺察的特征變化為依據(jù)。因此，能影響鑒別試驗判定結(jié)果的特征變化的因素都是應(yīng)當(dāng)精心選擇和嚴(yán)格控制的。也就是說，鑒別試驗應(yīng)該是在規(guī)定條件下完成的，否則鑒別試驗的結(jié)果是不可信的。（一）溶液的濃度主要指被鑒別藥物的濃度，及所用試劑的濃度。由于鑒別試驗多采用觀測沉淀、顏色或各種光學(xué)參數(shù)（、、A、等）的變化，來判定結(jié)果，而藥物和有關(guān)試劑的濃度會直接影響上述的各種變化，必須嚴(yán)格規(guī)定溶液的濃度。（二）溶液的溫度溫度對化學(xué)反應(yīng)的影響很大，一般溫度每升高10℃，可使反應(yīng)速度增加2-4倍。（三）溶液的酸堿度許多鑒別反應(yīng)都需要在一定酸堿度的條件下才能進(jìn)行。溶液酸堿度的作用，在于能使各反應(yīng)物有足夠的濃度處于反應(yīng)活化狀態(tài)，使反應(yīng)生成物處于穩(wěn)定和易于觀測的狀態(tài)。（四）干擾成分的存在在鑒別試驗中，如藥物結(jié)構(gòu)中的其它部分或藥物制劑中的其它組分也可參加鑒別反應(yīng)，產(chǎn)生干擾，應(yīng)選擇專屬性更高的鑒別反應(yīng)將其消除或?qū)⑵浞蛛x。（五）試驗時間有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)和無機(jī)化合物不同，一般反應(yīng)速度較慢，達(dá)到預(yù)期試驗結(jié)果需要較長的時間。這是因為有機(jī)化合物是以共價鍵相
結(jié)合，化學(xué)反應(yīng)能否進(jìn)行，依賴于共價鍵的斷裂和新價鍵形成的難易，這些價鍵的更替需要一定的反應(yīng)時間和條件。同時在化學(xué)反應(yīng)過程中，有時存在著許多中間階段，甚至需加入催化劑才能啟動反應(yīng)。因此，使鑒別反應(yīng)完成，需要一定時間。三、鑒別試驗的靈敏度（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗反應(yīng)的靈敏度（nsitivity）:在一定條件下，能在盡可能稀的溶液中觀測出盡可能少量的供試品，反應(yīng)對這一要求所能滿足的程度。它以兩個相互有關(guān)的量，即最低檢出量（minimum detectable quantity）（又稱檢出限量）和最低檢出濃度（minimum detectable concentration）（又稱界限濃度）來表示。最低檢出量（以m表示），就是應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能夠觀測出的供試品的最小量，其單位通常用微克（g）表示（1 g＝10-6g）。最低檢出濃度就是應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定條件下，能夠觀測出供試品的最低濃度，通常以1∶G（或1∶V）表示，其中G（V）表示含有1g重某供試品的溶液的g（ml）數(shù)。最低檢出量和最低檢出濃度之間的關(guān)系可以用下式表示，式中v為鑒別試驗時，所取供試溶液的最小體積（ml）。如果選用鑒
別反應(yīng)的靈敏度愈高，則產(chǎn)生可被觀測的結(jié)果所需要的藥物愈少。空白試驗（blank test）: 所謂空白試驗，就是在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，其它試劑同樣加入進(jìn)行的試驗。在選用靈敏度很高的反應(yīng)時，必須采用高純度的試劑和非常潔凈的
器皿，才能保證鑒別試驗結(jié)果的可靠性。為了消除試劑和器皿可能帶來的影響，應(yīng)同時進(jìn)行空白試驗，以供對照。（二）提高反應(yīng)靈敏度的方法在實際工作中，常采用以下措施來提高反應(yīng)的靈敏度。1．加入與水互不相溶的有機(jī)溶劑在鑒別試驗中，如生成物具有顏色并顏色很淺時，可利用加入少量與水互不相溶的有機(jī)溶劑，濃集有色生成物，使有機(jī)溶劑中顏色變深，易于觀測。 2．改進(jìn)觀測方法例如，將目視觀測溶液的顏色，改為可見分光光度法；將觀測生成沉淀改為比濁度法等。
第二節(jié)藥物的一般鑒別試驗
一、鑒別方法（一）化學(xué)鑒別法 1．干法將供試品加適當(dāng)試劑在規(guī)定的溫度條件下（一般是高溫）進(jìn)行試驗，觀測此時所發(fā)生的特異現(xiàn)象。
(1）焰色試驗:常用干法，利用某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活慃}類藥物。
方法為：取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。(2)加熱分解:在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。 2．
濕法系指將供試品和試劑在適當(dāng)?shù)娜軇┲校谝欢l件下進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)生易于觀測的化學(xué)變化，如顏色、沉淀、氣體、熒光等。 (1）呈色反應(yīng)鑒別法：系指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤海谝欢l件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測的有色產(chǎn)物。在鑒別試驗中最為常用的反應(yīng)類型有： 1）三氯化鐵呈色反應(yīng)---酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基； 2）異羥肟酸鐵反應(yīng)---多為芳酸及其酯類、酰胺類；3）茚三酮呈色反應(yīng)---脂肪氨基； 4）重氮化-偶合顯色反應(yīng)---芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基； 5）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)。（2）沉淀生成反應(yīng)鑒別法：常用的這類反應(yīng)有：
１）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不同形式的沉淀；2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽； 3）其它沉淀反應(yīng)。（3）熒光反應(yīng)鑒別法：常用的熒光發(fā)射形式有以下類型： 1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光； 2）藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光； 3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光； 4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒
光。 (4）氣體生成反應(yīng)鑒別法： 1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺
類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣； 2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體； 3）含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。（二）光譜鑒別法 1．紫外光譜鑒別法常用的方法有： 1）標(biāo)準(zhǔn)品對照法； 2）規(guī)定吸收波長法； 3）規(guī)定吸收波長和相應(yīng)的吸收度法； 4）規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法； 5）規(guī)定吸收波長和吸收度比值法。 2．紅外光譜鑒別法紅外光譜法是一種專屬性很強(qiáng)、應(yīng)用較廣（固體、液體、氣體樣品）的鑒別方法。
1.標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法：中國藥典（1995年版）和BP (1993)
2.對照品法：USP (23)。
（三）色譜鑒別法利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（Rf值或保留時間）進(jìn)行鑒別試驗。常用的方法有： 1.薄層色譜鑒別法在實際工作中，一般采用對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，要求供試品斑點(diǎn)的Rf值應(yīng)與對照品斑點(diǎn)一致。 2.高效液相色譜鑒別法一般規(guī)定按供試品含量測定項下的高效液相色譜條件進(jìn)行試驗。要求供試品和對照品色譜峰的保留時間應(yīng)一致。含量測定方法為內(nèi)標(biāo)法時，可要求供試品溶液和對照品溶液色
譜圖中藥物峰保留時間與內(nèi)標(biāo)物峰的保留時間比值應(yīng)相同。 3.氣相色譜鑒別法方法同高效液相色譜法。 4.紙色譜鑒別法紙色譜法存在分離效能低、分析時間長等缺點(diǎn)，在藥物鑒別試驗中逐漸被薄層色譜法所取代。
